第五章第一节病毒性鱼病

第五章第一节病毒性鱼病 

病毒的特性 • 病毒颗粒很小，测量单位为纳米（nm），病毒一般小于150纳米。 • 病毒颗粒主要由核酸（DNA或RNA）和蛋白质组成，不具备完整的细胞结构。 • 以复制的方式进行繁殖。 • 当病毒在细胞内生长繁殖时，可引起细胞形成一种特殊的斑块结构，称为包涵体，经特殊染色后，可在普通显微镜下看到。 • 专性细胞内寄生，病毒只能在活细胞内生长增值。 • 没有理想的治疗方法，主要是进行预防。 

一、草鱼出血病 • 病毒的特性 (一)、病原体 (二)、流行情况 (三)、症状 (四)、诊断 (五)、预防措施 (六)、治疗方法

(一)、病原体 • 草鱼出血病病毒（也叫呼肠孤病毒），属呼肠孤病毒科。病毒为20面体球形颗粒，直径为60-80纳米，具双层衣壳； • 病毒基因组由 11条双股核糖核酸（RNA）组成。 • 病毒耐酸（pH3），耐碱（pH10），耐热（ 56℃）。 • 病毒复制部位在细胞浆，最适复制温度为25-30℃，其生长温度范围是20-35℃。 • 尚未发现在非鲤科鱼类细胞株中增殖。 • 毛树坚等（ 1989）报道，在浙江地区患出血病的草鱼中还分离到一种小病毒颗粒，大小为20-30纳米，六角形，为单股核糖核酸病毒，经初步鉴别，属小核糖核酸病毒科。 

(二)、流行情况 • 草鱼出血病是鱼种培育阶段一种流行地区广泛、流行季节长、发病率高、死亡率高、危害性大的病毒性鱼病。 • 主要危害全长2.5-15厘米的草鱼鱼种及1足龄的青鱼，有时2足龄以上的大草鱼也患病，青鱼以及麦穗鱼等也可患病。 • 水温在20-33℃时发生流行，最适流行水温为27-30℃；每年6-9月是此病的主要流行季节。 • 但当水质恶化，水中溶氧低，透明度低，水中总氮、有机氮、亚硝酸态氮和有机物耗氧量高，水温变化大，鱼体抵抗力低下，病毒的数量多及毒力强时，则在水温12℃及34. 50℃时也有发病。 • 该病可通过被污染的水、食物等进行水平传播，也可通过卵进行垂直传播。 

主要流行于长江流域和珠江流域诸省市，尤以长江中、下游地区为甚，近年来在华北地区也有发生。主要流行于长江流域和珠江流域诸省市，尤以长江中、下游地区为甚，近年来在华北地区也有发生。 • 流行严重时，发病率达30%-40%，死亡率可达50%左右，严重影响草鱼养殖。病毒的传染源主要是带毒的草鱼、青鱼以及麦穗鱼等。 • 人工感染健康草鱼鱼种，从感染到发病死亡约需4-15天，一般是7-10天。病程分潜伏期、前趋期和充分发展期三个阶段。 • 1、潜伏期从病毒侵入鱼体到出现症状以前的一段时间叫潜伏期。草鱼出血病的潜伏期约3-10天。 • 2、前趋期这期的期限很短。这期的特征为病鱼已开始出现症状，但不够明显，出现的症状也还不是这种病所特有的。草鱼出血病的前趋期，一般为1-2天，此时病鱼的体色发暗变黑、离群独游、摄食减少或停止。 • 3、充分发展期出现这种病的典型症状。草鱼出血病的充分发展期时间长短不一，一般为1-2天，此期病鱼表现充血、出血等典型症状而死。 

(三)、症状 • 病鱼体色发黑，离群独游水面，反应迟钝，摄食减少或停止。主要症状是病鱼各器官组织有不同程度的充血、出血。 • 根据病鱼所表现的症状及病理变化，大致可分为如下三种类型： • （1）“红肌肉”型。病鱼外表无明显的出血症状，或仅表现轻微出血，但肌肉明显充血，严重时全身肌肉均呈红色，鳃瓣则严重失血，出现“白鳃”。这种类型一般在较小的草鱼种（体长7-10cm）较常见。 • （2）“红鳍红鳃盖”型。病鱼的鳃盖、鳍基、头顶、口腔、眼眶等明显充血，有时鳞片下也有充血现象，但肌肉充血不明显，或仅局部出现点状充血。这种类型一般见于在较大的草鱼种（体长13cm以上）上出现。 • （3）“肠炎”型。病鱼体表及肌肉的充血现象均不明显，但肠道严重充血。肠道部分或全部呈鲜红色，肠系膜、脂肪、鳔壁等有时有点状充血。肠壁充血时，仍具韧性，肠内虽无食物，但很少充有气泡或黏液。这种类型在各种规格的草鱼种中都可见到。 • 上述三种类型的病理变化可同时出现，亦可交互出现。 

草鱼出血病—全身出血、眼球突出 

四、诊断 • 1、根据症状及流行情况进行初步诊断 • 在根据症状及流行情况进行初步诊断时，必须注意以下区别： • （1）以肠出血为主的草鱼出血病和细菌性肠炎病的区别：活检时，前者的肠壁弹性较好，肠腔内黏液较少；病情严重时，肠腔内有大量红细胞及成片脱落的上皮细胞。而后者的肠壁弹性较差，肠腔内黏液较多；病情严重时，肠腔内有大量黏液和坏死脱落的上皮细胞，红细胞较少。 • （2）草鱼出血病和细菌性败血症的区别 • 前者主要危害草鱼、青鱼的鱼种；后者则危害团头鲂、鲫、鲢、鳙、鱖、加州鲈、黄鳝、草鱼、白鲳、银鲷、大口鲇等多种淡水鱼，且对鱼种，食用鱼均危害。 

(四)、诊断 • 2、根据病理变化可做出进一步诊断 • 3、免疫血清学及分子生物学诊断最后确诊 • 确诊可采用免疫学诊断方法：葡萄球菌A蛋白协同凝集试验、酶联染色技术等； • 病毒的分离培养、攻毒试验，电镜观察病毒颗粒等。 

(五)、预防措施 • 1、清除池底过多淤泥 • 用生石灰、漂白粉、漂粉精、二氯异氰尿酸钠、三氯异氰尿酸等消毒。 • 2、实行检疫制度，严禁携带病毒的鱼卵输人及运出鱼卵。 • 用伏碘1％水溶液药浴10-20分钟。 • 3、夏花鱼种用每立方米水体中加5毫升双链季铵盐络合碘药浴10-20分钟。 • 4、加强饲养管理，进行生态防病 • 如投放光合细菌；保持水质优良、稳定；投喂营养全面、含免疫增强剂的优质饲料， • 5、培育抗出血病草鱼鱼种 

6、人工免疫预防 • 组织浆灭活疫苗或细胞培养灭活疫苗（效果好，实验室），免疫力产生的时间随水温的升高而缩短，水温10℃时需30天，15℃时20天，当水温20℃以上时只需4天；免疫期可保持14个月。 • （1）灭活疫苗制备 • 取患典型出血病的濒死草鱼的肾、脾、肝和肌肉组织 • 称重、剪碎，加9倍量无菌生理盐水，进行匀浆 • 3 000-3 500转/分低温离心30分钟，取上清液， • 在每毫升上清液中加青霉素1 000单位和链霉素1 000微克，摇匀后，放在4 ℃以下处过夜除菌，即为组织浆病毒悬液。 • 然后再加福尔马林至最终浓度为0.1％，摇匀后，放人32℃恒温水浴锅中灭活72小时。取样作安全和效力试验， • 其余的都分装、封口，贴上标签置4℃冰箱保存。 • 取样——称重——匀浆——离心——取上清液——除菌——灭活——储备 

（2）免疫途径 • （1）注射法 • 8厘米以上草鱼鱼种，采用连续注射器进行腹腔或背鳍基部肌肉注射，每尾注射组织浆灭活疫苗0.3-0.5毫升。 • （2）浸浴法 • （3）口服法，特异化的饲料效果优于浸浴法。 • 7、药物预防 • 据报道，在草鱼出血病流行季节，每月外泼消毒药1-2次，内服药饲1-2个疗程，有预防效果。 • （1）外泼消毒药 • 二氧化氯、伏碘、双链季铵盐络合碘。 • （2）内服药饲 • ①每千克饲料中加170g大黄、黄芩、黄柏、板蓝根（单用或合用均可），再加170g食盐，拌匀后制成水中稳定性好的颗粒药饲，连喂3天。 • ②每千克饲料中加170g刺槐子、170g苍生2号、170g盐，拌匀后制成水中稳定性好的颗粒药饲投喂，连喂3天。 • ③每千克饲料中加鱼复药2号2.5g，拌匀后制成水中稳定性好的颗粒药饲投喂，连喂3天。 

(六)、治疗方法 • 在疾病早期，外泼消毒药2-4次，同时内服药饲7-10天，一定效果。 • 1、外用药 • 泼洒二氧化氯、伏碘、双链季铵盐络合碘等。 • 2、内服药 • （1）每千克饲料中加鱼复药2号0.5g，拌匀后制成水中稳定性好的颗粒药饲，连喂7-10天。 • （2）每千克饲料中加200g大黄、黄芩、黄柏、板蓝根（单用或合用均可），再加170g食盐，拌匀后制成水中稳定性好的颗粒药饲，连喂7-10天。 • （3）每100千克饲料中加双链季铵盐络合碘0.5-1毫升，拌匀后制成水中稳定性好的颗粒药饲，连喂7-10天。 

二、鲤痘疮病 • 【病原】鲤疱疹病毒 • 【症状】发病初期，病鱼体表出现薄而透明的灰白色小斑状增生物，以后小斑逐渐扩大，互联成片并增厚，形成不规则的玻璃样或蜡样增生物，形似癣状痘疮。背部、尾柄、鳍条和头部是痘疮密集区，严重的病鱼全身布满痘疮，病灶部位常有出血现象。

【流行情况】 该病早在1563年就有记载，流行于欧洲，现在朝鲜、日本及我国的湖北、江苏、云南、四川、河北、东北和上海等地均有发生，大多呈局部散在性流行，大批死亡现象较少见。主要发生在一足龄以上鲤鱼，鲫鱼可偶尔发生，同池混养的其他鱼则不感染。该病流行于秋末至春初的低温季节及密养池。水温在10~15℃时，水质肥沃的池塘和水库网箱养鲤中易发生。当水温升高或水质改善后，痘疮会自行脱落，条件恶化后又可复发。本病通过接触传播，也有人提出单殖吸虫、蛭、鲺等可能是传播媒介。

【防治】 • （1）严格执行检疫制度，不从患有痘疮病渔场进鱼种，不用患过病的亲鲤繁殖。 • （2）流行地区应改养对本病不敏感的鱼类。 • （3）做好越冬池和越冬鲤鱼的消毒工作，调节池水PH，使之保持在8左右。 • （4）秋末或初春时期，应注重改善水质或减少养殖密度。 • （5）发病池塘应及时灌注新水或转池饲养。

三、鲤春病毒血症 • 【病原】鲤弹状病毒（R.carpio）。 • 【症状】病鱼呼吸缓慢，沉入池底或失去平衡侧游，体色发黑，腹部膨大，眼球突出，肛门红肿，鳃丝颜色变淡并有出血点；腹腔内有积液，肠壁发炎，内脏有出血斑点，肝、脾、肾肿大，颜色变淡；肌肉也有出血斑块，血红蛋白含量减少，血浆中糖原及钙离子浓度降低。 • 【流行情况】在欧洲广为流行，死亡率可高达80~90%，主要危害一龄以上的鲤鱼，鱼苗、夏花很少感染，春季（水温在13~20℃）时适宜流行，水温超过22℃时就不再发病，所以叫鲤春病毒血症。 • 【防治】 • （1）加强综合预防措施，严格执行检疫制度。 • （2）水温提高到22℃以上。 • （3）选育有抗病能力的鱼种放养。

思考题 • 草鱼的出血病的症状。 • 病毒性人工疫苗的制作过程。 • 如何预防草鱼出血病的发生？ • 痘疮病的流行和防治方法怎样?

第五章 第一节 病毒性鱼病