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临床 血液实验诊断. 黄伏生. 概述 : 血细胞的来源与生成. 第一节 血液一般检验 ( blood routine test ). 血液: 有形成分: 红细胞、白细胞、血小板(某些病理物质如 MP )。 无形成分: 水、无机物、有机物。. 一、红细胞检查. RBC 、 HGB 、 HCT 、 MCV 、 MCH 、 MCHC 、 RDW 、 Ret 、 ESR 等. 红细胞计数(手工). 〔 原理 〕 用稀释液将血液稀释一定的倍数,混匀后冲入计数池,在显微镜下计数一定体积的红细胞数,再换算成每升血液中红细胞数量。.
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临床 血液实验诊断 黄伏生
第一节 血液一般检验(blood routine test) • 血液: • 有形成分:红细胞、白细胞、血小板(某些病理物质如MP)。 • 无形成分:水、无机物、有机物。
一、红细胞检查 RBC、HGB、HCT、MCV、MCH、MCHC、RDW、Ret、ESR等
红细胞计数(手工) • 〔原理〕 • 用稀释液将血液稀释一定的倍数,混匀后冲入计数池,在显微镜下计数一定体积的红细胞数,再换算成每升血液中红细胞数量。
〔器材〕显微镜、计数板、微量吸管、试管等。〔器材〕显微镜、计数板、微量吸管、试管等。 • 〔试剂〕红细胞稀释液(Hayem液) NaCl1.0g 、Na2SO42.5g 、HgCl20.5g、蒸馏水加至1000ML
〔操作〕 • 1.稀释液2ML+全血10μL混合均匀 • 2.充池 • 3.计数 • 4.换算
公式 RBC/L=N*5*200*10*106 • N--RBC个数/5个中方格中 • 1/5×25--换成1个大方格 • 200――稀释倍数 • 10――换算成mm3 • 106――由1mm3换算成1L体积 • RBC/L=1/100N*1012/L (*1012 /L----T/L)
临床意义 1.生理变化 2.病理变化 • (应与HGB等指标同时进行分析)
血红蛋白测定(HGB) • (一)氰化高铁血红蛋白测定(HiCN)法 • HiCN的mmol消光系数――44mmol/L/cm
〔原理〕 血红蛋白被高铁氰化钾氧化为高铁血红蛋白,再与CN-结合生成稳定的 综红色复合物-氰化高铁血红蛋白(HiCN),HiCN在波长540nm处有一吸收峰,通过分光光度计测定该处的吸光度,再换算成每升血中血红蛋白浓度,也可制备标准曲线供查阅其含量。
blood: • [操作] • 1.试剂5ml+全血20μl混匀放置放置5min • 2.比色:分光波长为540nm,杯径1.0cm测定 光密度A • 3.计算Hb=A*64458/(44*1000)*251=367.7A • 4.标准曲线法:简易标准曲线K=∑Hb/ ∑A 还可采用回归方程法
(二)其他方法 • 1.Sahli法 • 2.HiN3法 • 3. SDS法 • (三) 临床意义:与RBC相结合
红细胞比容测定 • 温氏法原理(Wintrobe)(手工)
〔操作〕 1.将抗凝血注入温氏管刻度处,用橡皮塞塞紧管口 2.离心:3000r/min离心30min 3.结果观察:读取最下面红细胞层
〔参考值〕男性:(0.40~0.54)L/L • 女性:(0.37~0.47)L/L 〔临床意义〕主要用于计算红细胞的3个 平均指数 • 1.增高:多见于各种原因引起的血液浓缩 • 2.降低:主见于各种贫血
微量法: • 与常量法基本相同 • 不同的是离心管改用微量管 • 离心速度为12000r/min*5 • 仪器法:HCT=MCV*RBC
红细胞平均指数 红细胞平均容积 (MCV,men corpuscular volume) • 红细胞平均血红蛋白含量 • (MCH, men corpuscular hemoglobin) • 红细胞平均血红蛋白浓度 • (MCHC, mem corpuscular hemoglobin concentration)
〔计算公式〕 • 1. MCV=HCT/RBC(fL) • 2.MCH=HGB/RBC(pg) • 3. MCHC=HGB/HCT(g/L)
参考值] 手工法 仪器法 • MCV (80-92)fl (80-100)fl • MCH (27-31)pg (27-34)pg • MCHC (320-360)g/l (320-360)g/l • [临床意义] 可作为贫血的红细胞形态学分类
红细胞体积分布宽度 • 红细胞体积分布宽度 • (RDW,red blood cell distribution width)是血液分析仪特有的检测项目
〔原理〕 • 利用coulter原理测定红细胞体积,根据红细胞不同体积的大小在坐标上排列成一条曲线(直方图)将曲线的底部的宽与曲线的高度的比所得值。
〔计算方法〕 RDW=图底宽/图峰高 〔参考值〕 成人 11.6%-14.6% 〔临床意义〕 贫血分类
红细胞形态检查 • 1. 红细胞大小 • 2 . Hb含量改变 • 3 . 红细胞形状改变 • 4 . 红细胞内出现异常结构
二、白细胞检测 • 白细胞计数(WBC) • 与红细胞计数基本相同 略
四、白细胞形态 • (一)正常白细胞形态 • (二)异常白细胞形态
五、白细胞分类计数 (DC ,differential count)(手工) • 〔原理〕 • 各类不同的白细胞对染料中不同成份着色程度不同,通过染色后可以显示不同颜色,在镜下可计数各类白细胞占整个白细胞的比例。
〔器材〕显微镜等 • 〔试剂〕瑞氏染液 • 〔标本〕血涂片
〔操作〕 • 1.染色:在血涂片上加染液数滴再加缓冲液适量。 • 2计数:在油镜下计数100个白细胞,记录其中各类白细胞数所占总数的百分比。
〔报告方式〕 • N % • L % • M % • E % • B % • 〔参考值和临床意义〕见下表:
0.5~5% 参考值 增高 减低 WBC G/L 成人:4~10 初生儿:15~20 1/2~2岁:11~12 急性细菌感染、组织损伤、失血、中毒、类白血病、白血病、生理性增高 病毒感染、某些传染病、某些血液病(再障)、放化疗、脾亢、自身免疫性疾病 N 50~70% 同上 同上 E 免疫功能低下 过敏性疾病、寄生虫感染、嗜酸性粒细胞白血病、慢性粒细胞白血病猩红热、恶性肿瘤、如肺癌、霍奇金氏病等。 某些传染病,如伤寒、术后严重组织损伤、使用肾上腺皮质激素 B <1% 慢粒、真性红细胞增多症、变态反应、甲退等。 Ⅰ型变态反应、促肾上腺皮质激素和糖皮质激素过量、甲亢、科兴氏综合症等 L 20~40% 病毒感染、传单、结核、肾移植、再障、淋巴细胞白血病等 放射线、使用肾上腺皮质激素,促肾上腺皮质激素、某些感染引起的白细胞增高而相对减低 M 3~8% 传染病、EB病毒感染、寄生虫、结核、慢性炎症、处理抗原、免疫应答、MDS、恶组、淋巴瘤 白细胞计数及各类白细胞临床意义
重要名词解释 • 1.核左移 • 2.核右移 • 3.异型淋巴细胞
三、血小板检测 • 血小板计数(PLT): • 同红细胞计数(RBC)
PLT临床意义 • 参考范围(100~300)G/L • PLT减少 • PLT增高