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生物信息学 Bioinformatics. http://zhanglab.njau.edu.cn 选择 “ Undertaken Courses” 点击 “ Bioinformatics ( spring )” 下载 “参考 ppt”. bioinformation2009@163.com. 密码 : bioinformation. 进入以上公用邮箱下载幻灯片“ ppt10- 上机 2 ” 到电脑桌面. 第四章 DNA 与蛋白质序列分析. 第一节 序列比对 第二节 Blast 应用 第三节 序列功能分析. Question1:
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生物信息学 Bioinformatics
http://zhanglab.njau.edu.cn 选择“Undertaken Courses” 点击“Bioinformatics(spring)” 下载“参考ppt”
bioinformation2009@163.com 密码: bioinformation 进入以上公用邮箱下载幻灯片“ppt10-上机2” 到电脑桌面
第一节 序列比对 第二节 Blast应用 第三节 序列功能分析
Question1: 1. 我刚刚分离一个水稻基因片段序列,大概250bp,我想初步分析一下它是什么基因,编码什么产物以及是否已经被别人克隆,应该采用什么工具和数据库? • Blastn B.Blastp C.tblastn, D.tblastx, • E. blastx F. nr G. EST H. nr/nt
Question 2: • 什么是HMM? • 如何进行基因结构的预测? • Promoter的位置在哪里? • 什么是TSS, 为什么要预测TSS?预测TSS有哪些方法?
具体步骤 1.登陆blast主页 http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/ 2.根据数据类型,选择合适的程序 3.填写表单信息 4.提交任务 5.查看和分析结果
第3节 序列功能分析的内容 • 序列组成/分子量/等电点---初级分析 • 酶切位点分析(载体构建) • 基因结构分析/启动子序列分析
Part 1. 初级序列分析 序列的组成/分子量/等电点分析
http://zhanglab.njau.edu.cn/ 点击“BioXM version 2.6 ” 点击“运行”进行安装
A/G/C/T的组成,尤其是G+C含量的预测(进化?探针设计?)A/G/C/T的组成,尤其是G+C含量的预测(进化?探针设计?)
蛋白质分子量/等电点预测 online Compute pI/MW http://us.expasy.org/tools/pi_tool.html
Part2. 酶切位点分析 只要进行基因工程利用必须用到各种限制性内切酶 如 GGATCC BamHI
Part 3. 基因结构分析/启动子序列分析
1)基因结构分析: Genomic DNA cDNA
2)启动子序列分析: 什么是启动子? 启动子序列,一般在TSS之前2000bp, 了解哪个位点是TSS,哪个是起始ATG? promoter TATA TSS ATG
2)启动子序列分析: 所以,我们必须得到TSS的位置. 如何通过生物信息学方法确定TSS? 首先截取包括ATG之前3000bp和基因的序列采用以下两种方法 1)软件预测,如Softberry; 2)搜索EST数据库;
分析的目的: 2)首先找到ATG前面约3000: 如何通过生物信息学方法确定TSS? 以AF486280为例. 首先要找到包含AF486280的基因组序列.
2)首先截取ATG之前3000bp序列 以AF486280为例. 首先要找到包含AF486280的基因组序列.
练习: • (1) 查找序列:AY900120 • (2) 请用两种方法分析该基因可能的TSS? 给出从TSS开始10bp的序列.(提示:首先搜索基因组数据库,获得包括该基因第一个外显子之前3000bp和该基因的基因组序列;然后进行预测:方法1:搜索dbEST数据库;方法2:用softberry的FGENESH进行预测TSS;) • (3) 根据(2)的结果请列出该基因的启动子序列; • (4) 根据(2)的结果请画出该基因的基因结构图(包括外显子和内含子的排列和长度); • (5) 请预测AF486280基因编码产物的分子量和等电点(可以采用BioXM软件); • (6) 请对AF486280基因序列进行限制性酶切位点分析,分析序列中是否存在HindIII和SacI酶切位点?(可以采用BioXM软件) • (7) 请分析AF486280基因编码产物的亚细胞定位情况; • (8) 请分析AF486280基因编码产物的功能域(domain); • (9) 请分析AF486280基因编码产物序列中有哪些重要的motif?
练习: • (5) 请预测AY900120基因编码产物的分子量和等电点(可以采用BioXM软件); • (6) 请对AY900120基因序列进行限制性酶切位点分析,分析序列中是否存在HindIII和SacI酶切位点?(可以采用BioXM软件) • (7) 请分析AY900120基因编码产物的功能域(domain);