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Contrôle de qualité des tests de sensibilité antimicrobienne. Tests de sensibilité antimicrobienne. fournissent des informations pour sélectionner l’antibiothérapie appropriée. 2. Méthodes d’interprétation. méthode des disques
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Contrôle de qualité des tests de sensibilité antimicrobienne
Tests de sensibilité antimicrobienne fournissent des informationspour sélectionner l’antibiothérapie appropriée QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 2
Méthodes d’interprétation • méthode des disques fournit des résultats qualitatifs interprétables : sensibles, intermédiaires et résistants • microdilution et diffusion en agar fournissent un résultat quantitatif, une concentration minimum inhibitrice QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8
Méthodes Les tests de sensibilité déterminent si la bactérie peut être inhibée par un antibiotique. La susceptibilité est basée sur la concentration requise pour réduire la pousse sous le niveau visible (voir CIM) Tubes avec milieu de culture, bactéries, et des quantité croissante d’antibiotique Dilution de milieu de culture Test de susceptibilité Concentration Inhibitrice Minimum Boîte d’agar avec un tapis de pousse bactérienne Note: En mesurant la taille de la zone, on peut calculer la CIM. Plus la zone est petite, plus la CIM est élevée Sensible Une bactérie est dite sensible à un antibiotique si la pousse est inhibée par une concentration qui est FACILEMENT et en toute SECURITE obtenue dans la circulation sanguine du patient. Une réponse clinique positive pour le patient est anticipée. Résistante L’opposé de sensible. Taille de la zone CIM Zone d’inhibition de la pousse bactérienne Disque imprégné d’antibiotique Diffusion de disque Test de susceptibilité Taille de la zone QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8
Références • Clinical and Laboratory Standards Institute • Société française de microbiologie • British Society for Antimicrobial Chemotherapy QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 5
Exemple d’un extrait de référence :sélection du médicament à tester QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 6
quand des erreurs surviennent dans le test de susceptibilité milieux antibiotiques inoculum incubation équipement interprétation QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 7
Méthode des disques Milieu Mueller Hinton 4 mm épaisseur pH 7.2 to 7.4 Disques stockage antibiotiques température -20oC mini Inoculum McFarland 0.5 (108 bacteria/mL) Incubateur température 35oC QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 8
Souches de collection E. coli ATCC 25922 S. aureus ATCC 25923 P. aeruginosa ATCC 27853 Les souches de CQ doivent provenir d‘organisations réputées Utiliser des souches spécifiques pour tester différentes combinaisons de médicaments QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 9
Sélection d’une colonie à tester QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 10
MacFarland 0.5 Ajuster la suspension bactérienne QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 11
Utiliser des distributeurs de disques Avantages pratiques, rapides augmentent la reproductibilité Risques: contamination diminuent les capacités personnelles de jugement QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 12
Problèmes avec les disques Disques correctement alignés et espacés Disques correctement alignés et espacés Inoculum trop important QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 13
Problèmes avec les disques Disques correctement alignés et espacés Zones non régulière car le disque n’a pas été appliqué correctement QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8
Mesurer Règle Pied à coulisse • Lecture avec une lumière suffisante et à l’arrière dela boîte • La zone lue est spécifique à un médicament • Une loupe peut aider • Les millimètres comptent QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 15
Etest – méthode par gradient de concentration QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8 16
Les résultats peuvent être incorrects si : • l’organisme n’a pas été bien identifié • erreur de transcription • choix inapproprié d’antibiotiques • l’échantillon testé du patient n’était pas le bon • l’analyse demandée n’était pas la bonne • l’échantillon n’a pas été conservé correctement QC test de susceptibilité antimicrobienne - Module 8