1 / 45

Molekylspektra

Molekylspektra. De olika färgerna representerar olika koncentrationer. Spectroskopi. Molekylspektroskopi uv/vis Absorptionsspektrometri infraröd (filterfotometri, fotospektrometri) Nefelometri (turbidimetri)

heidi
Download Presentation

Molekylspektra

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Molekylspektra De olika färgerna representerar olika koncentrationer

  2. Spectroskopi Molekylspektroskopiuv/vis Absorptionsspektrometri infraröd (filterfotometri, fotospektrometri) Nefelometri (turbidimetri) Emissionsspektrometri fluorescens(fotoluminescens) (fosforescens)

  3. Spektroskopi • 2. AtomspektrometriAtomabsorption Atomemission Röntgenfluorescens • 3 NMR-spektroskopi (kärn-magnetisk resonans)

  4. Atom - molekyl Elektron- övergång n – s* storlek 2 - 6 eV 3p Vibration 0,1 –0,01 eV 2s Rotation C:a 0,001 eV

  5. AtomAbsorptionsSpektrometri (AAS)FlamEmissionSpektrometri (FES)

  6. Atomspektrum Absorption Emission Natrium-atom Natrium-atom våglängd våglängd Spektrum

  7. Ljusabsorption i atom Exitation Relaxation (de-exitation) E1 E1 Exiterad nivå Exiterad nivå Ef = hc/l DE = Ef DE = Ef Grundnivå E0 Grundnivå E0 Strålningslös övergång

  8. Användningsområden för atomspektroskopi • Identifikation av metalljoner (Na, K,Cu , Hg,…, • Koncentrationsbestämningar av metalljoner i kroppsvätskor Alternativ metod är jon-selektiv elektrod (jmf pH-elektrod)

  9. MolekylabsorptionsspektrometriUV/VIS

  10. Absorption i molekyl Transmittans Absorbans (= -log T) 1 10% Våglängd Våglängd 560 560

  11. Ljusabsorption i molekyl Exitation Relaxation (de-exitation) E1 Strålningslös övergång Ef = hc/l DE = Ef DE = Ef Grundnivå Grundnivå E0

  12. Absorptionsspektroskopi Filter Vitt ljus Transmittans Prov 100% 35% 35% 100% våglängd Vatten

  13. Absorptionsspektroskopi Transmittans Prov I0 I 100% 35% (I= 0,35*I0) 100% 35% våglängd Absorbans Prov I0 I a I = I0* 10-A A = 0,456

  14. Absorptionsspektroskopi Absorbans Prov I0 I våglängd I = I0* 10-A scanning Absorbans Prov I0 I c c Samma våglängd

  15. Absorbans - Transmittans

  16. AbsorptionsspektroskopiKoncetration Absorbans Prov I0 I a A2 c1 A1 c1 c2 a c2 c

  17. AbsorptionsspektroskopiKyvettbredd Absorbans Prov I0 I A2 b1 A1 b1 b2 b2 c

  18. AbsorptionsspektroskopiAbsorptionskefficient Absorbans a1 (A (Max)) Prov I0 I a2 a1 våglängd I = I0* 10-A scanning Absorbans Prov a1 I0 I a2 a2 c Mätt vid olika våglängd

  19. Ex. på Extinktionskoeffcient/Molar absorptionskoefficient (a eller  ) Ämne Molär absorptivitet vid 335 nm (M-1 cm-1) N-trans-cinnamoylimidazol 9370 α-Chymotrypsin 100 N-trans-cinnamoyl-α-chymotrypsin 520 Ex. Vilken absorbans har 1mM av (N-trans - cinn….) A = 520 * 0,001*1 = 0,520

  20. Lambert-Beer´s lag

  21. Höga absorbansvärden A C

  22. Användningsområden av molekylspektroskopi(UV/VIS) • Koncentrationsbestämningar av lösningar och gaser, tex. Hb-bestämning, protein-bestämning, (alla lösningar som absorberar ljus i UV eller Visuella området.) • Kinetiska studier

  23. Kromoforer (ex) • Dubbel och trippel-bindningar • Aromatiska ringar proteiner Phe, Tyr, Trp,His (280nm) • Nukleotider C,G,A,T (260nm)

  24. Spektrofotometri • Filterfotometer

  25. Spektrofotometri • Spektrofotomer

  26. Infraröd spektrometriIR

  27. Molekylens vibrations- och rotationsnivåer acetophenone Vibration 0,1 –0,01 eV Rotation C:a 0,001 eV

  28. Absorption inom infraröda området E1 DE = Ef DE = Ef Exitation Ef = hc/l Relaxation Strålningslös övergång Grundnivå Grundnivå E0

  29. Fluorescensspektrometri

  30. Användningsområden flourescens • Bestämning av låga koncentrationer • Bestämning av molekylers massa • Immunologiska bestämningar

  31. Luciferin-luciferas komplex En ljusbringande substan och ett bakterie bakteriellt enzym (NADH konc. 0,1 nM – 1pM)

  32. Eldfluga – Luceferas system ATP konc ner till 0,001pM

  33. Energidiagram

  34. Ljusemission i molekyl Exitation Relaxation (de-exitation) Strålnings-lös övergång E1 Ef = hc/l DE = Ef DE = Ef Grundnivå Grundnivå E0

  35. Olika typer av luminiscens • Bioluminiscens, by a living organism • Chemoluminiscens, resulting of a chemical reaction • Electrochemiluminescence, by an electrochemical reaction • Electroluminescence, in response to an electric current passed through it • Phosphorescence, delayed re-radiation • Fluorescence, where the emitted photons are of lower energy than those absorbed • Radioluminescence, produced in a material by the bombardment of ionizing radiation • Thermoluminescence, when absorbed light is re-emitted on heating.

  36. Fluorimeter

  37. Emissionspektroskopi Transmittanas Prov 130 Prov våglängd Fluorescens Prov 130

  38. Emissionspektroskopi Prov Transmittans INGEN FLUORESCENS Prov våglängd

  39. Kromoforer (ex) • Aromatiska ringar (Benzen)proteiner Phe, Tyr, Trp,His (280nm) • Nukleotider C,G,A,T (260nm) DNA, RNA • Dubbel och trippel-bindningar

  40. FlouroforerAromatiska ringar • T. ex. Aminosyror: Tyr, 275nm – 303nm Trp 280nm – 348 nm

  41. Acridine Orange Fluorescein Ethidium Bromide 495 503 493 519 530/640 620 389  394 FITC; pH sensitive DNA/RNA FluorX 494 520   587 (AP Biotech) BODIPY-FL 503 512 TRITC 547 572 444 TRITC X-Rhodamine 570 576 548 XRITC Fluorokromer

  42. Flourescens colours Fluorescein

  43. Rep. Molekylspektroskopi Spektrofotometri (molekylspektroskopi): ljus absorberas i lösningen i proportion till koncentrationen. • UV/VIS: koncentrationsbestämningar, bestämma hastigheten på en reaktion med färgomslag. • IR: man kan även få fram vilket ämne det är i lösningen. • Fluorimetri: ljus emitteras i proportion till koncentrationen. Mycket låga halter kan bestämmas med hjälp av fluoriscens.

  44. www.chemistryland.com/.../PowerPoint.html

More Related