1 / 62

实验室大型仪器介绍

实验室大型仪器介绍. 刘武江博士. 北京大学泌尿外科研究所. 总体介绍. 前言. 动物活体成像. 流式. 蛋白液相. 酶联斑点. 总体介绍. 原理. 适用范围. 具体应用. 操作注意. 问题. 底物及探针. 主要操作界面. BD Influx. BD Influx. BD Influx 特点. 强大的检测能力 超高性能的分选功能 安装 3 个激光器 相对较小的鞘液压力，保持细胞活性 可完全更换的液路，避免细胞污染 新的分选模式，如比例分选模式和位置分选模式. BD Influx 应用. 检测：

ivo
Download Presentation

实验室大型仪器介绍

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. 实验室大型仪器介绍 刘武江博士 北京大学泌尿外科研究所

  2. 总体介绍 前言 动物活体成像 流式 蛋白液相 酶联斑点

  3. 总体介绍 原理 适用范围 具体应用 操作注意 问题

  4. 底物及探针

  5. 主要操作界面

  6. BD Influx BD Influx

  7. BD Influx特点 强大的检测能力 超高性能的分选功能 安装3个激光器 相对较小的鞘液压力，保持细胞活性 可完全更换的液路，避免细胞污染 新的分选模式，如比例分选模式和位置分选模式

  8. BD Influx应用 检测： 细胞表面标记，细胞内表达蛋白，细胞凋亡，细胞周期，白血病的分型，肿瘤细胞染色体的异倍性测定，细菌鉴定，病毒感染细胞的识别和爱滋病感染者CD4、CD8细胞的记数。 分选： 细胞疗法研究，干细胞研究，药物发现与开发以及转基因细胞的分选。 应用领域： 免疫学、血液学、肿瘤学、细胞生物学、细胞遗传学、生物化学，药理学，海洋生物学等。

  9. 荧光补偿

  10. 多功能液相芯片分析系统（Luminex技术）

  11. Luminex技术是在有色微球、激光技术、应用流体学及高速数字信号处理技术的基础上发展起来的一种多功能的液相分析平台。 Luminex技术是在有色微球、激光技术、应用流体学及高速数字信号处理技术的基础上发展起来的一种多功能的液相分析平台。

  12. 捕获微球 • 聚苯乙烯材料，大小均一，直径5.6 um • 标记了两种荧光染料，每种染料的浓度有10个梯度，通过调整两种染料的比例可以获得100种不同染色的微球 • 标记了针对检测物的捕获分子作为探针

  13. 常见的细胞因子检测方法 • PCR • 原位杂交 • 流式细胞术胞内染色 缺点：一次实验检测的细胞因子种类有限；不能定量 • ELISA • ELISpot • 免疫学功能研究 • 缺点：一次实验只能检测一种细胞因子

  14. 多功能液相芯片分析系统的优势 • 同时检测几种甚至十种以上细胞因子 • 快速鉴定Th1/Th2特异性免疫应答 • 需要的样本量少（50ul；血清、血浆、培养上清等） • 节省时间和经费

  15. 荧光微球 颜色编码的微球 每种微球的地址由两种红色荧光颜料的掺入比例唯一决定

  16. 红色染料浓度逐渐增大 紫色染色浓度逐渐增大

  17. 检测原理 样本检测区

  18. 液相芯片的应用 • 免疫学分析 • 细胞因子检测 • 受体－配体分析 • 酶分析 • 蛋白质－蛋白质相互作用分析 • 蛋白质－DNA相互作用分子 • 核酸研究 • SNP检测 • 基因表达谱分析

  19. Luminex检测体系的组成 • Luminex仪器 • Luminex 检测试剂 • Luminex试剂盒 • Luminex 附件

  20. Luminex检测配套试剂盒 • R&D: Fluorokine MAP系列，主要检测各种细胞因子及MMP系列蛋白 • Biosource：各种细胞因子、生长因子系列 • Upstate: Beadlyte系列，主要检测细胞因子/趋化因子、信号转导相关蛋白及激酶的活性 • Linco：各种细胞因子和趋化因子检测 • Cayman：检测前列腺素E2

  21. R&D配套Luminex试剂盒 • mouse GM-CSF • mouse CCL2 • mouse IFN-g • mouse IL-1  • mouse IL-2 • mouse IL-4 • mouse IL-5 • mouse IL-6 • mouse IL-10 • mouse TNF-a • mouse VEGF • human IFN- g • human IL-2 • human IL-4 • human IL-5 • human IL-6 • human IL-10 • human IL-17 • human TNF-a • human TNF- • Human CCL系列 • Human VEGF

  22. Biosource配套试剂盒 • Human/Mouse Th1/Th2 Cytokines • Human/Mouse Chemokines • Human/Mouse Inflammatory Cytokines • Human/Mouse Growth Factor

  23. Linco配套试剂盒 • 人/小鼠/大鼠 Cytokine/Chemokine • 疾病相关研究试剂盒： • 内分泌（糖尿病、肥胖病、垂体激素等） • 脂肪组织分泌代谢 • 心血管疾病 • 皮肤疾病 • 细胞代谢 • 骨代谢等

  24. Upstate配套试剂盒 • 各种总/磷酸化的信号转导蛋白 • Human/Mouse/Rat Cytokines • Human/Mouse Chemokines • Human Growth factor

  25. ELISPOT

  26. ELISPOT检测方法特点 • 通过两种高亲和力的特异性抗细胞因子抗体来检测淋巴细胞分泌细胞因子情况 • 在分泌细胞原处捕获该细胞分泌的细胞因子 • 斑点的生成属于一种显色反应：SPOT=细胞印迹 • 斑点可持久保存并进行计数分析

More Related