200 likes | 913 Views
Aplikasi kultur jaringan. Pengertian . Kultur jaringan adalah suatu teknik isolasi bagian-bagian tanaman, seperti jaringan, organ ataupun emrio dengan cara mengisolasi bagian tanaman dalam kondisi aseptik sehingga dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi individu baru yang utuh
E N D
Pengertian • Kultur jaringan adalah suatu teknik isolasi bagian-bagian tanaman, seperti jaringan, organ ataupun emrio dengan cara mengisolasi bagian tanaman dalam kondisi aseptik sehingga dapat memperbanyak diri dan beregenerasi menjadi individu baru yang utuh • Teknikkulturjaringandidasariolehkonseptotipotensisel yang artinya total genetic potential atausetiapseldaritubuhmultiselmemilikipotensimemperbanyakdiridanberdiferensiasimenjaditanamanlengkap
Aplikasianggrekbulandengankulturjaringan • Teknik pertama yang digunakan pada perbanyakan vegetatif anggrek adalah kultur meristem • Teknik ini kemudian dikembangkan untuk perbanyakan vegetatif anggrek yaitu dengan cara mengkulturkan meristem, menumbuhkannya, membelahnya menjadi beberapa bagian, msing-masing bagian dikulturkan, sub kultur ini dilakukan berulang-ulang
Langkah- langkahkulturjarinagnpadatanamananggrekbulan (Phalaenopsis). Alat • Laminar Air Flow Cabinet (LAFC) • Cawan petri • Lampuspiritus • Gelaspiala • Pipet + Pipet filler • Alat-alattanam (pinset, tangkaiskapeldanpisayskapel)
Bahan • Daunmudaanggrekphalaenopsis • Fungisidabenlate • BakterisidaAgrimycin • Ca-hipoklorit • HgCl2 • Air steril • Medium MS padat
Prosedur Kerja • Menyiapkan alat-alat dan bahan-bahan yang akan digunakan • Mencampurkan larutan stok hara makro, mikro, Fe-chelat, vitamin dan hormon sesuai kebutuhan ke dalam erlenmeyer sambil digoyangkan agar larutan dapat homogen • Menambahkan gula dalam larutan media tersebut kemudian menera larutan tersebut dengan aquades steril.
Melakukan pengukuran pH • Memasukkan pemadat media (agar 7gr/L atau gelrite 2gr/L) ke dalam larutan media. Setelah itu media dapat langsung dipanaskan dengan menggunakan hotplate atau dipanaskan di atas kompor gas • Setelah larut, menuangkan media tersebut ke dalam botol-botol media yang telah dipersiapkan • Memasukkan botol-botol tersebut ke dalam autoclaf dan disterilisasi dengan suhu 121°C dengan tekanan 1,5 kg/cm2 selama 20-30 menit. • Menyimpan media yang sudah disterilisasi di dalam ruang penyimpanan media ber-AC (suhu 24 - 26°C) selama 3 hari sebelum digunakan untuk memastikan bahwa media tersebut tidak terkontaminasi
angkah selanjutnya !!1 • Sterilisasi alat dan bahan dengan LAFC yaitu di laminar flow dan menggunakan alat-alat yang juga steril.
2) Inisiasiadalahpengambilaneksplandaribagiantanaman yang akandikulturkan Langkah-langkahnya adalah : • Mengambil 2 helai daun muda anggrek phalaenopsis lalu di cuci dengan air mengalir • Merendam daun tersebut di larutan Benlate (1g/L) selama 30 menit • Membilas daun tersebut dengan air steril • Merendam daun anggrek phalaenopsis dalam larutan Agrimycin (1 g/L) selama 3 menit • Membilas daun tersebut beberapakali dengan air steril • Merendam daun dalam larutan Ca-hipoklorit 1,0% • Masukkan daun yang di rendam kedalam LACF selama 30 menit • Membilas daun dengan air, masing-masing 5 menit • Merendam daun dengan HgCl2 0,2% selama 15 menit • Membilas daun dengan air steril 3 ali, masinh-masing 5 menit • Meletakkan daun di cawan petri • Memotong daun berbentuk segi empat kira-kira 0,5 cm2 • Mengkultur pada medium yang telah disiapkan
3) Multiplikasi • Multiplikasi adalah kegiatan memperbanyak calon tanaman dengan menanam eksplan pada media. • Langkah : • Eksplan dikeluarkan dari botol kultur jaringan lalu dimasukan ke dalam cawan petri. • Eksplan dipotong-potong (split) dengan menggunakan scalpel dan pinset yang sebelumnya telah digarang. • Potongan tadi dimasukan ke dalam media multiplikasi (MS0 + (0,5-2mg/l BAP)).
4) Aklimatisasi Aklimatisasi adalah kegiatan memindahkan eksplan keluar dari ruangan aseptic ke bedeng