300 likes | 509 Views
http://www.cellbio.ebc.ee/rakubio/. RNA süntees e. transkriptsioon. Transkriptsiooni viib läbi ensüüm RNA-polümeraas. RNA-polümeraas. Kasutab RNA sünteesiks ribonukleosiid-trifosfaate, mis on sünteesil ka energia allikaks Sünteesib samuti 5’ → 3’ suunas Ei vaja alustamiseks praimerit
E N D
RNA-polümeraas • Kasutab RNA sünteesiks ribonukleosiid-trifosfaate, mis on sünteesil ka energia allikaks • Sünteesib samuti 5’ → 3’ suunas • Ei vaja alustamiseks praimerit • DNA polümeraas eksib kord 107 nukleotiidi kohta • RNA polümeraas eksib kord 104 nukleotiidi kohta
Rakud toodavad kolme tüüpi RNAd: • mRNA e. messenger-RNA – kopeeritakse geenidest, mis määravad mōne valgu järjestuse. mRNA järjestuse alusel süntee-sitakse hiljem valku • Umbes 10% (pärmil) geenidest kopee-ritakse RNAna, mis ongi nende geenide jaoks lōpp-produktiks. Need on: • ribosomaalne e. rRNA • transport- e. tRNA
Ühekorraga transkribeeritav RNA – transkriptsiooniühik • Eukarüootides üks üks RNA molekul/üks valk • Prokarüootides vōib üks transkriptsiooniühik sisaldada mitme valgu kodeeritvat järjestust
Ühelt geenijärjestuselt vōib samaaegselt toimuda paljude RNA-molekulide transkriptsioon
Transkriptsioon prokarüootidel • Transkptsioon algab kui RNA-polümeraasi σ-faktor seondub geeni promootoriga ja • lōpeb geeni terminaatorjärjes-tuse juures • Promootorjärjestus on asümmeetriline ja määrab RNA sünteesi suuna
Prokarüootidel on üks RNA-polümeraas, mis sünteesib kōiki RNA tüüpe • Eukarüootidel on 3 tüüpi RNA-polümeraase: • RNA-polümeraas I (tRNA, rRNA, väikesed RNAd) • RNA-polümeraas II (mRNA) • RNA-polümeraas III (tRNA, rRNA, väikesed RNAd)
RNA-polümeraas II • Erinevalt bakteriaalsest RNA-polümeraasist vajab RNA-polümeraas II sünteesi alustamiseks alati üldiseid transkriptsioonifaktoreid (valgud, TFII), mis peavad enne transkriptsiooni algust seonduma polümeraasi ja promootori piirkonnas asuva nn TATA-boksiga (umbes 25 nukleotiidi ülalpool transkriptsiooni alguspunkti)
RNA polümeraas II transkriptsiooni initsieerimine eukarüootses rakus
Polümeraas II vajab in vivo veel aktivaatoreid, mediaatoreid ja kromatiini modifitseerivaid valke
Transkriptsiooni initsieerimine eukarüoodi promootoril - üksikute etappide järjekord: • geeni aktivaator-valk seondub kromatiiniga, seejärel seondub kromatiini ümberkujundavate valkude kompleks • modifitseeritakse (sageli atsüülitakse) histoonid, toimub kromatiini osaline lokaalne lahtipakkimine • geeni regulaator-piirkonnaga seonduvad täiendavad aktivaator-valgud • seonduvad üldised transkriptsioonifaktorid + RNA-polümeraas • esialgne initsiatsioonikompleksi kokkupanek promootoril: • lisandub veel aktivaator-valke • valkude ümberpaigutumine esialgses initsiatsioonikompleksis • algab transkriptsioon
5’ capi lisamine 3’ polüadenüleerimine mRNA splaissimine RNA protsessing eukarüoodis (ei esine prokarüootidel)
mRNA splaissimine eukarüootides • Äsjasünteesitud mRNAst lōigatakse tuumas välja teatud osa mRNA järjestusest (intronid), allesjäävad, valku kodeerivad järjestused (eksonid) splaissitakse (liidetakse omavahel kokku)
Näide alternatiivsest splaissimisest: roti α-tropomüosiini geen
mRNA polüadenüleerimise sait on määratud konsensusjärjestusega (ca 30-40 nukleotiidi)