1 / 29

Milde en ernstige mutaties na de hielprik; de rol van electrofysiologische diagnostiek

Milde en ernstige mutaties na de hielprik; de rol van electrofysiologische diagnostiek. I.Bronsveld, A. Bot, R. de Nooijer Vrijdag 7 oktober 2011. O verzicht. CFTR eiwit Genotype/ Fenotype Hielprikscreening Electrodiagnostiek ICM & NPD set-up live.

hashim
Download Presentation

Milde en ernstige mutaties na de hielprik; de rol van electrofysiologische diagnostiek

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Milde en ernstige mutaties na de hielprik; de rol van electrofysiologische diagnostiek I.Bronsveld, A. Bot, R. de Nooijer Vrijdag 7 oktober 2011

  2. Overzicht • CFTR eiwit • Genotype/ Fenotype • Hielprikscreening • Electrodiagnostiek • ICM & NPD set-uplive

  3. 1989: THE CF GENE IDENTIFIED- encodes an ion channel, named CFTR CF gen m RNA CFTR protein CFTR protein at cell surface CHLORIDE CHANNEL

  4. CFTR = Cystic Fibrosis Transmembrane conductance Regulator

  5. Normal I II III IV V Block inprocessing Reduced synthesis Nosynthesis Block inregulation Altered conductance Nonsense G542X MissenseR117H Missense MissenseG551D MissenseA455E Frameshift394delTT AA deletionDF508 AlternativeSplicing3849+10kbC–>T Splice junction1717-1G–>A Molecular Consequences ofCFTR Mutations

  6. Genotype Defect Normal No CFTR protein G542X W1282X R553X Class  Defective CFTR Processing or trafficking F508 N1303K G480C Class II Class III Defective Cl channel regulation G551D G551S R117H R334W G314E R347P Class IV Reduced conductance Class V Normal CFTR Reduced channel no. Transport of Cl- + 3849+10kbC>T 2789+5G>A A455E

  7. Genotype > Fenotype CBAVD, COPD, pancreatitis, etc. CF Normal PS PI Severity scale Typical mutations Atypical mutations

  8. Hielprikscreening Cystic fibrosis is toegevoegd aan de hielprikscreening: Pasgeborenen worden vanaf 1 mei 2011 via de bekende hielprik voortaan ook getest op cystic fibrosis. De verwachting is dat jaarlijks gemiddeld 30 kinderen met cystic fibrosis worden opgespoord.

  9. Screeningsprotocol CF • Stap 1: IRT • Stap 2: PAP • Stap 3: DNA: 36 mutaties • Stap 4: EGA: gen sequencing • Stap 5: Zweettest • Stap 6: ICM www.rivm.nl/hielprik

  10. Screeningsprotocol CF • Stap 1: IRT Immunoreactief Trypsinogeen (IRT) is een enzym dat door de pancreas (alvleesklier) wordt geproduceerd en in verhoogde concentraties in bloed voorkomt bij pasgeborenen met CF.

  11. Screeningsprotocol CF • Stap 2: PAP Pancreatitis Associated Proteïn (PAP) is een eiwit dat alleen wordt geproduceerd door een pancreas onder stress, maar ook in een verhoogde concentratie wordt gevonden bij kinderen met CF.

  12. Screeningsprotocol CF • Stap 3: DNA-analyse Bij kinderen met een afwijkende IRT- en PAP concentratie wordt een gericht DNA-onderzoek gedaan.

  13. CFTR mutaties bij CF patiënten

  14. Screeningsprotocol CF • Stap 4: EGA (Extended Genetic Analysis)

  15. Screeningsprotocol CF • Stap 4:Zweettest (gouden standaard: Gibson and Cook) Alle patienten met een positieve of inconclusieve DNA screening worden verwezen naar een CF centrum voor zweettest - Hoeveelheid zweet - Concentratie Chloor (Cl-)

  16. Zweettest Dutch concensus statement, 1998: • Cl- > 60 mmol/l positive • Na+ > 100 mmol/l positive • Cl- 30 - 60 mmol/l borderline • Cl- < 30 mmol/l negative • 2% CF patients with normal/borderline ST

  17. Screeningsprotocol CF • Stap 5: Intestinal Current Measurement Patienten met een normale of borderline zweettest of Patienten met niet geclassificeerde DNA mutaties >> doorverwijzing voor ICM Meten van Na+ en Cl- transport in rectum zuigbiopten ex vivo.

  18. Intestinal Current Measurements (ICM) in rectumzuigbiopten

  19. ICM Tracings CF (homozygous ΔF508) Non-CF Cl- current K+ current Amiloride - remt het Na+ transport (ENaC) Carbachol - stimuleert Cl- secretie

  20. Intestinal Current Measurements (ICM) • Borderline of normale uitslag van zweettesten • Variabele klinisch beeld • Geen of maar 1 CFTR mutatie • Follow-up • Geneesmiddelen onderzoek (bv.Vertex, PTC) • Hielprikscreening

  21. Nasal Potential Difference (NPD) Meten van chloride- en natriumtransport in neusslijmvlies in vivo

  22. Nasal PD Set-up - + Neuscatheter volt Subcutane naald als referentie electrode Spuitpompen

  23. NPD reagens • NaCL ( Basaal PD) • Amiloride +NaCL • Gluconate • Isoprenaline • ATP

  24. -80 -58 -60 PD in mV -40 -24 -23 -23 -23 -20 NaCl Amil Cl- free Iso ATP 0 NPD Tracing Control Typical CF -60 -49 -47 PD in mV -35 -40 -30 -19 -20 0 Iso NaCl Amil Cl- free ATP Basal > CFTR/ENaC Amiloride > blocker ENaC Clˉfree > basal Cl conductance Isoproterenol > cAMPstimulator

  25. CF: terminology and diagnostic algorithms (de Boeck et al, Thorax 2006)

  26. Electrodiagnostiek • Diagnostiek CF bij atypische presentatie, meestal op latere leeftijd • Borderline of normale uitslag van zweettesten • Geen of maar 1 CFTR mutatie • Variabele klinisch beeld • Follow-up: Erasmus MC • Geneesmiddelen onderzoek (bv.Vertex, PTC) • Hielprikscreening

  27. Diagnostische uitdagingen • Heterogeen ziektebeeld • Zelfde mutatie, verschillende CFTR activiteit • Verschillende CFTR activiteit in tractus digestivus ten opzicht van de tractus respiratorius

  28. Bedankt voor jullie aandacht! En ….wie wordt de proefpersoon ?

More Related