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第十一章 微生物基因组学. 基因 (gene) : 可遗传的生物学功能单位; DNA 功能片段 → 蛋白质或 RNA 基因组 (genome) : 生物遗传信息的总和。 基因组学 (genomics) : 系统研究生物基因组的序列结构,并从序列结构水平来注释 (annotation) 生命现象的科学。 微生物基因组学 (microbialgenomics) :. 第一节 微生物基因组的结构特征. 一、前核生物基因组结构特征 ( 一 ) 基因组一般拓扑概貌: 有些细菌有两条以上染色体 多为双链环状 DNA 分子组成 仅有拟核,无包膜
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第十一章 微生物基因组学 基因(gene):可遗传的生物学功能单位; DNA功能片段→蛋白质或RNA 基因组(genome):生物遗传信息的总和。 基因组学(genomics):系统研究生物基因组的序列结构,并从序列结构水平来注释(annotation)生命现象的科学。 微生物基因组学(microbialgenomics):
第一节 微生物基因组的结构特征 一、前核生物基因组结构特征 (一) 基因组一般拓扑概貌: • 有些细菌有两条以上染色体 • 多为双链环状DNA分子组成 • 仅有拟核,无包膜 • 拟核中央有一蛋白支架,外周为双链闭环的DNA超螺旋 • 有些细菌含有质粒
(二) 基因组的大小:大多在 2-6 Mb之间 (三) 遗传信息在基因组中排列的连续性: 绝大多数不含内含子,遗传信息为连续的,非间隔的。 (四) 功能相关的基因组成操纵子结构 (五) 结构基因单拷贝,rRNA基因多拷贝 (六) 基因组中的重复序列少而短 (七) 有特殊的终止序列
二、病毒基因组的结构特征 (一) 基因组大小差别很大 (二) 基因组可以是DNA或RNA,每种病毒 只含一种核酸 (三) RNA病毒基因组可以是节段性的 (四) 基因组中有重叠基因现象 (五) 基因组绝大多数序列用于编码蛋白质 (六) 相关基因有簇集现象 (七) 真核细胞的病毒基因组可有内含子
第二节 微生物基因组学的研究内容与方法 一、微生物基因组的序列测定 (一) “基于图谱” (map-based) 的测序战略 遗传图和/或物理图 基因片段测序 ↓ ↓ 基因片段定位组装 ↓ 基因组序列图谱
(二) 鸟枪测序战略: 1. 制备高质量基因组DNA 超声波或酶切随机剪切为 2kb 和 15- 20kb 的DNA片段。 2. 建立大片段和小片段DNA文库 插入测序载体→转染细菌 3. 随机进行高通量测序 随机挑取克隆测序。
二、 基因组注释 (一) 碱基组成分析: C+G含量分析,CG偏离度分析 (二) 密码子偏嗜使用分析: 不同物种编码同一氨基酸时对密码子 使用的偏嗜性不同。 (三) 开放阅读框鉴定: open reading frame,ORF (四) 编码序列鉴定
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(五) 特殊功能序列鉴定: 结构特征、特殊序列等,利用计算机软件及相应网站等进行鉴定 (六) 同源性基因检索: Blast (七) 直系同源蛋白聚类(COG)分析: 全基因组对全基因组比较
Distance tree of resultsSequences producing significant alignments: Score E (Bits) Value gi|33337672|gb|AF125317.1| Pseudomonas sp. pDL01 16S ribosomal R 2706 0.0 gi|110227054|gb|AE004091.2| Pseudomonas aeruginosa PAO1, complet 2706 0.0 gi|49234804|gb|AY631241.1| Pseudomonas aeruginosa clone X13 1... 2706 0.0 gi|40019053|gb|AY486354.1| Pseudomonas aeruginosa strain AU18... 2706 0.0 gi|40019049|gb|AY486350.1| Pseudomonas aeruginosa strain AU04... 2706 0.0 gi|60280971|gb|AY792969.1| Pseudomonas aeruginosa 16S ribosomal 2706 0.0 gi|92111353|gb|DQ464061.1| Pseudomonas aeruginosa isolate PAL... 2706 0.0 gi|71564499|gb|DQ115539.1| Pseudomonas aeruginosa 16S ribosomal 2706 0.0 gi|50346115|gb|AY665977.1| Pseudomonas aeruginosa 16S ribosomal 2706 0.0
第三节 微生物基因组学研究的意义与应用 一、大量未知功能新基因的发现 结构简单,生长、繁殖快,单基因控制,单拷贝基因。 二、带来新的微生物分类和诊断方法: 16S rRNA 分类、诊断 三、微生物基因组学与系统生物学: 一门新兴的学科。
四、宏基因组学 研究微生物群体,群落基因组学。 五、抗微生物新药和疫苗的发现: (一) 揭示出许多微生物生存所必需的基因 (二) 揭示出许多微生物致病和毒力相关的 的基因 (三) 有助于发展特异性很强的基因 开发高度特异的抗微生物药物 (四) 推动疫苗研究