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NaT-Working Projekt Biologie

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Presentation Transcript

    1. NaT-Working Projekt Biologie

    6. Überblick über die Versuche Versuche an den Schullaboren Erstellen eines genetischen Fingerabdrucks von Bakterien Proteinfingerabdruck Versuche an der Uni Freiburg Genetischer Fingerabdruck beim Menschen Western-Blot

    7. Erstellen eines genetischen Fingerabdrucks

    8. Mord unter dem Mikroskop! Das Bakterium XY wurde auf dem Heimweg von der Disko hinterrücks überfallen und aufgelöst. Am Tatort wurden Spuren eines fremden Bakteriums gefunden. 4 einschlägig bekannte Bakterien sind verdächtig: Bakterium A, B, C und D. Man vergleicht ihre DNA mit den DNA-Spuren am Tatort.

    9. Theorie des genetischen Fingerabdrucks Die DNA einer Art ist zwar ähnlich, weist aber viele, für ein einzelnes Individuum charakteristische Sequenzen auf. Durch den Vergleich dieser Stellen können in forensischen Laboren Täter identifiziert oder auch die Vaterschaft eines Mannes untersucht werden.

    10. Ablauf des genetischen Fingerabdrucks Man vergleicht vier verschiedenen Bakterien-Plasmide mit der am Tatort gefundenen DNA: Isolierung von vier verschiedenen Plasmiden (Universität Freiburg, Dr. Brix / Dr. Meisinger) Zerschneiden der Plasmid-Ringe durch Restriktionsenzyme Vorbereiten und Gießen des Agarose-Gels Beladen der Gele Elektrophorese Anfärben der Banden Auswertung

    11. Schritt 1: Isolierung der Plasmid-DNA Vier verschiedene Plasmide werden isoliert. Ein weiteres Plasmid stammt vom Tatort und wird mit den vier Verdächtigen verglichen. For the DNA Fingerprint, first of all you have got to extract the DNA, in our experiment we use plasmids out of bactirias. The Extraction is only done in switzerland, in germany the students get already extracted plasmids. For the DNA Fingerprint, first of all you have got to extract the DNA, in our experiment we use plasmids out of bactirias. The Extraction is only done in switzerland, in germany the students get already extracted plasmids.

    12. In the next step the students have to prepare the DNA-digestion. On the heatblock every plasmid DNA probe will be digested by two restriction enzymes (BamHI and Hind III into two fragments.In the next step the students have to prepare the DNA-digestion. On the heatblock every plasmid DNA probe will be digested by two restriction enzymes (BamHI and Hind III into two fragments.

    13. Schritt 3: Präparation des Agarosegels After that the Students have to prepare the agarose gels by themself, for this they mix agarose and puffer together and cook it in a micorwave After that they fill it into the gel phoresis chambre And fix the combAfter that the Students have to prepare the agarose gels by themself, for this they mix agarose and puffer together and cook it in a micorwave After that they fill it into the gel phoresis chambre And fix the comb

    14. This animated gif shows the degistion of the plasmidsThis animated gif shows the degistion of the plasmids

    15. Schritt 4: Beladung der Gele In the next step they load the gel with the DNA probes A-D and TIn the next step they load the gel with the DNA probes A-D and T

    16. Schritt 5: Gelelektrophorese Then the electrophoresis is startet and the fragments will be seperated. The short fragments will move faster then the longer one.Then the electrophoresis is startet and the fragments will be seperated. The short fragments will move faster then the longer one.

    17. Schritt 6: Färbung und Entfärbung der DNA When the electrophoresis is over the students have to staine and destaine the DNA for further investigationsWhen the electrophoresis is over the students have to staine and destaine the DNA for further investigations

    18. Schritt 7: Auswertung Vergleich der Bandenmuster der Proben A bis D mit dem Bandenmuster T des Mörders. Wer ist der Mörder? Form the comparison of the bands A to D with the bands of T the students are able to find out wich suspect is the murdererForm the comparison of the bands A to D with the bands of T the students are able to find out wich suspect is the murderer

    19. Wer ist der Vater? Zeuger-RätselZeuger-Rätsel

    20. Protein-Fingerabdruck Hier werden verschiedene Fleisch- und Fischproben miteinander verglichen und Wurstproben analysiert: Zusammensetzung von gemischter bzw. Putenlyoner Rückschlüsse auf die Verwandtschaft unter Fischen, Vögeln oder Säugetieren

    21. Ablauf des Proteinfingerabdrucks Die verschiedenen im Muskelfleisch enthaltenen Proteine werden nach Molekulargewicht;getrennt: Hitzedenaturierung der Proteine Negatives Aufladen Herstellung und Gießen des Gels Probenauftrag Elektrophorese Färbung, Entfärbung Auswertung

    37. Genetischer Fingerabdruck eines Menschen

    38. Was ist ein Western-Blot? Ein Verfahren zum Transfer von Proteinen auf eine Membran zum Sichtbarmachen und Identifizieren einzelner Proteine.

    39. Und so sieht ein Western-Blot aus

    40. NaT-Working Projekt Biologie

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