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三种重金属离子对水稻叶片 光合特性的影响. 马 晓 娟 导师:王忠. 重金属污染是工业、交通运输业迅速 发展的结果。重金属对农田的污染导致重 金属在作物根、茎、叶和籽粒中大量积累, 不仅会进入食物链,危及人类健康,也会 严重影响作物的生长发育, 造成产量的下降,给人类 生存带来巨大威胁。.
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三种重金属离子对水稻叶片 光合特性的影响 马 晓 娟 导师:王忠
重金属污染是工业、交通运输业迅速 发展的结果。重金属对农田的污染导致重 金属在作物根、茎、叶和籽粒中大量积累, 不仅会进入食物链,危及人类健康,也会 严重影响作物的生长发育, 造成产量的下降,给人类 生存带来巨大威胁。
目前,有关重金属污染对作物伤害机理的研究主要集中在以下几个方面:①重金属离子干扰根系对矿质养分的吸收和运输;②重金属离子诱导植物体内产生大量活性氧自由基和过氧化物.③重金属离子和重要生物大分子结合。对前二者的研究较多,而对后者的研究较少。虽然有一些研究工作涉及到了光合作用,但报道不多,而以水稻为材料,研究Cd2+、Cu2+、Hg2+对光合特性的影响还未见报道,我们在这方面作了初步研究。目前,有关重金属污染对作物伤害机理的研究主要集中在以下几个方面:①重金属离子干扰根系对矿质养分的吸收和运输;②重金属离子诱导植物体内产生大量活性氧自由基和过氧化物.③重金属离子和重要生物大分子结合。对前二者的研究较多,而对后者的研究较少。虽然有一些研究工作涉及到了光合作用,但报道不多,而以水稻为材料,研究Cd2+、Cu2+、Hg2+对光合特性的影响还未见报道,我们在这方面作了初步研究。
1.材料与方法 1.1材料 杂交稻协优818 1.2处理方法 水稻小苗采用土培法.水稻发芽后,播种于小塑料盆钵中培养10天,用不同浓度的重金属溶液进行处理,其中,Cu2+浓度分别为:20ppm、60ppm、100ppm,Cd2+、Hg2+浓度均分别为:40ppm、120ppm、200ppm,处理8天进行取样测定。
1.3 实验方法 1.3.1叶绿素含量的测定 将叶片洗净,擦干,剪碎 称取0.1克左右 加丙酮无水乙醇 放入具塞三角瓶或刻度试管 室温下暗处提取24小时 取上清液,测光密度
按下式计算叶绿素含量: 叶绿素a(mg/g)= (12.71A663-2.95A645)V/1000W 叶绿素b(mg/g)=(22.88A645-4.67A663)V/1000W 叶绿素(a+b)(mg/g)=(8.04A663+20.29A645)V/1000W
1.3.2希尔反应活力测定 • 1、取叶片5克,洗净,擦干剪碎放入研钵中(研钵置于冰浴中) • 2、加入5ml预冷提取介质[50mmol/L(pH7.5)Tis-HCl缓冲液,迅速将叶片研磨成匀浆,通过4层纱布过滤于一离心管中,
3、4℃下800×g离心5分钟,弃上清液,沉淀即为 完整叶绿体 • 4、用3ml提取介质悬浮叶绿体,置冰浴中备用 • 5、取2只试管(均用牛皮纸包裹,不透光),编号
6、1号管加提取介质5ml,2号管加提取介质4.5ml和叶绿体悬浮液0.5ml6、1号管加提取介质5ml,2号管加提取介质4.5ml和叶绿体悬浮液0.5ml • 7、两试管中各加1mmol/L的2,6-D溶液摇匀,置于玻璃水缸中,照光20分钟 • 8、立即用提取介质为空白,在分光光度计上测620nm处的吸光度值 • 9、取1ml叶绿素悬浮液,用丙酮乙醇(1:1)混合液提取叶绿素,测定652nm处的吸光度值 • 10、计算希尔反应活力(mmol 2,6-D/mg(叶绿素)•h)
2 结果与分析 2.1重金属离子对叶片 叶绿素含量的影响 不同重金属离子对水稻叶片叶绿素含量的影响存在明显差异:Cu2+最严重,Hg2+次之,Cd2+的影响最小
2.2 重金属离子对叶绿素a/b比值的影响 三种重金属离子均在低浓度时导致叶绿素a/b值增加,而随浓度升高,a/b值下降。这可能是水稻对重金属离子胁迫逆境的适应性反应。
2.3 重金属离子对叶片希尔反应的影响 三种重金属离子对希尔反应活力的影响趋势一致,随处理浓度的增加,希尔反应活力降低,而以Cu2+对希尔反应活力的影响最大,其次为Hg2+,Cd2+影响最小。
3.小结与讨论 过去的研究已表明,PSⅡ是重金属离子作用的重要位点(Clijsters 和Assehe1985).李建宏等(1997)研究发现,Cu2+对蓝藻光合作用的抑制表现在Cu2+抑制光能的吸收与传递,而且主要是对蓝藻蛋白的抑制作用.本实验主要以杂交稻协优818为材料,研究三种重金属离子(Cu2+、Hg2+、Cd2+)对水稻叶片光合作用的影响。初步得到以下结论:
1、三种重金属离子对叶片叶绿素含量都表现出低浓度的刺激增加,而高浓度的抑制。1、三种重金属离子对叶片叶绿素含量都表现出低浓度的刺激增加,而高浓度的抑制。 • 2、叶绿素a/b值的变化趋势类似于叶绿素含量的变化趋势,表现出先增加后降低的规律。这是水稻对重金属离子毒害的适应性反应. • 3、从希尔反应活力的测定结果我们发现,三种重金属离子不管是低浓度胁迫还是高浓度胁迫,其希尔反应活力均低于对照。