1 / 49

Säilyvyysajan määrittäminen elintarvikkeille

Säilyvyysajan määrittäminen elintarvikkeille. Erikoistutkija Tuula Johansson Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö Elintarvikemikrobiologiajaosto. Mikrobikriteeriasetus – Listeria monocytogenes. Raja- arvoa 100 pmy /g sovelletaan (1)

kimball
Download Presentation

Säilyvyysajan määrittäminen elintarvikkeille

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Säilyvyysajan määrittäminen elintarvikkeille Erikoistutkija Tuula Johansson Elintarvike- ja rehumikrobiologian tutkimusyksikkö Elintarvikemikrobiologiajaosto Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  2. Mikrobikriteeriasetus – Listeria monocytogenes Raja-arvoa 100 pmy/g sovelletaan (1) Muihinkuinimeväisillejaerityisiinlääkinnällisiintarkoituksiintarkoitettuihin, sellaisenaansyötäviinelintarvikkeisiin (RTE) • joissaListeria monocytogenes (LMO) eivoikasvaaelistabiloitutuote: LIITE I, 1. luku, alaviitteet 4 ja 8 • tietyttuotteetkutenesim. tuoreetkokonaisethedelmät, sokeri, keksityms. • pH < 4,4 tai aw < 0,92 tai joiden pH <5,0 ja aw <0,94 tai myyntiaikaalle 5 vrk; muuttieteellisestiperustellut Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  3. Mikrobikriteeriasetus – Listeria monocytogenes Raja-arvoa 100 pmy/g sovelletaan(2) • joissa LMO voikasvaa, muttavalmistajapystyyosoittamaantoimivaltaistaviranomaistatyydyttävällätavalla, ettätuoteeiylitärajaa 100 pmy/g myyntiaikana → tuotteenvalmistuksestavastaavanelintarvikealantoimijantuleetehdätutkimuksia, joillaarvioidaantuotteiden LMO-pitoisuuksiaennakoitavissaolevissasäilytysolosuhteissa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  4. Mikrobikriteeriasetus – LIITE II Artiklan 3, kohdan 2 tarkoittamattutkimukset • Fysikaalis-kemiallisettutkimuksetkuten pH, aw, NaCl-pitoisuus, säilöntäaineet, pakkaustyyppiottaenhuomioonvarastointi- jatuotanto-olosuhteet, saastumismahdollisuudetjaaiottumyyntiaika • Tieteelliseenkirjallisuuteenjatutkimustuloksiinperehtyminen Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  5. Mikrobikriteeriasetus – LIITE II Artiklan 3, kohdan 2 tarkoittamattutkimukset… Elleiedellisistäriittävästitietoa → • Matemaattisetennustemallit - ilmaiset • Growth Predictor • Institute of Food Research, UK • www.Ifr.ac.uk/safety/growthpredictor • Pathogen Modelling Programme • The United States Department of Agriculture, Agriculture Research Service • http://ars.usda.gov/Services/docs.htm?docid=6786 • Kaupallisetennustemallit • Ohjetoimijoille, malliesimerkitliitteissä 5.3. ja 5.4 tehtykaupallisillaennustemalleilla Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  6. Mikrobikriteeriasetus – LIITE II Artiklan 3, kohdan 2 tarkoittamattutkimukset… Elleiedellisistäriittävästitietoa → • Tuoteeseenlisätyn LMO-bakteerinkasvu- tai selviytymiskyvyntutkiminenerilaisissakohtuudellaennakoitavissasäilytysolosuhteissa • Tuotteessamahdollisestiolevan LMO-bakteerinkasvun/selviytymisentutkiminenmyyntiaikanakohtuudellaennkoitavissajakelu-, varastointi- jakäyttöolosuhteissa • Päätöksentekopuulisätutkimustarpeestakomissionohjeistuksessatoimijoille Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  7. Ohjeistukset • Elintarvikealan toimijoille EU-komissionohje/ GUIDANCE DOCUMENT On Listeria monocytogenesshelf-life studies for ready-to-eat foods, under Regulation (EC) No 2073/2005 of 15 November 2005 on microbiological criteria for foodstuffs (2008) • Laboratorioille EU-vertailulaboratorion(EU-RL) ohje/ TECHNICAL GUIDANCE DOCUMENT On shelf-life studies for Listeria monocytogenesin ready-to-eat foods (2008) - version 2, corrected 29/04/2008 • EU-RL / Training package on: Challenge tests, durability studies and predictive microbiological software (2010) Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  8. Milloin myyntiaikatutkimuksia (shelf-life studies) tehtävä • Uusi tai muunnettu tuote • Uusi prosessi tai muutos prosessissa • Uusi pakkaustapa • Merkittävä muutos lisäaineissa tai pakaamisessa • Muutos tuotannossa tai laitteistossa • Myyntiaikatutkimuksia ei ole tehty Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  9. Mallintaminen soveltuu • Ennustamaan kasvua erilaisissa olosuhteissa • Ennustamaan kasvun todennäköisyyttä • Arvioimaan kontaminaatioastetta tiettynä ajankohtana • Vertaamaan kahden erän välistä vaihtelua • Koostumuksen optimointiin -> stabiilisuus • Arvioimaan kylmäketjun katkeamisen vaikutusta • Kriittisten pisteiden tunnistamiseen Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  10. Koulutuspaketti – EU-RL – Listeria monocytogenes (ANSES) 5 osaa • Johdanto • Kasvututkimukset (challenge tests) • kasvupotentiaalin (δ)määrittämiseksi • Maksimikasvunopeuden (µmax) määrittämiseksi • Säilyvyystutkimukset (durability studies) • Yhteenveto Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  11. Johdanto (1) Kasvututkimukset (challenge tests) - tehdään keinotekoisesti kontaminoiduilla näytteillä a) Kasvupotentiaalin (δ) määrittäminen tarkastelun kohteena: • RTE, joissa LMO ei kasva • RTE, joissa kasvaa →kasvupotentiaalin määrittäminen • Kun tiedetään δ ja lähtöpitoisuus, voidaan laskea lopullinen pitoisuus • δ :n avulla on mahdollista päätellä maksimipitoisuus, jolla pitoisuus myyntiajan lopussa on 100 pmy/g Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  12. Johdanto (2) Kasvututkimukset… b) Esim. maksimikasvunopeuden (µmax) arvioiminen/määrittäminen • Maksimikasvunopeuden avulla voidaan laskea pitoisuus minä tahansa päivänä annetuissa säilytysolosuhteissa 1) lähtöpitoisuus → pitoisuus tiettynä ajankohtana 2) pitoisuus tiettynä ajankohtana → lopullinen pitoisuus Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  13. Johdanto (3) Säilyvyystutkimukset (durability studies) - tehdään luonnollisesti kontaminoituneilla näytteillä → LMO-pitoisuus tutkimuksen päätyttyä → arvioitu tuotemäärä, jonka pitoisuus >100 pmy/g myyntiajan lopussa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  14. Johdanto (4) Kyseessä uusi tuote Mitataan pH ja aw • pH < 4,4 tai aw< 0,92 pH < 5,0 ja aw< 0,94 → LMO ei voi kasvaa 2. Muut pH- ja aw - olosuhteet Arvioidaan kyky kasvaa elintarvikkeessa ja kasvu myyntiaikana → kasvutitkimukset (challenge tests) kasvupotentiaalin arvioimiseksi tai ennustava eli prediktiivinen mikrobiologia Jo kaupallistettu tuote • säilyvyystutkimukset (durability studies) antavat tietoa LMOn kasvusta Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  15. Säilyvyystutkimuksen valinta • Kasvupotentiaalinmäärittäminenensisijainenvaihtoehtouseimmissatapauksissa, erityisestierottamaantuotteet, joissa LMO kasvaa tai eikasva • Toissijainenvaihtoehtomaksimikasvunopeudenmäärittäminensellaisissatapauksissa, joissasiitäsaatavaalisäinformaatiotapidetäänhyödyllisenä • Säilyvyystutkimukset on suositeltavavaihtoehto, jos LMO-pitoisuudetsuuria Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  16. Kasvupotentiaalin (δ) määrittäminen esimerkkinä pekonikuutiot • Pekonikuutiota voidaan syödä raakana →RTE, jossa listeriariski Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  17. Kasvupotentiaalin (δ) määrittäminen (2) • Kokeella arvioidaan LMOn kasvua elintarvikkeessa, joka • keinotekoinen kontaminoitu • Säilytetään ennakoiduissa olosuhteissa tuotannosta kulutukseen • δ = (pitoisuus log10 kokeen lopussa) – (pitoisuus log10 kokeen alussa) Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  18. Kasvupotentiaalin (δ) määrittäminen (3) • Kasvupotentiaalia voidaan käyttää • Selvittämään, voiko LMO kasvaa elintarvikkeessa • Määrittämään, kuinka paljon LMO voi kasvaa elintarvikkeessa tuotannosta kulutukseen • Määrittämään sellainen lähtöpitoisuus, joka ei ylitä 100 pmy/g myyntiajan lopussa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  19. Kasvupotentiaaliin vaikuttavat mm. • Siirrostetut kannat • Elintarvikkeen ”sisäiset tekijät ” - pH, NaCl-pitoisuus, aw, taustamikrobisto, säilöntäaineet ym. • Ulkoiset tekijät - lämpötila, kaasuilmakehä • Stressi - kylmyys, osmoottinen stressi Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  20. Kasvupotentiaalia määritettäessä huomioon otettavat tekijät/asiat 1. Tuotteen ominaisuudet ja myyntiaika • Fysikaalis-kemialliset ominaisuudet • Vähintään pH, aW, (suolapitoisuus, säilöntäaineet) • Taustamikrobisto ja tuotteelle spesifinen mikrobisto • esim. maitohappobakteerit • Pakkaus • esim. tyhjiö, suojakaasu • Myyntiaika • VKP tai parasta ennen Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  21. Kasvupotentiaalia määrittäminen… 2. Erien lukumäärä ja LMO-kantojen valinta • Vähintään 3 erää • Vähintään 3 LMO-kannan sekoitus • Yksi vertailukanta • Muut kaksi eristetty ko. matriisista tai sen kaltaisesta matriisista Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  22. Kasvupotentiaalia määrittäminen… 3. LMO-siirroksenvalmistaminen • Kukin kanta kasvatetaan stationäärivaiheen alkuun (37˚C/18 h) 1. Ensin optimiolosuhteissa 2. Edelleen olosuhteissa, jotka vastaavat tuotteen säilytysolosuhteita → sopeutuminen • Kasvua voidaan mitata turbidometrisesti esim. spektrofotometrillä tai viljelyllä Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  23. Erien lukumäärä ja kantojen valinta • Vähintään 3 eri erää • Vähintään 3 kannan sekoitus • Yksi vertailukanta • Muut eristetty ko. matriisista tai sen kaltaisesta matriisista Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  24. Kasvupotentiaalia määrittäminen… 3. LMO-siirroksen valmistaminen … • Kukin viljelmä säädetään samaan pitoisuuteen ja yhdistetään yhtä suurina tilavuuksina • Yhdistelmäviljelmä laimennetaan ennen tuotteeseen pipetointia siten, että pitoisuudeksi tuotteessa 50 pmy/g → Yksityiskohtaiset ohjeet siirroksen valmista- misesta koulutuspaketissa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  25. 4. LMO-siirroksen lisääminen tuotteeseen • Siirros lisätään joko kokonaiseen tuotteeseen tai sen osaan • Jos tuote koostuu useista komponenteista (esim. salaatti), siirrostetaan se komponentti, joka todennäköisimmin saastuu listerialla • Pyritään jäljittelemään luonnollista kontaminaatiota • Siirrostus sisäosaan, jos tuote homogeeninen (esim. jauhetut tuotteet tai salaatti) • Siirrostus pintaan: jäljitellään tietyn tuotteen osan saastumista tuotantolinjassa (esim. kylmäsavu-savulohi, joka saastuu siivutettaessa) Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  26. LMO-siirroksen lisääminen tuotteeseen… • Siirrostus voidaan tehdä • Pakkauksen läpi (kalvo 22, kuva oikealla) • Avaamalla pakkaus ja pakkaamalla tuote uudelleen siirrostuksen jälkeen siten, kaasuilmakehä on sama kuin alkuperäisessä pakkauksessa (kalvo 22, kuva vasemalla) Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  27. Siirroksen valmistaminen • Kukin kanta viljellään stationäärivaiheen alkuun 1. Optimiolosuhteissa 2. Olosuhteissa, jotka vastaavat tuotteen säilytysolosuhteita • Kukin viljelmä säädetään samaan pitoisuuteen ja yhdistetään yhtä suurina tilavuuksina • Yhdisteviljelmä laimennetaan vastaamaan tuotteessa esiintyvää pientä pitoisuutta → Yksityiskohtaiset ohjeet siirroksen valmistamisesta koulutuspaketissa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  28. 5. Tutkimukset • Tutkittava min 3 näytettä/erä kokeen aloituspäivänä ja viimeisenä päivänä (VKP tai parasta ennen) • Suositeltavaa tutkia myös pari kertaa siltä väliltä, esimerkissä yhteensä 30 näytettä tutkittavana • LMO osoittaminen ja määrittäminen kontrolleista (n=6) ja määrittäminen siirrostetuista näytteistä (n=12) • Fysikaalis-kemialliset ominaisuudet; yksi näyte riittää, jos tuote homogeeninen (n=6) • Taustamikrobiston pitoisuus (n=6) Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  29. 6. Säilytysolosuhteet Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  30. 7. Kasvupotentiaalin laskeminen Kullekin 3:lle erälle • δ = (mediaanipitoisuus log10 kokeen lopussa) – (mediaanipitoisuus log10 kokeen alussa) → valitaan maksimiarvo jatkolaskelmia varten • Yksityiskohtaiset ohjeet koulutuspaketissa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  31. 8. Kasvupotentiaalin hyödyntäminen • δ< 0,5 log10 → LMO ei kasva tuotteessa • δ> 0,5 log10 → LMO kasvaa → δ-arvoa voidaan käyttää kasvun ennustamiseen • Lopullinen pitoisuus = alkupitoisuus + δ • Lähtöpitoisuus = lopullinen pitoisuus - δ Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  32. 8. Kasvupotentiaalin määrittäminen Edut • Suhteellisen yksinkertainen ottaa käyttöön • Tulokset saadaan heti käyttöön Heikkoudet Joustavuuden puute tulosten tulkinnassa: tulokset pätevät tutkitulle elintarvikkeelle tutkimuksessa käytetyissä olosuhteissa; jos muutoksia (esim. koostumus, aika-lt –yhdistelmä) → uusi tutkimus • Puutteiden täydentäminen mallintamalla ja maksimikasvunopeuden määrittämisellä Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  33. Maksimikasvunopeuden (µmax) määrittäminen esimerkkinä kylmäsavulohi • Laboratoriotutkimus, joka mittaa yhden LMO-kannan kasvunopeutta keinotekoisesti kontaminoidussa elintarvikkessa, jota säilytetään tietyssä lämpötilassa • µmax saadaan kasvukäyrästä = eksponentiaalisen kasvuvaiheen kulmakerroin Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  34. Maksimikasvunopeuteen vaikuttavat tekijät • LMO-kanta • Sisäiset tekijät • mm. pH, NaCl-pitoisuus, aw, taustamikrobisto, säilöntäaineet • Ulkoiset tekijät - lämpötila, kaasuilmakehä Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  35. Maksimikasvunopeutta määritettäessä huomioon otettavat tekijät/asiat • Tuotteen ominaisuudet • Erien lukumäärä • Kantojen valinta • Siirroksen valmistaminen • Tutkittavien tuotteiden lkm/erä • Näytteiden siirrostaminen • Siirrostettujen tuotteiden säilytysolosuhteet • Fysikaalis-kemialliset ominaisuudet • Mikrobiologiset analyysit: osoittaminen ja määrittäminen • µmax laskeminen • Tulosten hyödyntäminen lihavoimattomat: kuten kasvupotentiaalia määritettäessä;lihavoidut: erilainen lähestymistapa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  36. Kantojen valintaja siirroksen valmistaminen • Valitaan 2 nopeimmin kasvavaa kantaa, jotka eristetty kylmäsavulohesta; valinta liemikasvatuksen perusteella • Kaksi uudelleenviljelyä stationäärivaiheen viljelmistä → alustavat kokeet tuotteeseen siirrostettavan LMO-pitoisuuden arvioimiseksi Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  37. LMO-pitoisuuden määrittäminen Osoittaminen ”päivänä 0” ja määrittäminen kokeen lopussa Fysikaalis-kemialliset ominaisuudet Taustamikrobiston pitoisuus Näytteiden lukumäärä Vähintään 10-15; välttämätöntä kasvukäyrän piirtämiseksi 3 + 3 3* + 3* 2 tai 10-15 * Yksi näyte riittää, jos tuote homogeeninen Tutkittavien näytteiden minimilukumäärä/erä Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  38. LMOn siirrostaminen näytteisiin • Lohesta leikataan halkaisijaltaan 9 cm kokoisia kiekkoja, joiden paino on n. 20 g • Yhteensä 72 • 54 LMO:lla siirrostettua → kasvukäyrä • 6 siirrostamatonta → taustamikrobiston määrittäminen • 6 siirrostamatonta → LMO toteaminen pävänä 0 ja määrittäminen viimeisenä pvnä • 6 siirrostettavaksi fysiologisella suolaliuoksella → fysikaalis-kemialliset määritykset Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  39. LMOn siirrostaminen näytteisiin… • Siirrostetaan 5 x 20 µl LMO-suspensiota pistemäisesti puolikkaan näytekiekon pinnalle • Käännetään kiekon siirrostamaton puoli siirrostetun päälle todellisten olosuhteiden jäjittämiseksi • Tyhjiöpakataan • Säilytetään tietyssä lämpötilassa toisin kuin kasvupotentiaalitutkimuksissa, jotka vaihtelevissa lämpötiloissa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  40. Tulosten hyödyntäminen • Kasvukäyrän piirtäminen • Maksimikasvunopeuden (µmax) määrittäminen käyrältä • Tulosten tulkinta mallintamalla – vaatii ennustavan (prediktiivinen) mikrobiologian osaamista Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  41. Edut ja haittapuolet • Edut • Voidaan arvioida LMO-pitoisuus myyntiaikana minä tahansa ajankohtana eri lämpötiloissa • Haittapuolet • Kalliimpi ja aikaa vievempi kuin kasvupotentiaali-tutkimus • Ei ota huomioon lag- ja stationäärivaiheita → Toissijainen tutkimus; jos tarvitaan lisäinformaatiota Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  42. Säilyvyystutkimus (durability study) • Tutkimus mikro-organismin kasvun arvioimiseksi elintarvikkeessa • Luonnollisesti kontaminoitunut tuote • Säilytys ennakoitavissa olevissa olosuhteissa (reasonably foreseeable) →LMO-pitoisuus tutkimuksen päätyttyä • Muita nimityksiä: • Storage trial – varastointikoe • Ageing test – ikääntymis-/vanhenemiskoe • Durability – säilyvyys tai kestoaika → myyntiaika Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  43. Näytteenotto • Tulee olla edustava • Tarkoituksena on valita tuotantolinjalta n näytettä erän näytteistä (N) • Yksinkertainen satunnaisnäytteenotto esim. Excel-ohjelmalla • Joko ”numeroiduista yksiköistä” • Tai ”numeroiduista tuotantoajoista” Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  44. Yksinkertainen satunnaisnäytteenotto • Yhtäläisen todennäköisyyden periaate • jokaisella yksilöllä populaatiossa yhtäläinen mahdollisuus tulla valituksi → • Oletus, että n/N < 10 % • n= alapopulaation koko • N= Erän koko • Numeroidaan tuotteet tai tuotantoajat ja valitaan satunnaisesti numerot riittävän näytemäärän saamiseksi • Esim. satunnaisnumerot Excelistä =RAND(), tai satunnaislukutaulukoista – kuvattu ohjeistuksessa Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  45. Säilytysolosuhteet ja mikrobiologiset analyysit • Säilytysolosuhteet kuten kasvupotentiaalia määritettäessä • Tutkimukset säilytysajan lopussa • LMOn osoittaminen • LMOn lukumäärän määrittäminen • Samasta suspensiosta tai homogenoidusta näytteestä • Määritysraja 10 pmy/g • Määritysrajan alentamiseksi EU-RL kehittänyt suodatusmenetelmän, jossa entsymaattinen digestio suodattuvuuden parantamiskesi: määritysraja 0,2 pmy/g, jos 50 ml alkususpensiota maljataan kolmelle suodatinpaperille Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  46. Tulosten laskeminen • Tulos on niiden näytteiden osuus (%), joiden pitoisuus ylittää 100 pmy/g myyntiajan lopussa luotettavuusrajoineen (CI) säilytettynä ennakoitavissa olevissa olosuhteissa • Ideaalitilanne: 0-tulosta >100 pmy/g, tai vielä parempi, jos kaikki tulokset <10 pmy/g, edellyttäen, että n on riittävän suuri • Mitä enemmän näytteitä, sitä luotettavampi tulos → tulosten kerääminen toistetuista tutkimuksista Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  47. Luotettavuusrajojen (CI) laskeminen • Laskija internetistä; osoite koulutuspaketissa s. 78: http://causascientia.org/math-stat/ProtortionCI.html • Myös kuvaus CI:n laskemisesta • Esimerkki kylmäsavulohesta Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  48. Edut ja rajoitukset (durability studies) • Tulokset realistisempia kuin kasvututkimusten (challengetests) tulokset • Luonnollisesti kontaminoitunut tuote: kanta, stressi, jakautuminen näytteeseen ja pitoisuus luonnollisia • Tulosten tulkinta voi olla vaikeaa • tuotteiden kontaminaatioaste todennäköisesti alhainen • LMO-lähtöpitoisuudet pieniä • LMO epätasaisesti jakautunut erän tuotteisiin → tutkittava paljon näytteitä ennen kuin saadaan riittävästi aineistoa säilyvyysajan määrittämiseksi → muut tutkimukset, esim. kasvututkimukset lisäksi tarpeen Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

  49. Tulosten tulkinta • Mitä enemmän tuotteita tutkitaan, sitä luotettavampia ovat tulokset • Toimijoiden yhteistyö, jos tuotteet identtisiä ja säilytysolosuhteet samanlaiset Listeriariskin hallinta elintarvikeketjussa, AEL Insko seminaari 26.1.2012 Tuula Johansson

More Related