1 / 22

Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium

Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium. Elválasztástechnika. kv1n1lv1. MS. Ionforrás Analizátor Detektor Vákuum rendszer Adatgyűjtés, vezérlés. API-MS. ELECTROSPRAY:

kadeem
Download Presentation

Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Elválasztástechnikai Kutató és Oktató Laboratórium Elválasztástechnika kv1n1lv1

  2. MS Ionforrás Analizátor Detektor Vákuum rendszer Adatgyűjtés, vezérlés

  3. API-MS ELECTROSPRAY: Ionization process which uses electrical fields to generate charged droplets and subsequent analyte ions by ion evaporation for MS analysis. PNEUMATICALLY ASSISTED ELECTROSPRAY: Same as electrospray (above) except the initial droplet formation is the result of pneumatic nebulization. APCI: A gas phase chemical ionization (CI) process where the solvent acts as the CI reagent gas to ionize the sample. APPI: Krypton lamp producing ultraviolet light ionizes gas phase analytes or dopants with subsequent gas-phase reactions. AP-MALDI Analyte and matrix spotted on plate. Matrix absorbs laser radiation causing matrix and sample to vaporize and ionize the sample. Additional ions may be formed in the gas-phase. …

  4. API-MS AP/MALDI API/Electrospray 100,000 10,000 APPI Molecular Weight APCI 1000 very polar nonpolar Analyte Polarity

  5. Electrospray ionization - ESI Electrospray Ions Nebulizer (gas shown in red) Heated nitrogen drying gas -4000 V Solvent spray  +   +              Dielectric capillary entrance Evaporation Rayleigh Limit Coulomb Explosion Evaporation Analyte Ion

  6. ESI High Voltage Mesh Assembly Nebulizer Hinges for rapid changeover from ESI to APCI Capillary Entrance

  7. ESI Nebulizer Pressure Vcap Drying Gas Temperature and Flow Fragmentor

  8. ESI Hatékony detektálás feltétele a vizsgálandó vegyület ionos formájának jelenléte az oldatban: • Pozitív ion üzemmódban: • Bázikus vegyületek (pl. peptidek, bázikus gyógyszermolekulák) • Csökkentjük a pH-t: ecetsavval, hangyasavval, trifluor ecetsav (TFA) • Negatív ion üzemmódban: • Savas vegyületek • Növeljük a pH-t (ammónium hidroxiddal) • Semleges vegyületek: töltés csere, APCI (később…)

  9. ESI –adduktok pozitív módban

  10. ESI – adduktok negatív módban

  11. APCI aeroszol képzés; oldószer mentesítés (hőátadással); hatékony ionizálás (nagyfeszültségű kisülésű tű 5-10kV; 1-5mA); Komplementere az elektrospraynek, alternatív ionizálási lehetőség. Nagy érzékenység, robusztusság jellemzi és alkalmazható a hagyományos áramlási sebességeknél.

  12. APCI

  13. APCI

  14. APPI • APCI-hoz hasonlóan elporlasztjuk az eluenst fűthető ionforrásban. • Az ionforrásba bejuttatunk ún. doppáns vegyületet. • UV sugárzás hatásáraionizálódnak a doppáns molekulák és ún. „fotoionok” jönnek létre. • Afotoionok ion-molekulaláncreakciókat iniciálnak, amely soránlétrejönnek az ionizált molekulák [MH]+ formában (proton transzfer) vagy [M]+• (töltés transzfer). Alkalmazott doppánsok (Toluol, Aceton)

  15. Mintabevitel API-MS-be Infúzó • Folymatos mintaáram Flow Injection Analysis (FIA) • Eluensbe injektált minta elválasztás nélkül Elválasztást követően • HPLC • Kapilláris elektroforézis

  16. ESI-APCI és a HPLC Electrospray APCI - • Operates from 200 - 1500 µL/min • Compatible with: • 4.6, 3.0, and 2.1 mm i.d. columns • 4.6 mm i.d. column is popular choice • Not concentration sensitive • Use with reversed- and normal- mobile phases • Operates from 1 - 1000 µL/min • Compatible with: • 1.0, 2.1, 3.0and 4.6 mm i.d. columns • 2.1 mm i.d. column is popular choice • Concentration sensitive • Compatible with reversed-phase solvents

  17. ESI, APCI és a HPLC

  18. Product Ion Scan (PIS) SelectPrecursor Ion Scan Products Collision m1+ set m1+ m2+ m2+ m2+ m2+ scan QQQ 1 kvadrupólus Ütközési cella (Q2) 3 kvadrupólus m1 molekula fragmensspektruma

  19. QQQ MS/MS - Precursor Ion Scan

  20. QQQ MS/MS Constant Neutral Loss

  21. (M+X)+- 2 hydrogen molecule (M+X)+- H2 (M+X)+- 18 water (M+X)+- H2O (M+X)+- 20 hydrogen fluoride (M+X)+- HF (M+X)+- 28 CO or ethylene (M+X)+- CO or (M+X)+- C2H2 (M+X)+- 30 formaldehyde (M+X)+- H2CO (M+X)+- 31 methylamine (M+X)+- CH3NH2 (M+X)+- 32 ethanol (M+X)+- CH3CO2H (M+X)+- 36 hydrogen chloride (M+X)+- HCl (M+X)+- 44 carbon dioxide (M+X)+- CO2 (M+X)+- 46 nitrogen dioxide (M+X)+-NO2 (M+X)+- 60 acetic acid (M+X)+- CH3CO2H (M+X)+- 90 Silanol (M+X)+- HO-Si-(CH3)3

  22. Multiple Reaction Monitoring (MRM) Molekulaionszűrése Fragmens ionszűrése Fragmentáció QQQ

More Related