STERILEZÉS, DEZINFICIÁLÁS

1. STERILEZÉS, DEZINFICIÁLÁS

2. Kórokozók érzékenysége HIV: 10% hypo, 70% etanol vagy i-propanol, 2-4% aldehid, 6% H2O2, mosószeres mosás! HBV: 10% hypo Prion: erősebb autoklávozás (1 óra), 5% hypo, 1M NaOH

3. Baktériumokat károsító hatás • Bakteriosztatikus – nem pusztítja el , csak szaporodásukat gátolja, hatás megszűnte után újból növekedés • Baktericid– elpusztítja a mikróbákat • Baktericid hatású szerek: időegység alatt mikrobák azonos hányadát pusztítja el, tehát az élő baktérium szám exponenciálisan csökken

4. I - STERILEZÉS

5. Csíraszám csökkenése

6. Sterilezés hővel • Nukleinsav, membránkárosító hatás • (Hideghatás – csak bakteriosztatikus hatás) • Nyílt láng – pl kacsanál is • Hőlégsterilezés („száraz hő”) • 160oC 2 óra, vagy 140oC 3 óra • üvegáruhoz • „Nedves hő”- gyorsabb, hatásosabb • Denaturálják a mikrobiális fehérjéket • Legtöbb mesophil nem spórás 60° 30 perc • de S. aureus, S. fecalis 60 perc, • Legtöbb betegséget okozó bakt. és gomba 80° 10perc • de C. botulinium 100° 5,5 óra!!

7. 1. Kifőzés – de max 100°C • Spóra, hepatits nem puszul el • 2. Autokláv (túlnyomás, telített gőz) • nyomás alatti telített vízgőz elősegíti a hő bejutását a sterilezendő anyagba • nyomás növelésével emelkedik a hőmérséklet is • +1 Atm  121 oC, 20-30 percig ( bár 10 perc alatt hatásos) • + 2 Atm - 134 °C • steril próba: • színváltó csíkkal • bakt. spórával (=B. stearothermophilus)

8. Autokláv - ipari méretek

9. Autokláv - labor méretek Autokláv fogászati eszközökhöz

10. Az autokláv működése - 1

11. Az autokláv működése -2

12. Az autoklávozás szakaszai

13. Sterilezés egyéb lehetőségei • Szűrés • pirogén anyagok (LPS) eltávolítása hővel sterilezett folyadékokból nem hővel sterilezhetők csíramentesítése, ill levegő HEPA szűrővel • Nitrocellulóz szűrőn, (mikr. adszorpciója) szita hatás • Tulnyomáson , megfelelő pórusmérettel akár vírusok is! • Besugárzás • UV– citozin : hidratáció, timin uracil :dimerizáció • Germicid lámpák, inkább boxokban, kisebb munkaterületekre (sötét terület) • Y – nagy áthatoló képességű, szabad (hidroxilion) gyökök keletkeznek- replikáció gátlódik. Egyszer használatos eszközök : injekciós tű, fecskendő • Gázzal - β-propiolakton alkiláló hatás: protein és ns károsító • Műanyagok sterilezése, de szellőztetni kell

14. Plazmasterilezés • Elektromos vagy mágneses erőtérrel a H2O2 plazmaállapotba kerül, szabadgyökök kölcsönhatásba lépnek a mikroorganizmussal. • Végén O2 ill víz lesz belőle • Hőre és nedvességre érzékeny anyagok • Vírus, spóra, bakt. • Mechanikus hatások • Többször 10mPa, de csak elmélet, ill ultrahang is, fagyasztás olvasztás többször…

15. Szűrés

16. Membránszűrés (tápfolyadékok)

17. Besugárzás

18. Gázsterilezés

19. II - CSÍRASZÁM ÁTMENETI CSÖKKENTÉSE

20. Hőkezeléssel • Pasztőrözés: 65oC 30 perc, vagy 85oC 5 perc (tej) de TBC kórokozó túléli • Tyndallozás (frakcionált hőkezelés): 85oC 30 percig – 37oC egy éjszakáig (3x) - spórákból vegetatív alakok lesznek

21. Fertőtlenítőszerekkel • Bőrfertőtlenítés(=antisepticumok) • Bőr élő mikróbáinak számát csökkentjük. Szőrtüszőkből újra kolonizálódik. • Élettelen felszín fertőtlenítése(=dezinficiálás) • Hatáserősség • függ: koncentráció, behatási idő, pH • fenoléhoz hasonlítják (=fenol-koefficiens) • természetes anyagok (vér, genny, stb.) inaktiválhatják, közömbösíthetik a fertőtlenítőszer hatását !Fontos h minél kisebb koncentrációban gátolja a mikr. és ne legyen toxikus, bomlékony, hatása sokáig tartson

22. 1:100 1:50 1:60 1:200 1:70 1:300 1:80 1:400 1:500 1:90 1:600 1:100 Fenolkoefficiens meghatározása Baktérium Fenol Baktérium X

23. fenol fenol 1:70 1:80 1:90 1:60 1:70 1:80 1:90 1:60 1:50 1:100 1:50 1:100 1:100 1:100 1:600 1:600 1:300 1:400 1:500 1:200 1:200 1:300 1:400 1:500 X X Kioltás 5 és 10 perc inkubáció után 5 perc 10 perc

24. fenol fenol 1:70 1:80 1:90 1:60 1:70 1:80 1:90 1:60 1:50 1:100 1:50 1:100 1:100 1:100 1:600 1:600 1:300 1:400 1:500 1:200 1:300 1:400 1:500 1:200 X X Leolvasás 24 óra múlva 5 perc 10 perc Értékelés: 200/70 = 2,85

25. FertőtlenítőszerekSejtmembrán károsítása • detergensek– felületaktív anyagok (anionos, kationos) támadáspont a bakt. membránja • alkoholok(70%-os ethanol, i-propanol) • dezorganizálják a lipid struktúrát, fehérje denat. és vízelvonó hatás • Spórák és gombák ellen kevéssé hatásosak • fenoltartalmú szerek(fenol, klórhexidin) • membránhoz kötött oxidázokat és dehidrogenázokat inaktiválja

26. FertőtlenítőszerekDenaturálószerek • Erős ásványi savak(HCl, H2SO4) • Szerves savak(ecetsav, citromsav, tejsav) • Élelmiszeriparban gyakran használják tartósításra • Nehézfémsók: (enzimek működését gátlók) • Ezüst-sók (Ag-acetát szemcsepp újszülötteknék, N. gonorrhoeae okozta blenorrhoea kialakulása ellen) • Hg-sók (főleg szerves) • As-vegyületek

27. FertőtlenítőszerekOxidálószerek • Szabad SH- csoportokat oxidálják • Halogének(jód, klór - hipo) • H2O2, KMnO4 • Festékek(bőrecsetelésre) • Anilin festékek: brillantzöld, malachitzöld, kristályibolya!! – szelektív táptalajokba is keverik biz. baktériumok gátlására

28. FertőtlenítőszerekAlkiláló ágensek • Fehérjék alkilezése • formaldehid (formalin), glutáraldehid

29. Dezinficiensek lehetséges támadáspontjai

30. Dezinficiensek hatása a baktériumokra

31. III - KONZERVÁLÁS

32. Élelmiszerek • Konzervek – autoklávban sterilizálják • lekvár, savanyúság • 1-3% NaCl, 40% > cukor, benzoesav, szalicil

33. Gyógyszeriparban • injekció, orrcsepp, szemcsepp • benzoesav, fenolszármazékok • besugárzás

34. Steril gyógyszerkészítmények ellenőrzése • anaerob táptalaj (tioglikolát vagy Holman) • gomba táptalaj

35. Reakció LPS Proenzim Koaguláz Koagulogén Koagulin „Limulus amebocyte lysate” (LAL) teszt • Cél • –endotoxin kimutatás injekciós készítményekből elsősorban ill egyéb gyógyszeralapanyagokból • Biológiai háttér • – a patkórák,Limulus polyphemus vére endotoxin hatására megalvad • – az alvadásért felelős enzim a vér amoebocytáinak granulumaiban található lizátum: enzim Detektálás – koagulin (alvadék) – turbidimetria

36. Pozitív reakció: ha az inkubálási idő letelte után a csövet megfordítva a gél állagú anyag megtartja formáját. • Minden más esetben negatív

37. Mikrobiális korrózió BIOFILM !!!