细菌培养

细菌培养 病原生物学与免疫学教研室张艳平

导入新课细菌生长繁殖需要哪些条件？

教学目标与训练项目 • 能力目标： • 进行细菌的接种与培养以及鉴定细菌，了解传染病的实验诊断方法；规范地进行无菌操作。 • 知识目标： • 1、了解培养基制备的基本程序，掌握常用培养基的种类和用途。 • 2、熟悉细菌的分离培养技术，掌握细菌在培养基上的生长现象及意义。 • 3、了解细菌的代谢产物及所具有的不同生化反应，以利细菌的鉴定和鉴别。 • 训练项目：细菌培养 • 学生分组进行细菌接种培养，观察常用的培养基以及细菌在培养基上的生长现象和细菌的生化反应，记录结果并讨论分析。

细菌培养 一、常用培养基种类二、细菌的接种法三、细菌在培养基上生长现象四、常用生化反应五、正常人体咽喉部细菌检查

一、常用培养基种类 1、培养基的概念： 2、培养基的制备一般程序：称→溶→调pH→分装→灭菌备用。

一、常用培养基种类 3、依用途不同分类选择培养基厌氧培养基鉴别培养基营养培养基基础培养基

一、常用培养基种类 4、依物理性状不同分类液体培养基半固体培养基固体培养基

二、细菌的接种法 （一）分离培养 1. 平板分离划线接种法（二）纯培养 1.斜面培养基接种法 2.半固体培养基接种法 3. 液体培养基接种法

1. 平板分离划线接种法

培养结果 接种方法

1 2 4 3 菌苔菌落接种方法培养结果

注意事项： 1. ①区和②区之间要灭菌 2. ④区不要接上①区 3. 用力适当，不要划破琼脂表面 4. 注意无菌操作

2. 半固体培养基接种法 菌种：大肠杆菌、葡萄球菌方法：穿刺接种结果：沿穿刺线生长——动力- 扩散生长——动力+

半固体培养基 穿刺线模糊穿刺线清楚动力- 动力+

3. 液体培养基接种法

液体培养基中 菌膜生长混浊生长沉淀生长

三、细菌在培养基上生长现象 1. 固体菌落菌苔动力+ 动力- 2. 半固体沉淀—成链生长浑浊—均匀分散生长菌膜—表面生长（需氧菌） 3. 液体

实验结果： 1. 平板分离培养大肠杆菌菌落：扁平、宽大、无色素金葡菌菌落：小而凸、金黄色脂溶性色素 2. 半固体穿刺接种大肠杆菌：沿穿刺线扩散生长/动力+ 葡萄球菌：沿穿刺线生长/动力- 3.液体培养基链球菌—沉淀生长（成链）葡萄球菌—浑浊生长（均匀分散）枯草杆菌—菌膜生长（表面）

四、常用生化反应 1、糖发酵试验红色- 黄色 + 黄色+气泡 + 乳糖发酵管

糖发酵试验鉴别大肠埃希菌与肠道致病菌 大肠埃希菌：分解乳糖，产酸产气黄色+气泡 + 分解葡萄糖，产酸产气黄色+气泡 + 肠道致病菌（如痢疾志贺菌和伤寒沙门菌）：不能分解乳糖，红色- 分解葡萄糖，产酸不产气，黄色+

2、硫化氢试验 +（FeS黑色） 黑色沉淀 +；无黑色沉淀 -

3、克氏双糖铁培养基 红色- 黄色 + 黄色+气泡 + 黑色沉淀 +

细菌的生化反应实验结果：

五、正常人体咽喉部细菌检查（操作） 材料：血平板、咽拭子方法：平板分离划线接种法结果：甲链菌落：细小、狭窄的草绿色溶血环乙链菌落：细小、宽大的透明溶血环

实验小结 1、常用培养基的种类及用途； 2、细菌的生长现象； 3、细菌生化反应的意义。

实验报告： 1、记录常用培养基的种类。 2、记录细菌生长现象。 3、记录细菌的生化反应

细菌培养

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