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医学免疫学实验

医学免疫学实验. 实验二. （一）沉淀反应 1 、单向琼脂扩散试验（示教） 2 、双向琼脂扩散试验 3 、对流免疫电泳试验 （二）补体参与的免疫反应 1 、溶血反应 2 、补体结合试验（原理）. （一） 沉淀反应. 一定条件. 可溶性 Ag + Ab 沉淀物 凝胶内沉淀反应 1 、单向琼脂扩散试验 （定量）. Ag、Ab 比例合适. Ag 浓度. Ab. Ag. Ag. Ag. Ag. Ag. 沉淀环直径 2. （一） 2 、双向琼脂扩散试验 （定性或半定量）. Ag. Ab.

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医学免疫学实验

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Presentation Transcript

  1. 医学免疫学实验

  2. 实验二 • （一）沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验（示教） 2、双向琼脂扩散试验 3、对流免疫电泳试验 • （二）补体参与的免疫反应 1、溶血反应 2、补体结合试验（原理）

  3. （一） 沉淀反应 一定条件 可溶性Ag + Ab 沉淀物 凝胶内沉淀反应 1、单向琼脂扩散试验 （定量） Ag、Ab比例合适 Ag浓度 Ab Ag Ag Ag Ag Ag 沉淀环直径2

  4. （一）2、双向琼脂扩散试验 （定性或半定量） Ag Ab （在Ag、Ab比例合适处形成沉淀线） Ab ：标本中无Ag Ab ？ Ag ？ Ag Ab ：标本中有Ag （相同抗原?） 标本 阳性对照 ？ Ag

  5. (fusion) (cross) (spur) R1,2 αR1αR2

  6. （一）2、双向琼脂扩散试验（定性） （请按照实验指导讲义方法进行操作） Ab ：标本中无Ag Ab ？ Ag ？ Ag Ab ：标本中有Ag （相同抗原） 标本 阳性对照 ？ Ag

  7. 1. Make a agar plate (without Ab or Ag) 2. Punch wells • Add samples: • Anti-AFP • positive control (AFP) • Test sample (AFP?) Ag Ab ? ? Ab Ab Ag ？ Ag ? ? ？ Ag

  8. 4. incubation and observe results Result (1): Ab ？ Ag ：no Ag(AFP) in sample serum Ab ：same Ag(AFP) in sample serum ？ Ag

  9. Result (2): Ag Ab ：no Ag(AFP) in sample serum Ag Ag ? ? ：same Ag(AFP) in sample serum Ab ? ? Ag

  10. Result (3): Ag Ab Anti-AFP ? ? Ab AFP, (positive control) ？ Ag ? ? Ag sample serum (AFP?) Anti-AFP sample serum (AFP?) AFP, (positive control)

  11. 明天下午看结果，

  12. （一）3、对流免疫电泳原理图： ＋ － pH 8.6 Ab Ag 电泳力： 电渗力： 合力： 运动方向：

  13. 对流免疫电泳检测方法： Ab － ＋ ？ 阳性对照（Ag） 待测标本（？Ag） （有沉淀线：有Ag； 无沉淀线：无Ag）

  14. 对流免疫电泳检测方法（加样图）： Ab（抗AFP） － ＋ ？ 阳性对照（Ag） （阳性血清，含AFP） 待测标本（？Ag，？AFP） （有沉淀线：有Ag，AFP； 无沉淀线：无Ag，无AFP）

  15. （二）补体参与的免疫反应 1、溶血反应 补体 SRBC + Ab SRBC-Ab 溶血 （溶血素）

  16. （二） 1、溶血反应 • 请按照实验指导讲义方法进行操作 • 2人/组 • 注意观察溶血现象 • 请分析：为何第3、4管不溶血，分别缺什么成分？

  17. （二）2、补体结合试验（检测原理） 指示系统 反应系统（待测系统） ？ 有Ag 溶血素 补体 不溶血 Ab SRBC （标本中有 Ag） ？ 溶血素 无Ag 溶血 补体 （标本中无 Ag） Ab SRBC

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