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欢迎同学们学习 《 组织学与胚胎学 》

欢迎同学们学习 《 组织学与胚胎学 》. 北京大学基础医学院 组织学与胚胎学教研室. 使用的教材. 《 组织学与胚胎学实习报告 》 内部使用. 参考书. 成令忠，钟翠平，蔡文琴 .《 现代组织学 》1st ed 2004 上海 上海科技文献出版社 刘斌 . 《 胚胎学 》 1st ed 1994 北京 北京医科大学出版社 Ross, Michael H . Histology-A Text and Atlas . 2ed ed 1989 Cormack DH . Ham’s Histology . 9th ed 1989

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欢迎同学们学习 《 组织学与胚胎学 》

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  1. 欢迎同学们学习《组织学与胚胎学》 北京大学基础医学院 组织学与胚胎学教研室

  2. 使用的教材 • 《组织学与胚胎学实习报告》内部使用

  3. 参考书 • 成令忠，钟翠平，蔡文琴.《现代组织学》1st ed 2004上海 上海科技文献出版社 • 刘斌.《胚胎学》1st ed 1994 北京 北京医科大学出版社 • Ross, Michael H. Histology-A Text and Atlas. 2ed ed 1989 • Cormack DH. Ham’s Histology. 9th ed 1989 • Fawcett DW. A Textbook of Histology. 11st ed 1986 • Generser F. Textbook of Histology. 1st ed 1986 • William JL. Human Embryology. 1st ed 1993 • Junqueira LC. Basic Histology. 11st ed 2005 The McGraw-Hill Co. Inc. • William KO, Patrick CN. Netter’s Essential Histology. 2008 • Sadler TW. Langman` s Medical Embryology. 9th ed 2004 Lippincott Willians & Wilkins http://www.lww.com • Moore KL, Persaud TVN. The Developing Human. 8th ed 2008

  4. 复习参考书 • 唐军民主编 • 2005年11月 第2版 • 北京大学医学出版社 • 唐军民主编 • 2009年9月 第1版 • 北京大学医学出版社

  5. 注意事项 • 组织学与胚胎学网络课件及授课课件下载： • http://cc.bjmu.edu.cn/able.acc2.web/zupei.jpkc教学资源/课堂授课PPT。 • 教学进度、实习课安排 • http://cc.bjmu.edu.cn/able.acc2.web/zupei.jpkc首页/课程公告。 • 也可参见解剖楼一层中厅东侧布告。

  6. 绪论 细胞

  7. 组织学与胚胎学 Histology and Embryology 绪 论 Introduction

  8. 绪 论 • 一、组织学与胚胎学的研究内容 • 二、组织学与胚胎学在医学中的地位 • 三、组织学与胚胎学的研究方法 • 四、组织学与胚胎学学习方法

  9. 一、组织学与胚胎学的研究内容 包括组织学与胚胎学，是医学课程中一门基础学科。 • 组织学（histology）研究内容： • 细胞、组织和 器官系统三部分。 • 胚胎学（Embryology）研究内容：

  10. 细 胞（cell） • 定义： • 是人体形态结构的基本单位，是一切生物体新陈代谢、生长发育、繁殖分化的形态学基础。 • 形态各异、大小不等： • 人体具有许多形态各异、大小不等的细胞，参与机体的各种机能活动。 • 相互调节、相互协同： • 各种细胞在机体内相互调节、相互协同，以维持整体的生命活动。

  11. 组 织（tissue） 组成： 是由一些形态相似、功能相近的细胞和细胞间质（细胞外基质）所组成。 分类： 由于细胞的形态各异、大小不等的特性，机体内的组织也相应分为： 上皮组织、结缔组织、肌组织、神经组织。

  12. 器官和系统（organ and system） 形成： 器官和系统是在胚胎发育的早期由几种不同的组织发育、分化和互相结合所形成。 组织特征： 成体的各器官、系统分别具有其微细结构的组织特征，执行着特定的功能。 如：口腔、食道、胃、肠均由不同的组织发育、分化和结合而成，具有不同的形态结构特点，但却执行着共同的功能－－消化食物、吸收营养、排除糟粕。

  13. 胚胎学（embryology）研究内容： • 在医学中称人体胚胎学（human embryology） • 生殖细胞、受精与卵裂 • 植入、三胚层形成与分化 • 胎膜与胎盘 • 人体各器官系统的生长与分化 • 先天畸形

  14. 二、组织学与胚胎学在医学中的地位 • 组织学与胚胎学在医学课程中是与基础和临床各学科都有一定联系的。 • 在基础各学科中，尤其与解剖学、病理学、生理学、生物化学、免疫学均有密切的联系。 • 在临床各学科中，为妇产科学、男性学、生殖工程学、儿科学等临床学科提供了必要的基础知识，也是计划生育与优生学赖以发展的学科之一。 • 在近代生物学和基础医学的迅速发展，各学科的内容互相渗透、互相推动、紧密相关。

  15. 三、组织学与胚胎学的研究方法 • 组织学与胚胎学研究主要涉及两方面： • 显微镜、标本（光学） • 其他技术 • 计量单位： • 1m(微米)＝10-3mm(毫米)； • 1nm(纳米)＝10-3m(微米)。

  16. 显微镜包括： • 光学显微镜 • 电子显微镜

  17. (一)光学显微镜 普通光学显微镜观察组织标本(切片)是最常用的方法。 光学显微镜（light microscopy，LM），又称为光镜。 最高分辨率约为0.2m， 最大放大倍数约为1 000倍；

  18. 激光共聚焦扫描显微镜（confocal laser scanning microscope，CLSM）是20世纪80年代初研制成功的一种高光敏度、高分辨率的新型生物学仪器。 功能：除了可以检测、识别组织或细胞内微细结构外，还可以观察细胞的受体移动、膜电位变化、酶活性和物质转运，并以激光对细胞及染色体进行切割、分离、筛选等。 • 结构组成： • 激光光源 • 共聚焦成像扫描系统 • 电子光学系统 • 微机图像分析系统 • 外接探测器 • 彩色显示器 • 照相装置

  19. 标本的制作： • 包括取材、固定、脱水、包埋、切片、染色等步骤。 • 取材、固定： • 为使所获材料的形态结构接近活体状态，故取材要迅速，所获材料及时用固定液（fixative） 固定（fixation）。 • 常用固定液：甲醛、乙醇等，它们可以使蛋白质迅速凝固，防止其分解和变性。 • 脱水、包埋、切片： • 为使组织与包埋剂相融合，所获材料需经乙醇或丙酮脱水； • 为便于将材料切成薄片，需将其包埋在石蜡或火棉胶内，然后再用切片机将其切成厚5～10m的薄片。

  20. 染色：切片需经染色后方可在显微镜下观察。 苏木精（hematoxylin）、伊红（eosin）染色，简称为HE： • 苏木精：是蓝色的碱性染料，可将细胞核和细胞内的某些 物质染成蓝紫色； • 伊 红：是红色的酸性染料，可将细胞质染成粉红色。 • 基本概念： • 对碱性染料亲和力强的称为嗜碱性（basophilia） • 对酸性染料亲和力强的称为嗜酸性（acidophilia） • 对两种染料亲和力都不强称中性（neutrophilia）

  21. （二）电子显微镜技术 • 电子显微镜（electron microscopy，EM），又称为电镜 • 根据分辨率、放大倍数、功能等不同分为两种： • 透射电子显微镜，又称为透射电镜或电镜； • 扫描电子显微镜，又称为扫描电镜。

  22. 透射电子显微镜 • 1932年德国Max Knolls和Ernst Ruska制造了透射电子显微镜（transmission electron microscope）。 • 最高分辨率为0.2nm，放大倍数几万倍到几十万倍。比光镜放大倍数高1 000倍。因此，电镜能观察到细胞的更微细结构。 • 透射电镜观察的组织须用戍二醛或锇酸固定，树脂包埋，切厚50～80nm超薄切片，经铅盐等重金属盐染色后镜下观察。 • 电镜下所见结构称为超微结构（ultrastructure）。又称为电镜结构。 • 超微结构被金属所染部位，在荧光屏上显得暗，图像较黑，称为电子密度高；反之则称为电子密度低。

  23. 扫描电子显微镜技术 • 1935年，德国Max Knolls和Ernst Ruska又制造了扫描电子显微镜（scanning electron microscope）。 • 要观察的组织不需制成超薄切片。 • 固定后的标本，在其表面喷镀金，在荧光屏上即可显示细胞或组织表面的立体结构，如细胞表面的突起、微绒毛、纤毛等。

  24. （三）其他技术 • 冷冻切片技术 • 冷冻蚀刻复型术 • 组织化学技术 • 免疫组织化学技术 • 原位杂交技术 • 体外培养技术 • 其他标本制作技术

  25. 冷冻切片技术 • 为避免细胞、组织内的某些物质不被固定液所破坏，又要使组织变硬，便于将其切成薄片，同时又要快速得到切片，可将获取的新鲜组织立即投入液氮（-196℃）内快速冻结，然后用恒冷箱切片机（cryostat）制成冷冻切片（frozen section）。 • 冷冻切片技术（frozen section method）：制片迅速，细胞内酶活性保存较好，常用于酶组织化学染色。

  26. 冷冻蚀刻复型术 • 冷冻蚀刻复型术 (freeze etch replica)包括冷冻、断裂、镀铂、分离复制面等主要步骤。 • 冷冻蚀刻复型术既可以看到细胞膜外表面，又可见细胞膜的内表面，也可探测细胞膜断面的结构。

  27. 组织化学技术 • 组织化学（histochemistry）方法： • 是利用化学试剂与组织细胞内的某些物质呈现化学反应，在局部形成有色沉淀物，通过显微镜观察而对组织细胞内的化学成分进行定位、定性和定量的研究。 • 如过碘酸雪夫反应（period acid Schiff reaction，PAS）。 是显示细胞内糖原或多糖的一种方法。 化学反应基本过程是通过过碘酸的氧化作用，使多糖释放出醛基。醛基与无色硷性品红结合反应，在多糖存在的部位形成紫红色沉淀物，从而证明细胞内含有糖原或粘多糖成分。

  28. 免疫组织化学技术 • 免疫组织化学（immunohistochemistry）是利用抗原、抗体特异性结合，检测组织中多肽、蛋白质等物质。 • 该方法先将蛋白质或多肽作为抗原，注入动物体内，使其产生相应的抗体。 • 从血清中提取该抗体，并用荧光染料、铁蛋白或辣根过氧化物酶等标记。 • 用标记抗体处理切片；标记抗体与切片上相应抗原特异性结合。切片中有标记物呈现的部位，即显示该物质在组织中的分布。

  29. 原位杂交技术 原位杂交术（in situ hybridization）即核酸分子杂交组织化学技术。 • 应用： • 用于检测基因片段及转录水平基因活性（mRNA）。 • 原理： • 使用带有标记物的已知碱基顺序的核酸探针（标记的RNA或DNA探针），与细胞内待测的RNA或DNA形成特定的双链分子，即杂交。 • 通过对标记物的显示和检测获知待测核酸及相对量。 • 常用标记物：放射性核素（35S、32P、3H），经放射自显影术处理后观察；非放射性地高辛等，经免疫组织化学处理后观察。

  30. 体外培养技术 • 将人体或动物的活细胞、活组织在体外培养，称为细胞或组织培养（cell or tissue culture）。 • 细胞在体外生存，必需具备适宜的条件，包括营养、O2和CO2、比例、渗透压、pH值、温度和湿度。 • 体外培养细胞，可人为的给以各种不同条件，研究它们对细胞的分裂、分化、结构和功能等的影响，并可用显微电影等记录细胞的动态变化。

  31. 其他组织制片技术 涂片（smear）： 血细胞、分离细胞或脱落细胞可直接涂在玻片上； 铺片： 机体内的疏松结缔组织可撕成薄片铺在玻片上； 磨片(grand section)： 牙和骨等坚硬组织可磨成薄片； 以上标本再经固定染色后在光学显微镜下观察。

  32. 四、组织学与胚胎学学习方法 理论和实验密切联系 形态与机能的结合 断面和立体的关系 动态变化的概念

  33. 理论和实验密切联系 • 组织学与胚胎学是一门以形态结构为主的学科，许多结构不要死记硬背，而是在实习课中通过观察、分析、比较，然后再记忆。这种联系既不会感到枯燥而又能认识深刻。 • 所以学习时要重视实习课这个重要环节。

  34. 形态与机能的结合 • 形态结构总是与一定的机能密切相关。 • 神经细胞有细长突起的结构特点，以传递神经冲动； • 红细胞含丰富的血红蛋白，则具有结合和携带氧的功能； • 腺细胞具有丰富的内质网和发达的高尔基复合体，能合成分泌物。 • 总之，结构与功能有着密切的联系。

  35. 断面和立体的关系 • 在显微镜下观察的组织切片，所观察到的形态都是结构断面的形态。 • 一个细胞由于所切的部位不同，在有的断面可见细胞核，在有的断面没有细胞核。 • 又如身体内许多管状的器官，由于所切方位不同，往往呈完全不同的形态，因此在观察切片上的形态结构时，要考虑断面和立体的关系

  36. 动态变化的概念 • 从受精卵到胎儿娩出，胚胎经过一系列的变化，这种变化是个连续过程。 • 在学习人体胚胎学时一定要把握住每一过程的变化，包括时间、地点、相互关系，从而建立起动态的概念。

  37. 组织学与胚胎学 Histology and Embryology 第一章 细胞（cell）

  38. 细 胞（cell） • 一、细胞的定义及一般特点 • 二、细胞的结构与功能 • (一) 细胞膜的结构与功能 • (二) 细胞质的结构与功能 • 细胞器 • 包涵物 • 细胞骨架 • (三) 细胞核 • 细胞核的一般特点 • 细胞核的结构

  39. 一、细胞的定义及一般特点 • 定义： • 细胞（cell）是人体形态结构的基本单位。 • 一般特点 • 人体具有许多形态各异、大小不等的细胞 • 共同完成人体完整的生命活动，如物质代谢、生长发育、对环境的感应及生殖遗传等

  40. 细胞形态各异 • 血液中可以游走的白细胞呈球形； • 输送氧气的红细胞为双面凹陷的圆盘状； • 密集排列成片成团的上皮细胞呈多边形； • 具有收缩能力、完成有机体各种运动的肌细胞为长梭形或长圆柱形； • 能接受刺激、传导冲动，并支配其它细胞活动的神经细胞，则具有长短不同的突起； • 有些细胞为了特殊功能需要，具有纤毛、鞭毛、微绒毛等，如呼吸道黏膜上皮、精子、小肠上皮柱状细胞等。

  41. 细胞大小不等 • 最小的细胞，如小脑颗粒细胞直径只有4m • 较大的细胞，如成熟卵细胞直径约为135m • 最大的细胞，是神经细胞，它的突起最长可超过1ｍ • 肌细胞大小还可随生理需要发生变化； • 骨骼肌可因锻炼使肌细胞变粗大； • 子宫平滑肌在妊娠期间其长度可由50m增大到500m。

  42. 二、细胞的结构与功能 人体细胞的形状及大小虽然各不相同，但它们都具有共同的基本结构。 即：细胞膜、细胞质和细胞核

  43. (一) 细胞膜的结构与功能 • 1、细胞膜（cell membrane）的结构： • 是包在细胞表面的一层薄膜，它是细胞质的一部分，因而又称为质膜（plasma membrane）。 • 光镜下： • 一般难以分辨出细胞膜，但可间接证明其存在，如刺破活细胞可见细胞质流出。 • 电镜下： • 经四氧化锇染色，细胞膜分为内、中、外三层结构。内、外两层深暗，为高电子密度层，厚2.0nm；中间层为明亮，低电子密度层，厚3.5nm。 • 以上三层膜是一切生物膜所具有的共同特性，因而称为单位膜（unit membrane）。 • 单位膜不仅普遍存在于各种细胞的表面，而且细胞内有膜的细胞器的膜结构均与此也相似。

  44. 细胞膜的分子结构： • 对于细胞膜的分子结构，有许多学说，但目前较为公认的是“液态镶嵌模型（fluid-mosaic model）”学说。 • 此学说认为细胞膜是由脂双层和膜蛋白构成。 • 细胞膜的外表面有细胞衣。

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