1 / 22

สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis คณะผู้จัดทำ : 1. รศ. ดร. อาภัสสรา ชูเทศะ

สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis คณะผู้จัดทำ : 1. รศ. ดร. อาภัสสรา ชูเทศะ 2. นายสมหมาย หอมสวาท 3. น.ส. อรพรรณ สังข์สัมฤทธิ์ ภาควิชาสรีรวิทยา คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์. rack วางแผ่น cellulose acetate.

grant
Download Presentation

สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis คณะผู้จัดทำ : 1. รศ. ดร. อาภัสสรา ชูเทศะ

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. สไลด์การสาธิตการทำ Cellulose Acetate Electrophoresis คณะผู้จัดทำ : 1. รศ. ดร. อาภัสสรา ชูเทศะ 2. นายสมหมาย หอมสวาท 3. น.ส. อรพรรณ สังข์สัมฤทธิ์ ภาควิชาสรีรวิทยา คณะสัตวแพทยศาสตร์ มหาวิทยาลัยเกษตรศาสตร์

  2. rack วางแผ่น cellulose acetate อ่างแช่แผ่น cellulose acetate

  3. applicator ช่องบรรจุสารตัวอย่าง ฐานวางแผ่น cellulose acetate

  4. อ่าง electrophoresis power supply

  5. กระดาษกรองหรือ wick แผ่น cellulose acetate และบัฟเฟอร์

  6. ใส่สารละลายบัฟเฟอร์ประมาณ 100 ml ในอ่างขั้วลบ

  7. ใส่สารละลายบัฟเฟอร์ประมาณ 100 ml ในอ่างขั้วบวก

  8. ใช้กระดาษกรอง (wick) 2 แผ่นที่ชุ่มด้วยบัฟเฟอร์มาวางพาดตรงที่กั้นอ่างทั้ง 2 โดยปลายด้านหนึ่งของกระดาษกรองจุ่มอยู่ในบัฟเฟอร์ในอ่าง เพื่อเชื่อม ระหว่างแผ่น cellulose acetate กับบัฟเฟอร์ในอ่าง

  9. การวางแผ่น wick ในอ่างขั้วบวก

  10. micropipette และสารตัวอย่าง ดูดสารตัวอย่างใส่ลงในช่องบรรจุ

  11. ช่องบรรจุมีสารตัวอย่างและสารมาตรฐานช่องบรรจุมีสารตัวอย่างและสารมาตรฐาน ครบทั้ง 8 ช่อง ปิดช่องสารด้วยแผ่นสไลด์เพื่อป้อง กันการระเหย

  12. ตัดมุมหนึ่งของแผ่น cellulose acetate เพื่อให้ทราบตำแหน่งของสารตัวอย่าง และด้านขั้วบวก/ขั้วลบ นำแผ่น cellulose acetate มาวางใน rack

  13. นำแผ่น cellulose acetate มาแช่ในสารละลายบัฟเฟอร์ ตามเวลาที่กำหนด

  14. เมื่อครบกำหนดเวลา นำแผ่น cellulose acetate มาซับให้แห้งโดยใช้กระดาษกรอง หยดน้ำกลั่นลงบนฐาน วางแผ่น cellulose acetate ลงบนฐานนี้ โดยให้ด้านที่ตัด มุมอยู่ตรงเส้น center application หรือ cathode application (แล้วแต่กรณีการแยก สาร)

  15. กด applicator ลงในช่องบรรจุสารตัวอย่าง 3-4 ครั้ง นำ applicator มากดลงบน แผ่น cellulose acetate นาน 5 วินาที

  16. นำแผ่น cellulose acetate มาวางพาดระหว่างอ่างทั้ง 2 โดยวางคว่ำหน้า ใช้แผ่นสไลด์กดทับแผ่น cellulose acetate เพื่อให้สัมผัสกับกระดาษกรอง

  17. ปิดฝาอ่าง เปิดเครื่อง power supply ตั้งศักย์ไฟฟ้าและเวลาตามที่กำหนด

  18. สีย้อม Ponceau S สารละลายล้างสีย้อม methanol และสารละลาย clearing

  19. ย้อมแผ่น cellulose acetate ด้วย Ponceau S ล้างสีย้อมด้วย acetic acid

  20. ล้างสีย้อมจน background ไม่ติดสี แช่แผ่น cellulose acetate ใน methanol

  21. แช่แผ่น cellulose acetate ในสารละลาย clearing หลังอบที่ 600C จะได้แผ่นใส นำไปวิเคราะห์ผลต่อได้

  22. + A F Hb S A2 Carbonic anhydrase - 1 2 Hemoglobin Phenotype by Cellulose Acetate Electrophoresis This result was run on pH 8.2-8.6 at 350 volts for 25 mins. Lane assingments: lane 1 = AFSA2 Hemo Control of Helena Laboratory, U.S.A. and lane 2 = Hbs of the Thai ridgeback dog from hemolysates ที่มา : Hemoglobins in Thai Ridgeback Dogs: Chromatographic, Electrophoretic and Mass Spectrometric Studies JatupornNoosud, SittirukRoytrakul, ChaiwatBoonkaewwan, ApassaraChoothesa, KKU Vet J. 20(2) : 133-142, 2010

More Related