1 / 36

Separationsmetoder

Separationsmetoder. Separationsmetoder. Kromatografi, gas (GC) eller vätska (LC) Elektrofores Masspektrometri. Kromatografi. Gaskromatografi, GC Separation av t.ex. alkoholer, fetter, … Vätskekromatografi, LC (t.ex HPLC)

hagen
Download Presentation

Separationsmetoder

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Separationsmetoder

  2. Separationsmetoder • Kromatografi, gas (GC) eller vätska (LC) • Elektrofores • Masspektrometri

  3. Kromatografi • Gaskromatografi, GC Separation av t.ex. alkoholer, fetter, … • Vätskekromatografi, LC (t.ex HPLC) Separation av vattenlösliga ämnen som ej tål höga temperaturer t.ex. proteiner, DNA, …

  4. Kromatografi • Provet passerar en kolonnsom separerar partiklarnamed avseende på storlek eller kemiska egenskaperberoende på kolonn-materialets egenskaper

  5. Separationen sker genom att en rörlig fas med de lösta ämnena rör sig genom en fast fas (stationär fas). • Den rörliga fasen kan vara i vätske- eller gasform. • Den stationära fasen kan vara i fast eller vätskeform (gel)

  6. Gaskromatograf

  7. FID detektor

  8. HPLC (High Performance Liquid Chromatography)

  9. Affinitetskromatografi

  10. Kromatogram från HPLC

  11. Diod-Array detektor

  12. Elektrofores

  13. Elektrofores • Separation av t.ex. proteiner eller DNA fragment efter storlek och ladding. • Bestämning av DNA sekvens, sekvensering

  14. Elektrofores • Joner separeras i en gelgenom att de utsätts förett elektriskt fält. • Jonerna kan separeraspå grund av sin laddning och storlek.

  15. Sekvensering

  16. Kapillär-elektrofores

  17. Mass spektrometriMS Separation av joner med avseende på massa och laddning

  18. Mass -spektrometer

  19. Mass-spektrometriHistoriskt perspektiv • J.J Thompson : Upptäckte att Neon hade flera isotoper c:a 1900. Fragmentering av molekyler. • Dempster : konstruerade första ms med riktningsfokusering c.a 1920, elektron källa. Användes t.ex vid anrikning av U-235 för första Atombomben.

  20. Mass- spektrometri (MS) • Bestämma massan på molekyler och atomer • Framställa fragment i gasform av provet • Mäta massan på fragmenten. • Fragmenten ger ett fingeravtryck av provet • Studera relativa andelen av olika fragmentens massor. • Studera relativa andelen av olika isotoper.

  21. Principen för en enkel Mass Spektrometer (MS) massan = m r laddningen = q r är unik för ett värde på kvoten m/q

  22. Princip för MS Acceleration i elektriskt fält Böjning i magnetfält F= q*v * B E + 4000V 0 V m/q = B * r/v F = mv2/r + F + + + + v X X X X X X X X X X X X X X X E r F d B F = q*E v mv2/2 = q* U F v2 = q* V*2/m

  23. JoniseringsmetodElectron Impact Ionization

  24. Exempel på vanliga fragment

  25. Mass spektrum av benzyl alkohol

  26. Matrix-Assisted Laser Desorption Ionization (MALDI) Joniseringsmetoder

  27. Mass-spektrum

  28. JoniseringmetoderElectronspray (ESI) • 1 – 5kV spänning då areosolen lämnar kapillären. • ”dropparna” torkar in (”hyperladdning”) • Coulombic explosion • Jonerna i gasfas

  29. JoniseringsmetodElectron spray

  30. ”rå-spektrum” från ESI-MS

  31. Analysmetoder(MALDI) ToF

  32. AnalysmetoderQuadropole mass filter -(U+Vcos(wt)) +(U +Vcos(wt))

  33. GCMS homepage.univie.ac.at/Wolfgang.Werther/Folie1.JPG

  34. Historiskt perspektiv • GC-MS mitten på 50-talet. Test av läkemedel, hormoner, föroreningar,… • MALDI (1985), ES-MS (1988) m.fl. har gett möjlighet att studera stora biomolekyler. (Nobelpris 2002)Kan användas vid diagnos av t.ex Malaria och Cancer (äggstock-, prostata-, bröst-)

  35. Jonisationsmetoder

More Related