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闫 志 勇 青岛大学医学院微生物学教研室

青岛大学医学院医学检验系. 实验 3. 链球菌属. 闫 志 勇 青岛大学医学院微生物学教研室. 可疑菌落，观察溶血情况. γ 溶血. β 溶血. α 溶血. Optochin. —. +. 杆菌肽 S. cAMP +. 胆汁七叶苷 +. 均（ — ）. 肺炎链球菌. 胆汁七叶苷. 其他链球菌. —. +. 6.5% NaCl. 草绿色链球菌. +. —. A 群. B 群. D 群. 肠球菌. 非肠球菌. 实验材料. 一、菌种： A 、 B 、 D 群链球菌，肺炎链球菌，草绿色链球菌。

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  1. 青岛大学医学院医学检验系 实验3. 链球菌属 闫 志 勇 青岛大学医学院微生物学教研室

  2. 可疑菌落，观察溶血情况 γ溶血 β溶血 α溶血 Optochin — + 杆菌肽S cAMP+ 胆汁七叶苷 + 均（—） 肺炎链球菌 胆汁七叶苷 其他链球菌 — + 6.5% NaCl 草绿色链球菌 + — A 群 B 群 D 群 肠球菌 非肠球菌

  3. 实验材料 一、菌种： A、B、D群链球菌，肺炎链球菌，草绿色链球菌。 二、培养基： 血平板 5枚/组 血清肉汤管2支/组 三、生化管： 胆汁七叶苷、血清菊糖、高盐各2支/组 四、其他： 镊子、玻片、3%H2O2 optochin、杆菌肽纸片， 金黄色葡萄球菌

  4. 实验内容 一、形态观察： A、B、D群链球菌，肺炎链球菌，草绿色链球菌革兰染色。 二、培养物观察： 1. 菌落观察： A、B群链球菌，肺炎链球菌，草绿色链球菌接种血平板（BAP）。 2. 液体培养观察： 任取2种菌接种血清肉汤，观察生长情况。 （24h后取菌做革兰染色）

  5. 三、生化实验： 1. 触酶试验：3%H2O2 2. 生化试验： 1）杆菌肽敏感试验： A群、B群链球菌 2）胆汁七叶苷试验：草绿色链球菌、D群 3） cAMP 实验： A群、B群链球菌 4）高盐试验：草绿色链球菌 、D群链球菌 5）肺炎链球菌与草链球菌的鉴别： optochin敏感试验： 菊糖发酵试验：.

  6. 杆菌肽敏感试验： 0.04U杆菌肽(bacitracin)药敏纸片贴在涂布有待测菌的羊血琼脂平板上，35℃孵育过夜后，观察抑菌环以判断是否为敏感。化脓性链球菌为阳性，可与其他β溶血性链球菌区别。

  7. B链 金葡 cAMP实验 原理：无乳链球菌（B群）能产生cAMP因子，能促进金黄色葡萄球菌溶血能力，使其产生显著的协同溶血作用。 方法：先将金黄色葡萄球菌(ATCC25923) 沿直径划线接种，再沿该线垂直方向接种待测链球菌，两线不得相接，间隔约3～4mm。35℃孵育过夜，两种划线交界处出现箭头状溶血，即为阳性反应。本法可作为无乳链球菌的初步鉴定试验。

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