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實驗室生物安全衛生

實驗室生物安全衛生. 中華醫事科技大學 謝正悅. 實驗室生物安全衛生. 生物簡介 生物危害特性 傳播途徑 生物危害分級 生物危害預防與控制. 生物簡介. 生物. 動物 : 具運動性 無光合作用. 植物 : 不具運動性 行光合作用. 微生物 : 運動性 ?? 光合作用 ??. 微生物. 病毒 (VIRUS) 細菌 (BACTERIA) 真菌 (FUNGI) 藻類 (ALGAE) 原生動物 (PROTOZOA). 病毒 (Virus). 20-300 nm (1 nm=10 -9 m) 無完整細胞結構 核酸 + 蛋白質外殼

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實驗室生物安全衛生

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Presentation Transcript

  1. 實驗室生物安全衛生 中華醫事科技大學 謝正悅

  2. 實驗室生物安全衛生 • 生物簡介 • 生物危害特性 • 傳播途徑 • 生物危害分級 • 生物危害預防與控制

  3. 生物簡介

  4. 生物 動物: 具運動性 無光合作用 植物: 不具運動性 行光合作用 微生物: 運動性?? 光合作用??

  5. 微生物 • 病毒(VIRUS) • 細菌(BACTERIA) • 真菌(FUNGI) • 藻類(ALGAE) • 原生動物(PROTOZOA)

  6. 病毒(Virus) • 20-300 nm (1 nm=10-9 m) • 無完整細胞結構 • 核酸 + 蛋白質外殼 • 絕對寄生

  7. 細菌(Bacteria) • 細胞結構 • 0.5-1um x 2-5 um (1 um = 10-6 m) • 獨立自主

  8. 真菌(Fungi) • 似植物體 • 缺乏葉綠素 • 本身酵素分解有機物 • 包括：黴菌 (mold)、酵母菌(yeast) 與蕈類(mushrooms) • 多細胞或單細胞結構

  9. 細菌與真菌孢子(spores) • 功能 • 細菌—度過惡劣環境 • Bacillus anthracis • 真菌—繁殖 • 性質—抗性佳

  10. 細菌內毒素 • 革蘭氏陰性細菌能產生內毒素(endotoxins)的有害物質 • 內毒素存在於細胞壁中，為細胞結構的組成物 • 細胞分解時釋放

  11. 由真菌產生的毒性化學物質 賦予一真菌超越其他真菌與細菌之競爭優勢 具細胞毒性；可破壞許多細胞結構如：細胞膜，並干擾重要生命程序如：RNA與 DNA的合成。 真 菌 毒 素(mycotoxins)

  12. 節肢動物 • 疾病傳播方式：叮咬或吸入排泄物 • 常以哺乳類動物為宿主(如：鼠)

  13. 高等植物 花粉熱

  14. 高等動物 • 實驗動物 • 鼠兔貓狗猴等 • 動物咬傷 • 皮屑 • 節肢動物 • 人畜共同傳染病

  15. 生物危害特性

  16. 實驗室危害研究 • 1974丹麥Shinhoj：實驗室人員肝炎發生率為一般人７倍 • 1974英國Harrington&Shainnon ：肺結核為一般人５倍 • 二次傳染：傳染至其他親人或朋友等 • 1973&1978英國 -- ３人感染天花

  17. 生物危害須知 • 接觸的生物、產物、附著物 • 潛在危害 • 暴露的可能途徑 • 正確操作方式 • 預防措施

  18. 生物性危害(Biohazards) • 植物、動物、微生物或是其產物 • 可影響人類健康或是造成不舒適具潛在風險 • 生物性危害： • 感染 • 過敏 • 中毒 • 心理恐慌

  19. 生物性危害 • 感染（Infection）：生物體在人體內繁殖生長所致(如：流行性感冒、痲疹、肺結核) • 過敏（Allergy）：生物體以過敏原角色經重覆暴露致使人體免疫系統過度反應所致(如：過敏性肺炎、氣喘、過敏性鼻炎) • 中毒（Toxicity）：暴露於生物體所產生之毒素（細菌內毒素、細菌外毒素、真菌毒素）所致(如：發燒、發冷、肺功能受損)

  20. 心理的恐慌

  21. 傳播途徑

  22. 生物性物質主要傳播方式 • 血液體液 • 刀械、針器 • 實驗動物咬傷 • 空氣 • 離心、氣懸、攪拌 • 實驗動物噴嚏

  23. 經血液體液傳染之物質特性 • 傷口（含叮咬）、輸血、親密接觸行為 • 暴露事件的可見性 • 傳染源－人、動物、實驗室操作物品 • 如：HIV、HBV

  24. 空氣傳染性物質特性 • 來自感染者的口鼻分泌物(如：咳嗽、噴嚏或講話產生的生物氣膠) • 來自環境（如：水、土壤） • 來自實驗室操作物品 • 以結核桿菌、退伍軍人菌為例 • 傳播範圍廣 • 暴露無可見性

  25. 直接傳播(direct transmission) • 直接接觸 • 如：接吻、性行為、咬傷等方式侵入宿主 • 如：梅毒、AIDS • 飛沫傳播 • 藉噴嚏或咳嗽產生的飛沫侵入宿主口鼻眼內 • 如：流行性感冒等 • 胎盤感染(垂直感染) • 經由胎盤血液進入胎兒體內 • 如：梅毒、B型肝炎、AIDS

  26. 間接傳播(indirect transmission) • 媒介物傳播(vehicle-borne transmission) • 水、食物：經口傳染 • 生物產物(biologic products)：如：輸血 • 非生物之媒介(fomites)：如：衣物、床單、器材等 • 空氣傳播(airborne transmission) • 可在空氣中懸浮較長時間之微粒(aerosol nuclei) • 傳播的疾病如：肺結核

  27. 間接傳播(indirect transmission) • 病媒蟲傳染(vector-borne transmission) • 如：鼠、蒼蠅、蚊蟲等 • 機械性傳播(mechanical transmission) • 病原僅機械性地被帶往傳染部位 • 如：霍亂 • 生物性傳播(biologic vector-borne transmission) • 病原需在病媒體內成長繁殖後才能傳播 • 如：瘧疾、日本腦炎

  28. 生物危害分級

  29. 病原分類 • 病原微生物依其危險性為基礎之分類：國科會「基因重組實驗守則」 • 第一級危險群（Risk group 1 , RG1）微生物：與人類健康成人之疾病無關 • 第二級危險群（Risk group 2 , RG2）微生物：在人類所引起的疾病很少是嚴重的，通常有預防及治療的方法 • http://www.phac-aspc.gc.ca/msds-ftss/

  30. 病原分類 • 病原微生物依其危險性為基礎之分類： • 第三級危險群（Risk group 3 , RG3）微生物：在人類可以引起嚴重或致死的疾病，可能有預防及治療之方法 • 第四級危險群（Risk group 4 , RG4）微生物：在人類可以引起嚴重或致死的疾病，通常無預防及治療之方法 • Biological MSDS： • http://www.phac-aspc.gc.ca/msds-ftss/

  31. 生物危害分級 (NSC) • RG1：生物安全等級一 • (A) 與健康成人之疾病無關 如：E . coli - K12, 未詳列 (B)工作可依照標準微生物操作準則，在開放的 實驗桌上進行。 (C)實驗室無須與其他作業區域分離 (D)實驗室工作人員，必須接受實驗操作的特別 訓練 (E) 由具備微生物訓練的實驗室主管或有相關經 驗者所管理。

  32. 生物危害分級 (NSC) RG2：生物安全等級二 (A)中度潛在危險的病原，病原與人類疾病有 關；很少引致嚴重疾病，且通常有預防及 治療方法如：病毒、批衣菌、細菌、真菌。 (B) (1)實驗室工作人員受過使用致病物質的特 殊訓練並由適當的專家所指導。 (2)工作進行中需管制門禁。 (3)特別小心受污染的尖銳物品。 (4)操作步驟可能產生氣霧或濺灑者，需使 用生物安全櫃或物理性防護設備。

  33. 生物危害分級 (NSC) (續) • RG3：生物安全等級三 • (A)可引致人類嚴重或致死疾病，可能有預防或治 • 療方法如：變性蛋白（Prions）、病毒、立克 • 次體、細菌、真菌、HIV type 1 & 2。 (B)可經氣膠傳播之本土或外來病原，會嚴重危害 健康。如：SARS病毒。　 (C)遵守事項如下頁

  34. 生物危害分級 (NSC) (續) • RG3：生物安全等級三遵守事項 • (A)研究單位、工作人員必須接受處理致病性及致 • 命生物的特別訓練，並由具經驗專家監督管理 • (B)處理感染性物質的過程需在生物安全櫃中進行。 • (C)工作人員穿配保護性衣著與裝置。 • (D)實驗室需經特殊設計(如緩衝區、密封通道、定 • 向氣流等)。 • (E)故需遵守標準微生物操作、特殊操作及安全設 • 備規範才能符合等級三之需要。

  35. 生物危害分級(NSC) (續) • RG4：生物安全等級四 • (A)可引致人類嚴重或致死疾病，通常無 • 預防及治療方法如：病毒 Ebola • virus、Marburg virus (B)經由氣膠傳播或未知傳染危險之危險 生物病原，會引起對生命之高度危機 的疾病。　

  36. 生物危害分級(NSC) (續) • RG4：生物安全等級四遵守事項 • (A)實驗工作人員必須接受極度危險之感染 • 性物質的特別訓練。 • (B)需充分了解標準及特殊操作、設備、實 • 驗室的設計特色。 • (C)並嚴格管制實驗室門禁。 • (D)所有活動皆限於第三級生物安全櫃中。

  37. 生物危害分級(NSC) (續) • RG4：生物安全等級四遵守事項 • (E)可於第二級生物安全櫃中工作人員穿著 • 連身式具支持生命系統通風設備的正壓 • 工作服。 • (F)實驗室具特殊設計可有效防止微生物散 • 佈至環境中。 • (G)實驗室設於不同棟或同棟建築內的管制 • 區域，完全與其他區域隔離。

  38. BSC Class III（本型安全櫃的排氣需連接至建築物的排氣系統） • 手套端的O形環 • (glove ports with • O-ring for attaching • arm-length gloves • to cabinet) • B. 視窗 • C. 排氣HEPA FILTER • D. 供風HEPA FILTER • E. 兩頭型滅菌鍋 • 或傳遞箱(Double • ended autoclave or • pass-through box) • Note: 在安全櫃中 • 化學浸泡槽應被裝置 • 在工作臺面之下。

  39. 有不好的病菌 可能傳染到我 結果會很嚴重 危害的存在 暴露的可能性 暴露的程度 早期診斷與治療能力 生物危害風險評估 擔心與恐慌 健康風險

  40. 危害的存在（Hazards） 接觸暴露劑量（Dose） 強度與時間 防護具與防護設備 暴露風險 危害存在 接觸暴露 健康風險 暴露風險 疾病嚴重程度 個人體質差異 生物危害風險評估

  41. 生物危害預防與控制

  42. 實驗室工作者之責任 • 參加訓練課程 • 風險評估/管理 • 安全之實驗操作 • 若有感染發生，立即通報 • 確保自己在實驗室的安全

  43. 預防與控制一般原則 污染源清除 溫、溼度控制 維持環境清潔與衛生 定期消毒 空氣品質管理 遵守微生物實驗室操作守則 個人衛生的加強(如:勤洗手) 個人防護設備的使用

  44. 生物危害管理方法 • 實驗室操作程序 • 安全設備：操作櫃、密閉式容器、個人防護具 • 實驗室設計 10% 硬體設計與設備 90% 操作 實驗室安全

  45. 實驗室操作程序 • 標準微生物操作程序：所有生物等級 • 其他操作管理要求： • 第二級至第四級 • 高等級涵蓋低等級 • 人員訓練

  46. 實驗進行中的門禁管制 洗手 禁止飲食、抽煙、處理隱形眼鏡、化妝 消毒工作檯面 禁止以口吸取液體 減少噴濺及氣霧的產生 使用耐用、防漏密閉、可滅菌之容器 高溫高壓滅菌處理所有培養物、儲存物及其他具感染廢棄物 以防穿刺、防洩漏、可密封的容器運送尖銳物品與檢體 標準微生物操作

  47. 標準微生物操作程序 • 實驗進行中的門禁管制 • 避免污染實驗產品 • 非該實驗室人員的暴露 • 避免生物物質外洩 實驗進行中

  48. 標準微生物操作程序(續) • 洗手 • 接觸具感染性物質、脫掉手套後、離開實驗室前 • 使用具殺菌效果之洗手乳液

  49. 標準微生物操作程序(續) • 禁止飲食、抽煙、處理隱形眼鏡、化妝 • 可以喝水嗎？ NO • 一般常識 • 最易違反

  50. 標準微生物操作程序(續) • 消毒工作檯面 • 每天至少一次 • 發生生物物質洩漏或噴濺後

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