Проведение поведенческих экспериментов в условиях SPF вивария

1. Проведение поведенческих экспериментов в условиях SPF вивария Заведующий виварно-эксперименальным комплексом НИИ Митоинженерии МГУ, к.б.н. Ловать М.Л.

2. Исследование поведения животных • Доклиника:специфическая активностьскрининг • Фундаментальные исследования:ЭтологияНейробиологияФармакология

3. Специфика постановки поведенческих опытов • Плотный контакт с животными • Большая продолжительность работ • Большое количество животных • Громоздкое оборудование, непосредственно контактирующее с животными • Риск инфицирования исследователя и животного • Физическая, психическая нагрузка Решающее значение следования принципам GLP: • Необходимость поддерживать одинаковые условия в течение всего эксперимента (требования к помещению) • Жесткие временные рамки опыта (протокол) • Высокая субъективность измерений (СОПы) • Невозможность повторения опыта (отклонения) • Сложность интерпретации поведения (комиссия по биоэтике)

4. Проблемы в содержании животных Проблемы микроклимата: Проблемы ухода за животными: отсутствие воды, некачественный корм и нестандартная вода, пылящая подстилка, запах аммиака нерегулярное посещение животных заболевания животных (диарея, клещ, гепатит мышей и крыс и т.п.) • Колебания температуры, влажности • Плохая вентиляция • Неравномерное освещение • Отсутствие нормального суточного ритма у животных Искажение результатов научных исследований

5. Что для нас означают стандарты GLP: (Good Laboratory Practice -надлежащая лабораторная практика) • Система норм, правил и указаний, для получения достоверного и воспроизводимого результата лабораторных исследований. • Животное = биологическая модель для получения таких результатов • Главная задача GLP - обеспечить возможность полного прослеживания и восстановления всего хода исследования по бумагам. Оптимально работать на животных SPF категории * SPF(Specific Pathogen Free) – категория животных с контролируемой микрофлорой Конвенциональные животные – здоровые животные, содержащиеся по стандартам GLP, у которых микрофлора не мониторируется (а не с помойки)

6. Системы индивидуально вентилируемых камер (IVC) • Гнотоизолятора поддержание SPF-статуса возможно при использовании: • Вивария барьерного типа

7. Требования к блоку исследования поведения: Достаточно большое пространство для проведения эксперимента Защита от заражения в процессе тестирования, транспортировки, манипуляций Сведение различий в условиях содержания и опыта к минимуму (минимальность адаптации животных) Возможность проведения нескольких тестов одновременно (в том числе в хронических экспериментах) Возможность работы нескольких экспериментаторов одновременно Еженедельная дезинфекция оборудования, помещений

8. Мы: виварно-экспериментальный комплекс НИИ Митоинженерии МГУ -барьерного типа Три технологически разделенных блока, общей площадью 610 кв.м. Административно-бытовой комплекс Технологический сектор SPF-зона В виварии контролируются условия содержания животных: избыточное давление в SPF зоне- 7-15 Па воздухообмен – 10-12 объемов/час температура – 22+2С влажность - 30-70% световой день - 12 часов Резервирование, мониторинг всех процессов: вода воздух эл-во материалы люди системаGLP-SCADA (параметры микроклимата, перемещения, доступ)

9. Особенности оснащения помещений для поведенческих экспериментов • Зонирование лаборатории SPF • Соседство с технологической зоной (СО2 наркоз, компьютер, установки) • Возможность дезинфекции помещений и крупного оборудования (УФ, Н2О2) Контроль качества дезинфекции: Экспресс АТФ- тест Микробиологический мониторинг Heath monitoring сентинел ! Большие затраты !

10. Разборный модуль для исследования поведения • Оснащенность «под ключ» • Быстрая сборка в любом помещении • Простота монтажа • Легкость обслуживания • Стандартность условий • Взаимозаменяемость установок (например,хирургия-поведение-эмбриология) • Относительно невысокая цена ! Для поддержания SPF- статуса должна комплектоваться системой обеспечения и дезинфекции ООО «НПК Открытая Наука»

11. «SPF –капсула» площадью 18 м2 (пример) вытяжка 5 6 фильтр приток 7 приток • Сопутствующее • оснащение: • Мойка большая • Стиральная машина • Стерилизатор • Склады • Архивы • офис 1.- поведенческие установки 2. стол операторов 3. зона передержки и манипуляции с животными (ламинар) 4. Склад «чистый» 5. Стол, мойка и стеллажи для «грязных» предметов и манипуляций 6. Банкетка (переобувание) и вешалка (внутренняя одежда) 7. Душ

12. Компактное, разборное (складное) • Не содержит хрупких, мелких, пористых деталей, полостей (легко моется), • Не боится стерилизации (едких р-ров или температуры), • Соответствует стандартным методикам эксперимента Требования к оборудованию

13. Спасибо за внимание!