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NaT-Working Biologiew.nat-working-biologie.deEine Kooperation zwischen demInstitut f
E N D
1. NaT-Working Projekt Biologie
6. Überblick über die Versuche Versuche an den Schullaboren
Erstellen eines genetischen Fingerabdrucks von Bakterien
Proteinfingerabdruck
Versuche an der Uni Freiburg
Genetischer Fingerabdruck beim Menschen
Western-Blot
7. Erstellen eines genetischen Fingerabdrucks
8. Mord unter dem Mikroskop! Das Bakterium XY wurde auf dem Heimweg von der Disko hinterrücks überfallen und aufgelöst.
Am Tatort wurden Spuren eines fremden Bakteriums gefunden.
4 einschlägig bekannte Bakterien sind verdächtig: Bakterium A, B, C und D.
Man vergleicht ihre DNA mit den DNA-Spuren am Tatort.
9. Theorie des genetischen Fingerabdrucks Die DNA einer Art ist zwar ähnlich, weist aber viele, für ein einzelnes Individuum charakteristische Sequenzen auf.
Durch den Vergleich dieser Stellen können in forensischen Laboren Täter identifiziert oder auch die Vaterschaft eines Mannes untersucht werden.
10. Ablauf des genetischen Fingerabdrucks Man vergleicht vier verschiedenen Bakterien-Plasmide mit der am Tatort gefundenen DNA:
Isolierung von vier verschiedenen Plasmiden (Universität Freiburg, Dr. Brix / Dr. Meisinger)
Zerschneiden der Plasmid-Ringe durch Restriktionsenzyme
Vorbereiten und Gießen des Agarose-Gels
Beladen der Gele
Elektrophorese
Anfärben der Banden
Auswertung
11. Schritt 1: Isolierung der Plasmid-DNA Vier verschiedene Plasmide werden isoliert.
Ein weiteres Plasmid stammt vom Tatort und wird mit den vier Verdächtigen verglichen. For the DNA Fingerprint, first of all you have got to extract the DNA, in our experiment we use plasmids out of bactirias.
The Extraction is only done in switzerland, in germany the students get already extracted plasmids.
For the DNA Fingerprint, first of all you have got to extract the DNA, in our experiment we use plasmids out of bactirias.
The Extraction is only done in switzerland, in germany the students get already extracted plasmids.
12. In the next step the students have to prepare the DNA-digestion. On the heatblock every plasmid DNA probe will be digested by two restriction enzymes (BamHI and Hind III into two fragments.In the next step the students have to prepare the DNA-digestion. On the heatblock every plasmid DNA probe will be digested by two restriction enzymes (BamHI and Hind III into two fragments.
13. Schritt 3:Präparation des Agarosegels After that the Students have to prepare the agarose gels by themself, for this they mix agarose and puffer together and cook it in a micorwave
After that they fill it into the gel phoresis chambre And fix the combAfter that the Students have to prepare the agarose gels by themself, for this they mix agarose and puffer together and cook it in a micorwave
After that they fill it into the gel phoresis chambre And fix the comb
14. This animated gif shows the degistion of the plasmidsThis animated gif shows the degistion of the plasmids
15. Schritt 4: Beladung der Gele In the next step they load the gel with the DNA probes A-D and TIn the next step they load the gel with the DNA probes A-D and T
16. Schritt 5:Gelelektrophorese Then the electrophoresis is startet and the fragments will be seperated. The short fragments will move faster then the longer one.Then the electrophoresis is startet and the fragments will be seperated. The short fragments will move faster then the longer one.
17. Schritt 6:Färbung und Entfärbung der DNA When the electrophoresis is over the students have to staine and destaine the DNA for further investigationsWhen the electrophoresis is over the students have to staine and destaine the DNA for further investigations
18. Schritt 7: Auswertung Vergleich der Bandenmuster der Proben A bis D mit dem Bandenmuster T des Mörders. Wer ist der Mörder? Form the comparison of the bands A to D with the bands of T the students are able to find out wich suspect is the murdererForm the comparison of the bands A to D with the bands of T the students are able to find out wich suspect is the murderer
19. Wer ist der Vater? Zeuger-RätselZeuger-Rätsel
20. Protein-Fingerabdruck Hier werden verschiedene Fleisch- und Fischproben miteinander verglichen und Wurstproben analysiert:
Zusammensetzung von gemischter bzw. Putenlyoner
Rückschlüsse auf die Verwandtschaft unter Fischen, Vögeln oder Säugetieren
21. Ablauf des Proteinfingerabdrucks Die verschiedenen im Muskelfleisch enthaltenen Proteine werden nach Molekulargewicht;getrennt:
Hitzedenaturierung der Proteine
Negatives Aufladen
Herstellung und Gießen des Gels
Probenauftrag
Elektrophorese
Färbung, Entfärbung
Auswertung
37. Genetischer Fingerabdruck einesMenschen
38. Was ist ein Western-Blot? Ein Verfahren zum Transfer von Proteinen auf eine Membran zum Sichtbarmachen und Identifizieren einzelner Proteine.
39. Und so sieht ein Western-Blot aus
40. NaT-Working Projekt Biologie