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送受信班進行状況. (~8/22). 冨永将大・川崎浩平・井山佳美. 全体像. AHL. 求められること. 5 hours…. ③ 発現量 を下げる. ①AHL 合成量(合成速度) を下げる. ② 感受性 を下げる. 全体像. ①AHL 合成量、合成速度を下げる. →luxI の発現量を小さくする( RBS を替える). ② 感受性を下げる. → シグナル分子を替える. ② 出力量を下げる. →luxR の発現量を小さくする( RBS を替える). 送信システム作成の流れ. AHL. LasI(OdDHL). luxI(OHHL).
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送受信班進行状況 (~8/22) 冨永将大・川崎浩平・井山佳美
全体像 AHL 求められること 5 hours… ③発現量 を下げる ①AHL合成量(合成速度) を下げる ②感受性 を下げる
全体像 ①AHL合成量、合成速度を下げる →luxIの発現量を小さくする(RBSを替える) ②感受性を下げる →シグナル分子を替える ②出力量を下げる →luxRの発現量を小さくする(RBSを替える)
送信システム作成の流れ AHL LasI(OdDHL) luxI(OHHL) cinI RhlI(BHL) PNAS November 25, 2003 vol. 100 suppl. 2 14549–14554 Fig2. Structures of different autoinducers.
送信システム作成の流れ LasI+LVA(C0078) CinI+LVA(C0076) RhlI+LVA(C0070) LasI(C0178) CinI(C0176) RhlI(C0170) + PCR B0034 + plac(J04500) +RBS(B0034) ptet (J13002) +RBS(B0034) + or ptet(R0040) AHL合成装置
今週の成果 2006年iGEMで、バンドの位置がおかしいことが確認されている
今後の予定 Cross-talkの確認 Sender(luxI)(BBa_S03623) AHL合成装置(luxI以外) + ptet B0034 luxI+LVA ptet or plac B0034 lasI RhlI ? Receiver(BBa_T9002) ptet luxR plux GFP
今後の予定 Cross-talkの確認 Spot Sender Receiver
①AHL合成量、合成速度を下げる →luxIの発現量を小さくする(RBSを替える) ②感受性を下げる →シグナル分子を替える ②出力量を下げる →luxRの発現量を小さくする(RBSを替える)
今後の予定 AHL合成量を下げる ① Sender(BBa_S03623) ② [AHL] ③ ptet B0034 luxI+LVA 時間 ①B0033(weaker) ②B0032(medium) ③B0031(weak) PCR
今後の予定 luxR合成量を下げる ① Sender(BBa_S03623) ② [LuxR] ③ luxR ptet B0034 時間 ①B0033(weaker) ②B0032(medium) ③B0031(weak) PCR
TraI AHL LasI luxI cinI RhlI PNAS November 25, 2003 vol. 100 suppl. 2 14549–14554 Fig2. Structures of different autoinducers.