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Anticorps. Marqueurs. Traceur. Antigène. Echantillon. Traceur. 1. Anticorps primaire. Immunoréaction directe. ETAPES. Antigène. Echantillon. Traceur. 2. Anticorps secondaire. 1. Anticorps primaire. Immunoréaction indirecte. ETAPES. Antigène. Echantillon. Traceur. 3.
E N D
Anticorps Marqueurs Traceur Antigène Echantillon
Traceur 1 Anticorps primaire Immunoréaction directe ETAPES Antigène Echantillon
Traceur 2 Anticorps secondaire 1 Anticorps primaire Immunoréaction indirecte ETAPES Antigène Echantillon
Traceur 3 Anticorps tertiaire Anticorps secondaire 2 Anticorps primaire 1 Immunoréaction "sandwich" (bridge)Pontage par anticorps secondaire ETAPES Antigène Echantillon
Traceur 4 3 Anticorps tertiaire anti-traceur Anticorps secondaire 2 Anticorps primaire 1 Immunoréaction "sandwich" (bridge)Pontage par anticorps secondaire (variante) ETAPES Antigène Echantillon
3 molécules de peroxydase PAP 2 Anticorps secondaire Anticorps primaire 1 Immunoréaction "sandwich" (bridge)Peroxydase anti-peroxydase (PAP) ETAPES 3 Antigène Echantillon
Traceur 3 Anticorps secondaire Protéine A ou G 2 Anticorps primaire 1 Immunoréaction "sandwich" (bridge)Pontage par protéine A ou G ETAPES Antigène Echantillon
Traceur (or colloïdal) 2 Antigène marqué Anticorps 1 GLAD Gold-Labelled Antigen Detection method ETAPES Antigène Echantillon
Traceur Traceur Biotine marquée Avidine marquée Avidine Biotine Biotine Biotine IgG IgG Traceur Biotine Avidine IgG Systèmes de révélation à la biotine-avidine (straptavidine, neutravidine…) LAB Labelled Avidin-Biotin BRAB Bridged Avidin-Biotin IgG anti Ig de lapin ou autre espèce ABC Avidin-Biotin Complex
Biotine marquée Avidine marquée Avidine Anticorps biotinylé Anticorps biotinylé Système biotine-avidineAnticorps primaire biotinylé ETAPES ETAPES 3 2 2 1 1 Marqueur = BRAB Marqueur = LAB
Biotine marquée 4 Avidine marquée 3 3 Avidine 2° anticorps biotinylé 2 2° anticorps biotinylé 2 1 1° anticorps 1° anticorps 1 Système biotine-avidineAnticorps secondaire biotinylé ETAPES ETAPES Marqueur = LAB Marqueur = BRAB
Tyramine - peroxydase 3 Peroxydase Anticorps secondaire marqué à laperoxydase 2 Anticorps primaire 1 Systèmes de révélation à la tyramineCARD (Catalysed Reporter Deposition), ImmunoMaxExemple 1 : tyramine-peroxydase ETAPES Antigène Echantillon
Avidine – peroxydase (LAB) ou BRAB ou ABC 4 Tyramine - biotine 3 Peroxydase Anticorps secondaire marqué à laperoxydase 2 Anticorps primaire 1 Systèmes de révélation à la tyramineExemple 2 : tyramine biotinylée ETAPES Antigène Echantillon
Avidine – fluorochrome (LAB) ou BRAB ou ABC 4 Tyramine - biotine 3 Peroxydase Anticorps secondaire marqué à laperoxydase 2 Anticorps primaire 1 Systèmes de révélation à la tyramineExemple 3 : traceur fluorescent ETAPES Antigène Echantillon