מיקרוביולוגיה

1. מיקרוביולוגיה דר' יהודית שילה

2. תא אאוקריוטי תא פרוקריוטי בעל חיים קרום התא שוטון DNA דופן רשת אנדופלסמתית גרעין גרם + פיליי גרם - Capsule ציטופלסמה קרום פנימי קרום חוצוני ריבוזומים מיטוכונדריה דופן

3. מצויים בעולם מגוון עצום של חיידקים בגדלים שונים שנצבעים בצבעים שונים : מס' דוגמאות

4. מתגים

5. כדוריים "קוקים"

6. מתגים מחוברים לשרשרות

9. גרם חיוביים קרום התא Cytoplasm גרם שליליים פוליסכרידים תעלה קרום חיצוני קרום פנימי Cytoplasm

10. שמרים בהנצה

11. עקום גידול של חיידקים לוג' מס' החיידקים זמן (בד"כ בדקות) .

12. המסלול הליתי של הפאג' 4T פירוק החיידק זיהוי והחדרה גנום של קולי וירוס הכפלה של דנא ויראלי והפעלת ביטוי של חלבוני וירוס "קיבוץ" חלבוני וירוס ביטוי גנים מאוחרים- קופסית, קיבוץ ומעכלי תא מאכסן ביטוי חלבוני וירוס מאוחרים

13. מסלול החיים של רטרו-וירוסים רברס טרנסקריפטאז הנצה דנא מאכסן חלבונים ויראליים שיעתוק רברס-טרנסקריפציה פרו-וירוס אינטגרציה

14. HIV אנטיגנים שכבה שומנית gp40 gp120 חלבוני קופסית אינטגראז פוספטאז

15. פלסמידים ו- DNA גנומי של- E-coli

16. שיבוט באמצעות פלסמידים 1 3 מקטע DNA לשיבוט פלסמיד שילוב בפלסמיד בעזרת אנזימים מגבילים ריבוי חיידקים פלסמיד מהונדס 2 טרנספורמציה- הכנסה לחיידק בנוכחות פנצילין DNA חיידקי תרבית חיידקים שכולם מכילים פלסמיד מהונדס חיידק ללא פלסמיד מת הכפלת הפלסמיד

17. פלסמידים בשימוש הנדסה גנטית נק' תחילת השכפול

18. אתרי חיתוך של אנזימי רסטריקציה - דוגמה

19. זיהוי מקטע DNA ייחודי בעזרת העברת SOUTHERN חיתוך באנזימים נייר פיתוח ג'ל צימוד לDNA או RNA מסומן נייר נייר ג'ל העברת מקטעי DNA לנייר

20. PCR – פולימראז ברצף מקטע ה-דנא לריבוי דנא מטרה הוספת תחילים מתאימים, נוקליאוטידים ופולימראז TAQ III הארכה חוזרת ע"י TAQ I חימום ל-90 להפרדה קירור ל-65 לחיבור חוזר הארכת הרצף ע"י TAQ חימום ל-90 להפרדה קירור ל-65 לחיבור חוזר הכפלה נוספת ע"י TAQ IV II הכפלה נוספת ע"י TAQ חימום ל-90 להפרדה קירור ל-65 לחיבור חוזר וחוזר חלילה

21. שימוש בחיתוכים אנזימתיים לזיהוי פוטנציאל מחלה

22. חקירת מקרה אונס • נלקח דם/דגימת עור מהנפגעת • נלקחים ממצאים מזירת הפשע – דם/שערות/זרע וכו' • נלקחים ממצאים מחשודים – דם/דגימת זרע • מפיקים DNA מכל הממצאים, חותכים באנזימים מגבילים • מריצים לאחר סימון בג'ל אלקטרופורזה ומשווים מי אשם? סמני גודל נפגעת ממצא 1 ממצא 2 סמני גודל חשוד 1 חשוד 2 סמני גודל

24. תחילתה של הנדסה גנטית B.Meclintock גנים קופצים Tn- גורמים לתופעות מוזרות בקלחי תירס זיהוי והבנה ב- 1938 פרס נובל בשנת 1982

25. טרנספורמציה Transformation • שלבים • כניסת ה- DNA • Gram + • Gram - • רקומבינציה • ליגלית - הומולוגיתאו לא הומולוגית • זיהוי הגניםrecA, recB and recC • * משמעות • זיהוי פוטנציאל של הנדסה גנטית

26. טרנסדוקציה – שימוש בפאג'ים • הדבקת ה"תורם" • הכפלת הפאג' תוך פירוק ה- דנא החיידקי • ארגון חלקיקי הפאג' • שחרור הפאג'ים • הדבקת ה"מקבל" • רקומבינציה הומולוגית להחלפת רצף קיים Potentially any donor gene can be transferred כל גן יכול להיות מועבר בשיטה זו

27. F+ F- F+ F- F+ F+ F+ F+ שימוש בהעברה טבעית בחיידקיםקוניוגציה • ארגון ויצירת ה"גשר" הקרומי • העברת הדנא • נקודת ההתחלה • הכפלה בשיטת המעגל המסתובב

28. חוסר לקטוז z y a i p o רפרסור פעיל אין ביטוי גנים בנוכחות לקטוז z y a i p o לא פעיל ביתה-גלקטוזידאז פרמיאז טרנסאצטילאז אופרון הלקטוז • מפעיל - לקטוז • בהיעדר • רפרסור (דכאן) פעיל • אין ביטוי • בנוכחות • עיכוב פעולת הרפרסור • ביוטי הגן • בקרה שלילית

29. אדניל ציקלאז היעדר גלוקוז c-AMP ATP CAP i z y a p o פעיל Inactive ביתה-גלקטוזידאז פרמיאז טרנסאצטילאזe ביטוי מירבי עיכוב קטבולי – נוכחות גלוקוז • c-AMP • חלבון CAP • CAP-cAMP חיבור • הפעלת הפרומוטור • בקרה פסיבית