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血细胞计数. 主讲 陈小琼 实验师. 人体血液主要由血细胞和血浆组成。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板三类细胞。而白细胞分成中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞。. 白细胞是机体防御和机能保护的重要组成部分,常作为评价运动员免疫功能的指标之一。 在运动训练中经常利用红细胞数量和血红蛋白含量评定运动员机能状态、训练水平、预测运动能力。. 实验目的和要求. 了解电阻式血细胞计数法进行血细胞计数。. 电阻式血细胞计数仪. 日本 Sysmex F820 半自动血细胞分析仪、稀释器 AD-270
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血细胞计数 主讲 陈小琼 实验师
人体血液主要由血细胞和血浆组成。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板三类细胞。而白细胞分成中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞。人体血液主要由血细胞和血浆组成。血细胞包括红细胞、白细胞和血小板三类细胞。而白细胞分成中性粒细胞、淋巴细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞、单核细胞。
白细胞是机体防御和机能保护的重要组成部分,常作为评价运动员免疫功能的指标之一。 • 在运动训练中经常利用红细胞数量和血红蛋白含量评定运动员机能状态、训练水平、预测运动能力。
实验目的和要求 了解电阻式血细胞计数法进行血细胞计数。
电阻式血细胞计数仪 • 日本Sysmex F820半自动血细胞分析仪、稀释器AD-270 • 计数原理是根据血细胞的不良导电性而产生电阻抗来计数血液中的血细胞。 • 能对15种血液指标和3个组织图进行一次分析。
Sysmex F820半自动血细胞分析仪 • 计数孔直径: WBC:100nm RBC、PLT:80nm HGB光源:波长约540nm • 样本量: 全血:20μl WBC计数所需的稀释样本量: 0.5ml±0.5% RBC、PLT计数所需的稀释样本量0.5ml±0.5% 共计数5000个WBC;50,000个RBC HGB测定所需的稀释样本量:3.2ml
Sysmex F820半自动血细胞分析仪 • 稀释比例 WBC稀释比例 1:500 (血液样本:0.02ml,稀释液:9.94ml,溶血剂 0.1ml) RBC、PLT稀释比例 1:50,000 (1:500稀释血样本:0.1ml,稀释液: 9.94ml) • 测试时间 WBC约 13秒/测试 RBC约 20秒/测试 时间周期约42秒。
参考范围: 白细胞: 成人(4~10)×109/L 新生儿(15~20)×109/L 红细胞: 成年男性(4~5.5)×1012/L 成年女性(3.5~5.0)×1012/L 新生儿(6.0~7.0)×1012/L
所需仪器、试剂 日本Sysmex-F820半自动血细胞分析仪、稀释器、 稀释液、计数杯 酒精、棉球 采血针、20μl微量采血管
实验步骤 1、标记计数杯 2、利用稀释器在1号计数杯内加入稀释液。 3、采血。用酒精棉球消毒采血部位,以采血针采血,用采血管插入流出的血滴深处,吸血至刻度20μl处,拭净采血管外壁,将血液立即吹入1号计数杯稀释液内。反复吸吹,使采血管中血液全部进入稀释液内,混匀后得到白细胞稀释悬浮液。
实验步骤 4、对1号计数杯标本中的红细胞进行二次稀释,放入2号计数杯内得到二次稀释的红细胞稀释悬浮液。 5、在1号计数杯中加入0.1ml溶血剂,溶解红细胞。 6、把1号、2号计数杯混匀后放到Sysmex-F820半自动血细胞分析仪上进行计数,直接得出结果。
实验注意事项 放稀释液时靠着计数杯的内壁,避免产生气泡。 采血后,血液要立即吹入稀释液中。反复吸吹,把血液全部吹入稀释液中。血液凝固后不能用于测定,必须重新采血,以免引起堵孔。 吸血量要准确,采血管中的血不应混有气泡,管外壁沾附的血液要拭净。 上样前注意摇匀,否则读数偏低。
结果分析 • 白细胞增高常见于炎症,细菌或病毒感染以及各种的血液疾病。许多生理因素可以引起白细胞总数增加。急性短时运动可以使中性粒细胞急剧增高,在大强度短时运动后淋巴细胞明显增高,运动使外周血白细胞增加的程度与训练的水平有密切关系。白细胞生理性增高是白细胞从贮备池 、边缘池进入循环池所致。 • 白细胞减少常见于白细胞减少症。生成障碍,破坏过多、分布异常三方面能引起白细胞减少。
结果分析 • 红细胞增加常见于真性红细胞增多症、严重脱水 。高原地区居住或高原训练的运动员,红细胞代偿性增加。 • 红细胞减少主要见于造血功能障碍、贫血、红细胞脆性增加,破坏过多等。
实验报告 • 把注意事项、操作步骤写下来,结果分析一下是不是在正常范围内,增高或偏低都分析一下原因。 • 在下一节实验课交实验报告。