1 / 9

胡 建 临床七年二系 0603 班

考马斯亮兰法测定蛋白质含量. 胡 建 临床七年二系 0603 班. 2008.5.2. 一 实验目的 二 实验原理 三 实验材料与仪器 四 实验步骤 五 注意事项. 一 实验目的. 1. 学习掌握考马斯亮兰染料结合法测定蛋白质浓度的基本原理。 2. 了解考马斯亮兰法测定蛋白质含量的优缺点。. 二 实验原理.

huela
Download Presentation

胡 建 临床七年二系 0603 班

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. 考马斯亮兰法测定蛋白质含量 胡 建 临床七年二系0603班 2008.5.2

  2. 一 实验目的 二 实验原理 三 实验材料与仪器 四 实验步骤 五 注意事项

  3. 一 实验目的 1.学习掌握考马斯亮兰染料结合法测定蛋白质浓度的基本原理。 2.了解考马斯亮兰法测定蛋白质含量的优缺点。

  4. 二 实验原理 考马斯亮兰G-250染料在酸性条件下能与蛋白质结合，使染料的最大吸收峰值从465nm变成595nm，溶液的颜色由棕红色变为蓝色，在595nm测定的吸光度值与蛋白质浓度成正比，故可用于蛋白质定量测定。微量法测定蛋白含量范围为1μg-10μg；常量法则以检测范围10μg-100μg为宜

  5. 三 实验材料与仪器 仪器和材料 （1）玻璃仪器：试管,吸管 （2）721分光光度计 试剂 （1）9g/L NaCl溶液。 （2）标准蛋白质溶液（lmg／ml） （3）待测血清 （4）考马斯亮兰G250染液

  6. 四 实验步骤 1．标准曲线制备：取试管13只，按下表编号。将1mg／ml的标准蛋白溶液配制为1000μg／ml，500μg／ml， 250μg／ml，125μg／ml ，62.5μg／ml和31.25μg／ml的系列稀释液，按下表操作并记录：

  7. 摇匀，室温静置3min。以空白管调零，在波长595nm比色，读取各管的光吸收值。以各标准管蛋白质含量(μg)为横座标，各管光吸收值为纵座标作图，绘制标准曲线 2．未知样品测定：取试管2只，按上表测定管操作，摇匀，静置3分钟，在波长595nm读取光吸收值。用2管的平均光吸收值在标准曲线上查出相应的蛋白质含量，按以下公式计算出该样品的蛋白质浓度（g/L）。 未知样品蛋白质浓度(g/L)＝标准曲线查得蛋白质浓度 × 稀释倍数 × 单位换算

  8. 五 注意事项 1．不可使用石英比色皿（因不易洗去染色）。塑料或玻璃比色皿使用后立即用少量95%乙醇洗去染色，防止读数误差。 2．塑料比色皿绝不可用乙醇或丙酮长时间浸泡。

  9. Thank you!

More Related