370 likes | 693 Views
Určování nejběžnějších sladkovodních melosiroidních rozsivek. Václav Houk Botanický ústav AV ČR Třeboň. Materiál:. nezkoncentrovaný vzorek vody vzorek zkoncentrovaný planktonní sítí vzorek dnového sedimentu. Konzervace vzorku. formaldehydem - výsledná koncentrace asi 1.5%
E N D
Určování nejběžnějších sladkovodních melosiroidních rozsivek Václav Houk Botanický ústav AV ČR Třeboň
Materiál: • nezkoncentrovaný vzorek vody • vzorek zkoncentrovaný planktonní sítí • vzorek dnového sedimentu
Konzervace vzorku • formaldehydem - výsledná koncentrace asi 1.5% • zmineralizovaný vzorek – etylalkoholem - výsledná koncentrace minimálně 50% • Lugolův roztok - není vhodný, po delší době skladování se schránky rozsivek rozpouští
Koncentrace vzorku: • centrifugací – v centrifugačních zkumavkách • sedimentací – např. v odměrném válci, kádince a pod.
Mineralizace vzorku: Koncentrovaným roztokem H2O2 (asi 34 %) • oxidace přímo na krycím sklíčku u čistého planktonu • oxidace v centrifugační zkumavce 1/3 vzorku + 2/3 konc. peroxidu vodíku, příp. ještě několik krystalků K2Cr2O7
Vyčištění vzorku: • vypíráním v centrifugační zkumavce - 4x až 5x destilovanou vodou • dekantací
Zpracování vzorku: • pro kvalitativní účely (v LM) - zhotovení trvalého preparátu - identifikace • pro kvantitativní účely (v LM) - celkový počet jedinců centrických rozsivek např. v Cyrusově komůrce - poté přepočet na jednotlivé druhy z poměrného zastoupení v trvalém preparátu
Zhotovení trvalého preparátu: • na krycí sklo kapka materiálu • nechat zaschnout (při laboratorní teplotěi několik hodin) • na podložní sklo dát několik kapek média (Naphrax nebo Pleurax) • na médiumpoložit krycí sklíčko s materiálem • ev. zahřát preparát
Pozorování vzorku v mikroskopu: • použití suchého nebo imerzního objektivu • seřízení světla dle Köhlerova principu
KLASIFIKACE(podle Round et al.) • COSCINODISCOPHYCEAE • MELOSIRALES • Melosiraceae: Melosira AGARDH 1824 • ORTHOSEIRALES • Orthoseiraceae: *Orthoseira THWAITES 1848 • PARALIALES • Paraliaceae: Ellerbeckia CRAWFORD 1988 • AULACOSEIRALES • Aulacoseiraceae: Aulacoseira THWAITES 1848
Základní určování: • stavba schránky • životní cyklus
Životní cyklus: gamety (haploidní) auxospora tzv. initial cell vegetativní buňky (diploidní) podle Round et al. 1996
Frustule (schránka) • frustule – křemičitá buněčná stěna rozsivek skládající se ze dvou protilehlých thék, každá tvořená z valvy a cingula • cingulum – část bočního pásu spojeného s jednou valvou, skládající se z jednotlivých pásků (copulae) • copula – element cingula • boční pás – část frustule spojující epivalvu a hypovalvu, skládající se z epicingula a hypocingula • collar (collum) – bezstrukturní distální část pláště misky (valve mantle) druhů Aulacosira
Vysvětlení některých termínů důležitých při determinaci: • areola– většinou pravidelněopakovaná perforace křemité buněčné stěny • carinoportulae – zvláštní krátké tubulární výběžky ve středu misky, pravděpodobně sloužící jako spojovací elementy u Melosira roeseana a příbuznýchdruhů
Stavba schránky 2: • initial cell – buňka vytvořená z auxospory, často mající sférický nebo čočkovitý tvar frustule, lišící se od tvaru následných vegetativních buněk • trvalá spóra (resting spore) – specializovaná buňka vytvořená symetrickým nebo nesymetrickým buněčným dělením nebo cytokinetickou mitózou, lišící se strukturálně od vegetativní buňky vytvořením silně silicifikované buněčné stěny
Initial cell první vegetativní buňka (initial cell)/ první vegetativní miska (initial valve)
Frustule C • spojovací trny (linking spines) – většinou špachtlovité trny při obvodu čela misky, někdy komplexnějšího tvaru, nebo větvící se v distální části; jsou vzájemně do sebe zapadající, čímž pevně spojují sousední (adjoining,sibling) valvy v řetězci • oddělovací trny (separating spines) – kuželovité trny při obvodu čela misky; sousedící valvy s oddělovacími trny se snadněji vzájemně oddělují • levotočivý (sinistrorse) – točící se proti směru chodu hodinových ručiček • pravotočivý (dextrorse) – točící se po směru chodu hodinových ručiček • kruhová lišta (ringleist) – kruhovitý výstupek buněčné stěny (pseudoseptum) vybíhající dovnitř frustule na proximálním konci krčku (collar) – u druhů Aulacoseira
oddělovací trny (separating spines) spojovací trny (linking spines) Trny a řady areol paralelní levotočivý (sinistrorse) pravotočivý (dextrorse)
rimoportula(labiate process) – tubulární průchod skrz buněčnou stěnu; vně valvy je jen prostý otvor, otvor uvnitř valvy je často charakteristicky zpevněný
KEY TO GENERA 1 Frustules with high valve mantles, often with distinctly structured girdle bands, usually firmly linked with valve faces into long chains, sometimes into pairs of cells only; cells observable mostly in girdle view only ………………………………........2 2a Girdles usually distinct, composed of several bands (copulae), with ±striking areolation,valve faces with radial rows of areolae and 2-4 (sometimes more) coarse pori (carinoportulae) in the valve centre; valves of one frustule connected by means of the girdle, so the valve mantles of one frustule remote ………………………………………..…….. Orthoseira roeseanaand related taxa b Girdles without distinct areolae ………………………………………… 3 3a Valve faces with radially arranged costae, without areolation; cells low with a robust cell wall, valve mantles with very fine, regular areolation ………………….. Ellerbeckia b Valve faces structured differently ……………………………………….4 4a Valves with a ring of ±pronounced spines on the valve face circumference, at the distal end of the valve mantle more or less isolated structureless collar; valve mantles with mostly distinct, ±regularly arranged rows of areolae; exceptionally with one or two transverse rows of areolae at the valve face/valve mantle interface ……..Aulacoseira b Valves without a ring of spines, structureless collar at the distal end of the valve mantle is missing …………………………………………………………………Melosira
Melosira varians C. AGARDH litorál, perifyton
Orthoseira roeseana (RABENHORST) O´MEARA výskyt hlavně na vlhkých stanovištích – např. smáčené skály v povrchových vodách allochtonně
Ellerbeckia arenaria (MOORE) CRAWFORD výskyt hlavně na vlhkých stanovištích – smáčené skály, mechy; v povrchových vodách allochtonně
Základní určovací literatura Krammer, K. & Lange‑Bertalot, H. (1986): Bacillariophyceae,1. Teil: Naviculaceae. In: Ettl, H. et al.(eds.): Die Süsswasserflora von Mitteleuropa, 2/1: 1‑807. ‑ Gustav Fischer Verlag, Stuttgart. Krammer, K. & Lange‑Bertalot, H. (1991): Bacillariophyceae, 3. Teil: Centrales, Fragilariaceae, Eunotiaceae. In: Ettl, H. et al.(eds.): Die Süsswasserflora von Mitteleuropa, 2/3: 1‑576. ‑ Gustav Fischer Verlag, Stuttgart. Cox, E. J. (1996): Identification of Freshwater Diatoms from Live Material: 1-158. – Chapman & Hall, London. Hustedt, F. (1927-1930): Die Kieselalgen Deutschlands, Österreichs und der Schweiz. - Rabenhorst's Kryptogamenflora, 7(1): 1-920. Leipzig. Cleve-Euler, A. (1951). Die Diatomeen von Schweden und Finland. Kungliga Svenska vetenskapsakademiens hanndlingar, 4th Ser., 2(1), 1-163. Grunow, A. (1882) in Van Heurck (1880-1885). Synopsis des Diatomées de Belgique. 120 pp. Atlas. Anvers. Schmidt, A. et al. (1874-1959): Atlas der Diatomaceen-kunde. Heft 1-120, Tafeln 1-460 (Tafeln 1-216 A. Schmidt; 213-216 M. Schmidt; 217-240 F. Fricke; 241-244 H. Heiden; 245, 246 O. Müller; 247-256 F. Fricke; 257-264 H. Heiden; 265-268 F. Fricke; 269-472 F. Hustedt) Aschersleben-Leipzig.
Další literatura Anonymous, (1975). Proposal for standardization of diatom terminology and diagnoses.- Nova Hedwigia, Beiheft 52, 323-354. Theriot, E. & Serieyssol, K. (1994): Phylogenetic systematics as a guide to understanding features and potential morphological characters of the centric diatom family Thalssiosiraceae. Diatom Research 9 (2), 429-450. Round, F. E., Crawford, R. M. & Mann, D. G. (1990). The Diatoms. Biology and morphology of the genera. 747 pp. Cambridge University Press, Cambridge. Round, F. E. (1996). What characters define diatom genera, species and infraspecific taxa? Diatom Research, 11: 203-218. Lange-Bertalot, H. (1998): As a practical limnologist, how does one deal with the flood of new diatom names?. Limnologica 28 (2), 153-156. Ross, R. (1993): Nomenclature for diatomists. Diatom Research 8 (2), 429-438.
This work was supported by the institutional long-term research plan No. AV0Z60050516, funded by the Academy of Sciences of the Czech Republic and by the grant project of the Czech Science Foundation No. 205/05/0204. Děkuji za pozornost!