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10 NADH + 2FADH 2 GAL3PDH PyrDH isicitraroDH a -cetog DH succDH malDH. D G°’=-2823 kJ/mol. 15X MP 75%prot. Porina (10kDa). <50% agua. O 2 CO 2 H 2 O. ATP ADP Pir Ca 2+ PO 4 -. DNA RNA ribosomas. D[ ] D pH. NADH. H +. Oxaloacetato (asp) AcetilCoA (citrato). ATP.
E N D
10 NADH + 2FADH2 GAL3PDH PyrDH isicitraroDH a-cetog DH succDH malDH DG°’=-2823 kJ/mol
15X MP 75%prot Porina (10kDa) <50% agua O2 CO2 H2O ATP ADP Pir Ca2+ PO4- DNA RNA ribosomas D[ ] DpH
NADH H+ Oxaloacetato (asp) AcetilCoA (citrato) ATP Ca2+ - - - - Na+/ H + ADP Pi (simporte Pi-H+/DpH) Ca2+ Amortiguador
½ O2 + NADH + 2e- H2O + NAD+ DG°’=- 218kJ /mol 218kJ energía libre ADP + Pi ATP 30.5kJ/mol
E°’ -0.4 -0.2 0 0.2 0.4 0.6 0.8 NADH NAD+ (-0.315 V) Complejo I (DG°’= -69.5 kJ/mol) Complejo II CoQ (0.045V) Complejo III (DG°’= -36.7 kJ/mol) CytC (0.235V) Complejo IV (DG°’= -112 kJ/mol) 2H+ + ½ O2 H2O (0.815 V) ADP+Pi Rot/amytal ATP (+0.03V) Succ FADH2 ADP+Pi Antimicina ATP Fum ADP+Pi CN- ATP
Complex 1: NADH dehydrogenase NADH + H+ + ubiquinone + 4H+(in) => NAD+ + ubiquinol + 4H+(out) Complex 2: succinate dehydrogenase succinate + ubiquinone => fumarate + ubiquinol Complex 3: cytochrome c reductase ubiquinol + 2 cytochrome C+++ + 2H+(in) => ubiquinone + 2 cytochrome C++ + 4H+(out) Complex 4: cytochrome c oxidase 4 cytochrome c++ + O2 + 8H+(in) => 4 cytochrome c+++ + 2H2O + 4H+(out)
Fosforilación oxidativa Energía tpte e- síntesis ATP transducción de energía Hipótesis quimiosmótica Energía se conserva por bombeo protones A espacio intermembranal: gradiente electroquímico. Potencial del gradiente: síntesis ATP
Fosforilación oxidativa • Inregridad membrana interna • Impermeabilidad de iones • Gradiente electroquímico medible • Incremento permeabilidad: desacoplamiento • Incremento acidez esp. Intermem.: Síntesis ATP (-)
Soluble periférica Catalítica (a3b3gde) bSíntesis ATP d compuerta canal FoF1 TM 10-12 subunidades Canal translocador Tallo Oligomicina
Síntesis ATP: • Translocación protones : Fo • Formación enlace fosfoanhídrido de ATP: F1 • Acoplamiento disipación gradiente c Síntesis F1/Fo • En F1: tres sitios con diferente conformación • (INTERCONVERTIBLES) • L(oose) : unión débil a sustratos (ADP y Pi) • T(ight) : unión fuerte (síntesis ATP) • O(pen) : sin unión (abierto: salida ATP)
L O T ADP+Pi ATP ADP+Pi L O O O O L L ATP ATP ATP Síntesis ATP:
Control síntesis ATP: NADH Cit C: casi en equilibrio Reversible por adición de ATP Reacción Citocromo oxidasa: irreversible : control por sus sustrato: Cit c (reducido) Alto NADH/NAD+ : bajo [ATP]/([ADP][Pi]) : alto Cit c: Activación Citocromo oxidasa Transporte nucleótidos adenina y Pi : limitante Translocador ADP-ATP
Glucosa • Glucosa6P • 2GALD3P • 2 1,3BiPglicerato • 2 piruvato 1 glucosa: 2 ATP 10 NADH 1 FADH2 1 GTP 1 NADH : 3 ATP 1FADH2 : 2 ATP 10 NADH X 3 ATP= 30 ATP 1 FADH2 X 2 ATP = 2 ATP Glucólisis = 2 ATP TCA = 1 GTP TOTAL 34 ATP 1 GTP 2 NADH 2NAD+ PDH 2 NADH 2 2 2 2