660 likes | 925 Views
URINPROTEINFRAKTIONER. Sammanställning av jämförelse mellan elfores /biuret och immunkemi /totalprotein 1 april – 1 juni, 331 prover. Bakgrund.
E N D
URINPROTEINFRAKTIONER Sammanställning av jämförelse mellan elfores/biuret ochimmunkemi/totalprotein 1 april – 1 juni, 331 prover
Bakgrund • I Falun bedöms storleken på Bence Jones/Urin-M-komponenter med hjälp av visuell uppskattning av bandet på en vanlig elektrofores tillsammans med koncentrationsbestämning av U-Albumin och relativt manuell mätning av U-totalprotein (biuretmetoden). • Med biuret kan man mäta protein från 200 mg/L och uppåt.
Hålla rätt fokus Vi får inte glömma av varför vi håller på med elforeser. Det är för patienternas skull!
Man född 1929 • Bor hemma utan hemtjänst. Vårdar och tar om hand om sin dementa hustru. • Normocytär anemi, mild trombocytopeni, kreatininökning, trög mage, eventuellt svart avföring, ont i ett revben • M-komponent i PLASMA, IgG 25 g/L
Man född 1929 • Bor hemma utan hemtjänst. Vårdar och tar om hand om sin dementa hustru. • Normocytär anemi, mild trombocytopeni, kreatininökning, trög mage, eventuellt svart avföring, ont i ett revben • M-komponent i PLASMA, IgG 25 g/L • Efter ett par dagar urinelfores…10,9 g/L lambdakedjor. • Inga skelettdestruktioner
Velcade dexametason Velcade dexametason MP-kur
Teori för projektet • Urinelektroforesesanalysen kan tas bort eftersom urin-M-komponenter (Bence Jones)kan upptäckas och följas upp med mätning av U-Kappa, U-Lambda samt kvoten mellan dessa. • Den manuella biuretmetoden (totalprotein) kan läggas ner för storleksuppskattningen av Bence Jones • Eventuellt måste man mäta U-totalprotein för att upptäcka fall av hookeffekt, men detta U-protein kan mätas på kemiinstrument.
Teoretiska vinster med metodbytet • Inga U-elforeser, endast U-immunfixation • Bence Jones kan beräknas automatiskt i det datoriserade beslutstödet, dvs tolkningen av U-Proteinfraktioner blir automatisk. • Bättre standardisering av Bence Jones-mätningen.
Teoretiska förutsättningar • U-Kappa och U-Lambda mäter endast ner till 10 mg/L. • Kappa/Lambda-kvoten hos friska är mellan 1 och 3. • Reagenserna för immunkemimätningarna är relativt dyra. Immunfixation är relativt dyrt. • Ett eventuellt byte från U-elforeser till immunkemimätningar måste kunna fungera logistiskt och rationellt (en annan sektion på Kemlab i Falun utför proteinanalyserna).
Den manuella biuretmetoden fungerar lika bra som de på kemiinstrumentet
Slutsats 1 • U-totalproteinmetoden fungerar utmärkt på kemiinstrumentet
6 st M-komp har 1,0 i kappa/lambda-kvot 2/6 av dessa syns ”tydligt” på elforesen. 5 st M-komp har mellan 1-3 i kvot 3/5 syns ”tydligt” på elforesen
Slutsats 2 • Kappa/Lambda-kvot mellan 1 och 3, som enda sållningsmekanism, ger för dålig känslighet.
Mätning av kappa och lambda ger en bra uppskattning av M-komponentens storlek
Slutsats 3 • Kappa och Lambda fungerar utmärkt på att följa upp M-komponenter med.
Uppdaterad teori • Genom att kombinera kappa/lambda-kvoten med de uppmätta koncentrationerna av kappa resp. lambda samt U-totalprotein kan man finna beslutsgränser för när man skall göra immunfixation. • ”Onödiga” immunfixationer bör minimeras. • ”M-komponenten kan endast anas” kanske är onödigt noggrant.
Begrepp som förekommer • Restprotein • U-totalprotein minus U-Albumin • Bence Jones gammal • Enligt nuvarande metod, i mg • ”5or” ( 5 mg/L) är sådana M-komponenter som på plattan ”endast kan anas”/”spår av M-komponent”
Begrepp som förekommer • Falskt negativa • De som har normal K/L-kvot, kedjor (K eller L) och restprotein, men som eg är patologiska (enl Bence Jones gammal) • Sant negativa • De som har normal K/L-kvot, kedjor (K eller L) och restprotein, och som är friska (enl Bence Jones gammal)
Begrepp som förekommer • Sant positiva • De som faller utanför normalgränserna på en eller flera av K/L-kvot, kedjor, restprotein och som är patologiska (enl Bence Jones gammal) • Falskt positiva • De som faller utanför normalgränserna på en eller flera av K/L-kvot, kedjor, restprotein men som eg är friska (enl Bence Jones gammal)
Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %
Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %
Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %
Normalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <70 Normalgränser (ändrad restproteingräns):K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20Restprotein <75 Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 54 % Sensitivitet B/(A+B) 98 % Specificitet C/(C+D) 56 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 51 % Sensitivitet B/(A+B) 99 % Specificitet C/(C+D) 53 %
109 respektive 113 av 331 patienter blev ”falskt positva”, dvs att ungefär 30 % av alla U-elforeser skulle immunfixas om vi använde dessa sållningsregler. • Det skulle innebära 660 immunfixar om året. • Med vår nuvarande rutin gjordes 16 immunfixar på urin under projekttiden.
Så…… • Slutsats 4: Totalprotein kan inte användas i screening efter M-komponent. • Slutsats 5: Något måste göras åt kappa/lambda-kvoten
RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %
RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %
RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %
RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser (ändrad kvot-gräns):K/L-kvot 1-1,75Kedjor (K eller L) <20 RESTPROTEIN BORTRÄKNATNormalgränser:K/L-kvot 1-3Kedjor (K eller L) <20 Sensitivitet B/(A+B) 92 % Specificitet C/(C+D) 79 % Sensitivitet B/(A+B) 89 % Specificitet C/(C+D) 81 % Sensitivitet B/(A+B) 97 % Specificitet C/(C+D) 78 % Sensitivitet B/(A+B) 94 % Specificitet C/(C+D) 79 %
Man f. -34, lambda • U-Alb 126 mg/L • U-protein 231 mg/L • U-kappa <10 • U-lambda <10 • U-kappa/lambda: går ej att beräkna, alt 1,0 • U-Kreatinin 10 589
<10 U-Alb 126 mg/L
Man f. -31, lambda • U-Alb 96 mg/L • U-protein 204 mg/L • U-kappa 17,7 • U-lambda <10 • U-kappa/lambda: går ej att beräkna, alt 1,77 • U-Kreatinin 10 990
<10 U-Alb 96 mg/L
Man f. -32 • U-Alb 8 mg/L • U-protein <68 mg/L • U-kappa <10 • U-lambda <10 • U-kappa/lambda: går ej att beräkna, alt 1,0 • U-Kreatinin 4 764
<10 U-Alb 8 mg/L
Slutsats 6: • Vi ser små M-komponenter i urinen som inte når upp till detektionsgränsen, 10 mg/L, vid immunkemimätningen.
Kan man modifiera ”ingen M-komponent”? M-komponent/Bence Jones < 10 mg/L Ingen signifikant M-komponent/Bence Jones Ingen M-komponent (immunfixation utförd)
Möjliga lösningar • Screening efter Bence Jones med U-elfores, efterbeställning av immunkemi (och immunfix vid nyupptäckta). • Screening med immunkemi och efterbeställning av immunfixation (ca 350 st per år i Falun). • ”Screening” efter Bence Jones med hjälp av tidigare elforeser på samma patient.
Hur många av 331 var uppföljningspatienter? 8 st på två månader är nyupptäckta Urin-M-komponenter/Bence Jones.
Alla de tre små M-komponenterna i urinen där vi mätte < 10 mg/L hade M-komponent i plasma också.
Slutsats 7: Om vi immunfixerar urinen på alla nyupptäckta M-komponenter i plasma missar vi inte någon Bence Jones på dessa patienter Redan idag immunfixerar vi ju plasman på alla som har nyupptäckt Bence Jones i urinen..
Sammanfattning • Screening med U-kappa och U-lambda duger gott för att hitta och är bra på att följa Bence Jones proteinuri. • Förutsättningen för att få tillräcklig känslighet är dels att man hittar en lämplig cut-off för K/L-kvoten samt att man även gör immunfix på de patienter som har stor risk att ha Bence Jones, t ex de med M-komponent i plasma.
Amyloidos.. • Alltid immunfix? • Fria lätta kedjor i serum?