210 likes | 428 Views
با ياد خالق هستی بخش. Laboratory Reagent Water. Levels of water Purity Method of Purifying Water Storage of water. Levels of water purity. Type I : Enzyme ,Electrolyte determination , preparation of calibrator and reference material
E N D
Laboratory Reagent Water • Levels of water Purity • Method of Purifying Water • Storage of water
Levels of water purity • Type I : Enzyme ,Electrolyte determination , preparation of calibrator and reference material • Type II : General laboratory testing not requiring Type I • Type III: glassware Washing, Qualitative procedure
Method of Purifying Water • Distillation • Deionization • Reverse osmosis
Storage of water • Type I must be used immediately after production • Type IIand Type III: in polyethylene or borosilicate bottle, tightly stoppered
Centrifuge • Horizontal – head or swinging -bucket • Angle head rotor • Axial separation • Ultracentrifuge
Quality control • Speed: Every 3 month +/_ 5% • Timer: Weekly +/_ 10% • Temperature 2 C
نقش اسپکتروفتومتر و فتومتر در انجام آزمایشها خوانش رنگ نهایی در آزمایشها و فراهم نمود ن امکان محاسبه غلظت و فعالیت مواد مورد اندازه گیری متر دتکتور کووت شکاف مونوکروماتور شکاف منبع نوری
عوامل ایجاد خطا در سیستم های فتومتری مهمترین عوامل عبارتند از: • کیفیت نامناسب منبع نوری • کیفیت نامناسب مونوکروماتور ( فیلتر ها، گریتینگ ) • اشکال در آشکار ساز ( دتکتور )
کنترل سیستم های فتومتری مهمترین موارد عبارتند از: • کنترل صحت فتومتری • کنترل صحت طول موج • کنترل خطی بودن • Stray light
صحت فتومتری • در آزمایشهایی که در آنها از استاندارد استفاده نمی شود درستی جذب نوری ضروری است • روشهای ارزیابی • استفاده از فیلترهای شیشه ای استاندارد ( برای کنترل درازمدت ، به شرط کالیبراسیون متناوب، مناسبند ) • استفاده از محلولهای استاندارد ( مثل دی کرومات پتاسیم ، سولفات آمونیم کبالت ، نیترات پتاسیم و.... ) که به سبب تغییر جذب با زمان، دما و pH برای کنترل دراز مدت مناسب نمی باشند .
ارزیابی صحت فتومتری با استفاده از محلول دی کرومات پتاسیم پیش نیاز پودر دی کرومات پتاسیم که یک ساعت در 110 درجه خشک شده باشد ترازوی کالیبره اسید سولفوریک 0.01 نرمال بالن ژوژه کلاس A • از پودر دی کرومات پتاسیم محلولهای 50 و 100 میلی گرم در لیتر در اسید سولفوریک ساخته می شود • جذب نوری محلولها در طول موج 350 نانومتر درمقابل اسید سولفوریک قرائت می گردد • محدوده قابل قبول برای این قرائت به صورت زیرمی باشد: جذب نوری 0.005±0.536 برای محلول 50 میلی گرم درلیتر جذب نوری 0.011±1.071 برای محلول 100 میلی گرم در لیتر به کمک این محلولها می توان از صحت طول موج ، خطی بودن و Stray light نیز اطمینان حاصل کرد .
کنترل صحت طول موج • برای تصدیق طول موج تنظیم شده بکار می رود • دربسیاری از اندازه گیریها طول موج انتخابی باید نزدیک به λmax کروموژن مورد اندازه گیری باشد که بسته به شیب منحنی جذب ممکن است جابجایی در طول موج سبب خطای بزرگی گردد • گریتینک بعلت قابلیت انتخاب طول موجهای پیوسته باید از نظر صحت و تکرارپذیری کنترل شود . • کنترل صحت طول موج بخصوص دراندازه گیری های آنزیمی به روش کینتیک و با استفاده از فاکتوراهمیت دارد • درصورت وجود گریتینک بررسی صحت طول موج باید حداقل در دو طول موج صورت گیرد .
روشهای کنترل صحت طول موج • صحیحترین روش استفاده از لامپ هایی مثل لامپ جیوه، دوتریم یا هیدروژن با خطوط نشری در طول موجهای مشخص می باشد • استفاده از فیلترهای شیشه ای مثل هلمیوم ودیدمیوم که در طول موجهای خاص دارای پیک جذبی هستند • استفاده از محلولهایی مثل سیان مت هموگلوبین که بیشتر برای بررسی تغییرات احتمالی پس از تصدیق به روش اول مناسب است
کنترل خطی بودن • بررسی ارتباط خطی بین میزان نورجذب شده و قرائت دستگاه • خطی بودن پیش نیازی برای حصول صحت در نتایج می باشد • منحنی غیر خطی در مقابل غلظت بیانگر خطا در رقتها یا مشکل در سیستم ( شامل اشکال در دتکتور، Stray light ، یا تغییر در پهنای شکاف است )
روشهای کنترل خطی بودن • استفاده از فیلترهای شیشه ای • استفاده از محلول هایی با رقت های مختلف از موادی که مشخصا از قانون بیر پیروی کنند مثل پارانیتروفنل (nm405) ، سولفات آمونیم کبالت (nm 512 )، سولفات مس (nm 650) و رنگ سبز خوراکی (nm630 ( اشکال این روش شامل احتمال خطا در تهیه رقت و عدم پایداری در صورت تغییر دما و pH است .
Stray light • عبور طول موجهایی خارج از محدوده SBW اسمی از مونوکروماتورو بعبارتی نورهای اضافی را Stray light می گویند . • علت ایجاد آن • شکست و پخش نور درداخل مونو کروماتور که باعث خروج طول موجهای اضافی می گردد. • نشت نور • فلورسانس از خود نمونه • طریقه حذف Stray light • به کمک اجزایی که در خود سیستم بدین منظورتعبیه می شود. • پوشاندن محل قرائت کوت اثر آن در ایجاد خطا در قرائت جذب نوری بخصوص در انتهای بالایی محدوده جذب دستگاه می باشد . Stray light در محدوده ماورا بنفش مشکل بزرگتری محسوب می شود .
روشهای اندازه گیری میزان Stray light • استفاده از فیلترهای cut off • استفاده از محلول هایی مثل سدیم نیتریت با غلظت 50 میلی گرم در لیتر در 385-300 نانومتر یا استن در 320-250 نانومتر که در مقابل آب مقطر عبور نور باید کمتر از 1% باشد