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荣昌猪遗传资源的保护与开发利用

荣昌猪遗传资源的保护与开发利用. 重庆市畜牧科学院 王金勇. 面积1079 人口: 81 万. 起源. 余德仁先生. 清康熙四十年（1701）前后，经过长期战乱，人口大减，清廷先后招湖广、江西等省人民实行退荒，不少人在荣昌落户。广东和湖南的移民来川时，将当地的白猪仔带入荣昌饲养，经过自然选育，逐步成为目前远近闻名的荣昌猪。. . 起源于本地 （古昌州） 公元1567年前. 起源湖广移民带入 公元1 649 年后 康熙二年至四十年. 项目来源： “十一五”国家科技支撑计划 项目名称： 荣昌猪品种资源开发关键技术研究与

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荣昌猪遗传资源的保护与开发利用

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Presentation Transcript

  1. 荣昌猪遗传资源的保护与开发利用 重庆市畜牧科学院 王金勇

  2. 面积1079人口:81万

  3. 起源 余德仁先生 清康熙四十年（1701）前后，经过长期战乱，人口大减，清廷先后招湖广、江西等省人民实行退荒，不少人在荣昌落户。广东和湖南的移民来川时，将当地的白猪仔带入荣昌饲养，经过自然选育，逐步成为目前远近闻名的荣昌猪。  起源于本地 （古昌州） 公元1567年前 起源湖广移民带入 公元1649年后 康熙二年至四十年

  4. 项目来源：“十一五”国家科技支撑计划 项目名称：荣昌猪品种资源开发关键技术研究与 产业化示范 项目编号：2007BAD51B03 牵头单位：重庆市畜牧科学院 参加单位：14个一级单位 起止年限：2007.07-2010.12

  5. 课题二 课题三 优异性状基因资源挖掘 DNA分子标记辅助选择、基因诊断技术 畜禽遗传资源共享平台 农村繁殖群 育种素材的收集 育种基础群的组建 荣昌猪资源群体 的大规模基因筛查 保种核心群(场) 世代选育 营养参数、饲养工艺 生物安全控制技术 荣昌猪专门化品系 配套系 高效冷冻保存 技术体系建立 畜禽遗传资源冷冻保存库 猪肉精深加工 产业化 示范 猪肉精加工关键技术 课题四、五 课题一 课题六

  6.  高效冷冻保存技术研究  三级保护体系建立  特色（优势）性状遗传基础研究  专门化品系选育  数字化

  7. 高效冷冻保存技术研究 猪精液冷冻技术研究 实验研究： 实验1、精液冷冻保存基础液配方的筛选 实验2、精液冷冻保存液配方的优化 实验3、精液冷冻解冻液配方的筛选 实验4、精液冷冻解冻速率的筛选

  8. 猪精液冷冻技术体系 采精 精液活率检查 精液稀释 采用最优猪冷冻精液稀释液配方 冻前平衡 采用V号解冻液配方 解冻速率为 27.5℃/s 液氮滴冻 冻精入库 解冻 输精 精液品质检查

  9. 高效冷冻保存技术研究 猪卵母细胞冷冻保存技术研究 实验研究： 实验1、不同冷冻保护剂对猪MII期卵母细胞冷冻保存效果的影响 实验2、不同冷冻保存方法对猪MII期卵母细胞冷冻保存效果的影响 实验3、冻后猪卵母细胞作激活后发育效果

  10. 卵母细胞体外成熟培养 入库保存 OPS玻璃化冷冻 EDFS40 玻璃化解冻 FDA检测存活 场强100V/mm，80μs、3次，每次间隔100ms 激活 CB处理 7.5μg/ml 、6h 144h检测囊胚率 发育培育44h 检测卵裂率 猪卵母细胞冷冻保存技术体系

  11. 高效冷冻保存技术研究 猪胚胎冷冻技术研究 实验研究： 实验1、猪胚胎的常规冷冻保存 实验2、玻璃化冷冻液对猪扩张囊胚冷冻效果的影响 实验3、冷冻处理方法对玻璃化猪囊胚冷冻效果的影响 实验4、猪胚胎的移植

  12. 超数排卵并计划配种 配种后6-7天囊胚 手术采胚 CB处理 7.5μg/ml、30min 离心 13000r/min、13min OPS冷冻 入库保存 解冻 检测冻后品质 移植 猪胚胎冷冻保存技术体系

  13. 三级保护体系建立

  14. 四个保护区 昌州街道石河村保护区 峰高街道峨眉社区保护区 直升镇火烧店社区、漫水村保护区 双河街道高峰村、白云社区保护区

  15. 两个保种场（1个国家级）

  16. 两个保种场（1个市级）

  17. 一个冷冻保存库 DNA样本库（22 m2） 胚胎、配子冷冻保存库（36 m2）

  18. 构建了荣昌猪BAC 文库 BAC文库包含约19.2万个克隆作，平均插入基因组片段为120kb，约覆盖猪全部基因组的7 倍以上。 为研究荣昌猪基因组、基因结构以及新基因发现等工作奠定了坚实的基础。该文库是我国乃至国际上第一套荣昌猪的BAC文库，是研究我国优良地方品种遗传资源的重要平台。

  19. 特色（优势）性状遗传基础研究 荣昌仔猪早期肌肉、脂肪生长规律研究 • 哺乳仔猪从出生至80日龄，每隔7天跟踪测量 • 用超声诊断仪测量眼肌面积和背膘厚度

  20. 荣昌仔猪早期肌肉、脂肪生长规律研究 眼肌体重生长曲线 眼肌日龄生长曲线 背膘日龄生长曲线 背膘体重生长曲线

  21. 特色（优势）性状遗传基础研究 荣昌乳猪氨基酸组成及含量分析 荣昌乳猪肌肉氨基酸分析典型色谱图 荣昌乳猪肌肉中脯氨酸典型色谱图

  22. 荣昌乳猪氨基酸组成及含量分析 荣昌乳猪四部位肌肉氨基酸分析典型色谱图 荣昌乳猪四部位肌肉中脯氨酸典型色谱图

  23. 不同部位荣昌乳猪肌肉中氨基酸含量 荣昌乳猪肌肉EAA/TAA在40%以上，是优质蛋白质来源 。 荣昌乳猪肌肉中主要呈味氨基酸含量较高，是肌肉风味挥发性成分的重要来源。

  24. 在所检测的17种氨基酸中，谷氨酸的含量最高，在3.60%～4.50%之间，约占总氨基酸含量的15%以上；天冬氨酸和赖氨酸的含量也较高，在2.00%～2.50%之间，约占总含量的8.80%～9.60%；最低的是半胱氨酸，仅为0.24%～0.59%，约占总含量的0.97%～2.20%。肉中总氨基酸含量随体重增加呈不断上升趋势，其中100 kg的总含量显著高于10 kg。 • 异亮氨酸、亮氨酸和苯丙氨酸含量在10～20 kg显著提高，随后呈缓慢上升趋势。可见，各氨基酸含量随体重的变化规律不尽相同。

  25. 荣昌乳猪脂肪酸组成及含量气相色谱分析 荣昌乳猪2号肉肌肉脂肪酸 典型气相色谱图 荣昌乳猪1号肉肌肉脂肪酸 典型气相色谱图 荣昌乳猪4 号肉肌肉脂肪酸 典型气相色谱图 荣昌乳猪3号肉肌肉脂肪酸 典型气相色谱图

  26. 四部位肌肉饱和脂肪酸（SFA）相对含量差异不显著（P＞0.05）四部位肌肉饱和脂肪酸（SFA）相对含量差异不显著（P＞0.05） 四部位肌肉多不饱和脂肪酸（PUFA）相对含量差异显著（P＜0.05） 四部位肌肉单不饱和脂肪酸（MUFA）相对含量差异不显著（P＞0.05） 荣昌乳猪四部位肌肉饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸 多不饱和脂肪酸相对含量的比较

  27. 荣昌乳猪四个部位肌肉中脂肪酸组成主要是C16和C18脂肪酸，占总量的85%以上，其它脂肪酸含量较少，荣昌乳猪四部位肌肉饱和脂肪酸（SFA）中，以棕榈酸（C16:0）和硬脂酸（C18:0）为主，占所测脂肪酸总量的45%左右，占所测饱和脂肪酸的90%以上。四部位肌肉饱和脂肪酸（SFA）总量差异不显著（P＞0.05）荣昌乳猪四个部位肌肉中脂肪酸组成主要是C16和C18脂肪酸，占总量的85%以上，其它脂肪酸含量较少，荣昌乳猪四部位肌肉饱和脂肪酸（SFA）中，以棕榈酸（C16:0）和硬脂酸（C18:0）为主，占所测脂肪酸总量的45%左右，占所测饱和脂肪酸的90%以上。四部位肌肉饱和脂肪酸（SFA）总量差异不显著（P＞0.05）

  28. 荣昌乳猪不同部位肌肉中挥发性物质种类及数量 荣昌乳猪背最长肌肉（2号肉）挥发性风味物质指纹图 荣昌乳猪背臀腿肉（3号肉）挥发性风味物质指纹图

  29. 荣昌乳猪不同部位肌肉中挥发性香气物质种类及数量分别为：2号肉，共计11大类140种物质；3号肉共计11大类90种物质；4号肉共计11大类86种物质。荣昌乳猪不同部位肌肉中挥发性香气物质种类及数量分别为：2号肉，共计11大类140种物质；3号肉共计11大类90种物质；4号肉共计11大类86种物质。 • 荣昌乳猪各部位检测到的挥发性风味物质相对含量最高的是己醛。 • 荣昌乳猪肌肉中占优势的挥发性风味物质主要有：丁醛、戊醛、2-甲基丁醛、己醛、庚醛、苯甲醛、辛醛、壬醛、正癸醛、环戊醇、1-戊醇、1-己醇、1-庚醇、1-辛烯-3-醇、2-癸烯-1-醇、1-辛醇、芳樟醇、2-丁酮、2,3-辛烷二酮、6-甲基-5-庚烯-2-酮、丙酮酸、α,γ-二乙酰基乙酰醋酸、2,2,4-三甲基-3-羧异丙基戊酸异丁基酯、邻苯二乙酸异丁基十八(烷)基酯、辛烷、十一烷、D-柠檬烯、1-碘-2甲基壬烷、3-甲硫基丙醛、2-甲基-1-丁硫醇、3,3-二甲基哌啶、4,5-二乙基-2，3-二甲基-二氢呋喃。

  30. 快肌免疫荧光组化分析 慢肌免疫荧光组化分析 不同部位肌肉、脂肪组织显微结构分析

  31. 特色（优势）性状遗传基础研究 荣昌猪不同部位脂肪组织的基因表达谱研究 利用全基因组表达谱基因芯片分析不同品种、不同部位、不同发育方式脂肪组织基因表达差异 不同部位、不同类型脂肪组织

  32. 荣昌猪不同部位脂肪组织的基因表达谱研究 筛选到大量的差异表达基因，揭示了品种间、部位间、性别间脂肪组织巨大表型差异背后的分子调控机制。 差异基因染色体富集叠瓦图 差异基因表达模式聚类图

  33. 特色（优势）性状遗传基础研究 猪microRNA组研究 • 选择荣昌猪胚胎期发育和生后发育阶段的10个时间点 • 采用高通量测序手段大规模发现猪microRNA

  34. 猪microRNA组研究 • 完成了首个从出生前到出生后整个发育阶段的microRNA组图谱。 • pre-miRNA序列增至867条，编码的成熟体miRNA序列增至1004条，其中特异miRNA序列达到777条。

  35. 特色（优势）性状遗传基础研究 全白荣昌猪耳聋的遗传机制研究

  36. 底 回 顶 回 中 回 正常个体 耳聋个体 听觉脑干诱发电位图 通过脑干听觉诱发电位（ABR）检测、扫描电镜、耳蜗铺片及抗体染色等证实，全白荣昌猪耳蜗毛细胞的缺失和纤毛的融合是导致耳聋的直接原因。 耳蜗毛细胞扫描电镜图

  37. 专门化品系选育 渝荣I号猪配套系（2007） 新荣昌猪I系（1996）

  38. 专门化品系选育 荣昌猪烤乳猪专门化品系 核心选育群有公猪12头，能繁母猪 110头，经产仔猪数达12.54头，达6kg体重日龄34.8天。

  39. 专门化品系选育 荣昌猪高脂肪含量专门化品系 群体规模达到120头基础母猪，6个公猪家系，肌内脂肪含量6.24%、经产仔数12.51头、瘦肉率40.15%

  40. 数字化 荣昌母猪数据集 共计2315张连续断面图像，数据集总数据量为69.9GB。

  41. 荣昌公猪数据集 共计7254张连续断面图像，整个数据集总数据量为229GB。

  42. 荣昌怀孕母猪数据集 共计6525张连续断面图像，整个数据集总数据量为199GB。

  43. 荣昌仔猪数据集 共计2495张连续断面图像，整个数据集总数据量为79GB。

  44. 整体三维重建

  45. 小结  荣昌猪多层次保护体系 保护区/保种场/冷冻库/BAC文库  特色（优势）性状 肉质/脂肪沉积/人类疾病模型  结构 数字化/基因组重测序  专门化品系选育

  46. 谢谢！

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