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化学发光分析法中常见的体系与方法. 生活中常见的化学发光现象. 化学发光分析方法的特点. 化学发光法由于它具有仪器简单、检测限低、线性范围宽等优点,在化学分析方面越来越受到关注。 与分光光度法和荧光光度法相比,化学发光法不需要外来的光源,从而减少了瑞利散射和拉曼散射,降低了噪音信号的干扰,提高了检测的灵敏度,扩大了线性动态范围。
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化学发光分析方法的特点 • 化学发光法由于它具有仪器简单、检测限低、线性范围宽等优点,在化学分析方面越来越受到关注。 • 与分光光度法和荧光光度法相比,化学发光法不需要外来的光源,从而减少了瑞利散射和拉曼散射,降低了噪音信号的干扰,提高了检测的灵敏度,扩大了线性动态范围。 • 同其他的光谱系统一样,化学发光分析过程也有同样的一些缺点,比如选择性差,会对一个系列的化合物做出反应,而不是针对单个的某一化合物。另一个缺点是化学发光的发射强度依赖于各种环境因素,在不同的环境体系中,发射强度和时间的曲线有较大的差别,所以必须严格控制外界的各种因素 • 应用于环境科学、生命科学、食品药品等领域。
生物体化学发光现象的研究起源于古代,但是,直到十九世纪末,这种现象与简单的有机反应相联系才得到解释。生物体化学发光现象的研究起源于古代,但是,直到十九世纪末,这种现象与简单的有机反应相联系才得到解释。 • 1877年 洛粉碱CL • 1905年 洛粉碱类似物 • 1928年 鲁米诺 • 1935年 光泽精 • 1960s PMT 出现 发现许多有机反应可产生CL
化学发光原理 • 所谓化学发光 (CL) , 就是化学反应的能量把体系中共存的某种分子从基态激发到激发态从而产生发光的现象。
化学发光的分类 • 直接化学发光 A + B C* + D C* C + h 例: NO + O3 NO2* + O2 NO2* NO2 + h
化学发光的分类 • 间接化学反应发光 A + B —> C* + D C* + E —> E* + C E* —> E + h
常见的化学发光体系1鲁米诺体系(5-氨基-临苯二甲酰肼)常见的化学发光体系1鲁米诺体系(5-氨基-临苯二甲酰肼) 氧化剂: H2O2 O2 KMnO4 NaClO I2 [Fe(CN)6]3-. 催化剂: 过氧化酶 氧化血红素 过渡金属离子(Co2+ Cu2+ Fe3+)
2 亚硫酸体系 氧化剂: KMnO4 Ce(IV) in acid Mn(III) 增强剂: 三价镧系元素
常见的化学发光分析方法 • 高锰酸钾氧化法 MnO4- +R+H+ H2O+CO2+[Mn(Ⅱ一Ⅳ) ]* [Mn(Ⅱ一Ⅳ) ]* [Mn(Ⅱ一Ⅳ) ]+hv(λ=542nm) 硫酸和磷酸是常用的高锰酸钾氧化法的酸性介质 一些化学添加剂比如感光剂和有机介质的存在可以增强发光强度,甚至几个数量级
常见的化学发光分析方法 • 钌(II)-联吡啶配合物氧化法 Ru(bipy)33+这个复合物性质并不稳定,需要现配现用Ru(bipy)33+试剂 在硫酸介质中,它能与氧化剂产生化学发光,加入某些有机物可以增强其发光强度,且发光强度与有机化合物浓度呈线性关系 使用Ru(bipy)33+作为检测试剂的药物,它们的结构中都含有氮原子
方法的运用 • 沙丁胺醇 、氯霉素 、磺胺类药物、肾上腺素、甲巯咪唑、卡比马唑、己烯雌酚等等 • 含氮药物,比如喹诺酮类等