临床微生物质量改进及检测结果解释

1. 临床微生物质量改进及检测结果解释 泰安市中心医院检验科 姜梅杰

2. 内 容 1 2 临床标本直接涂片检查的价值 临床标本的正确采集 3 病原菌耐药检测及监测 4 检测结果的解释

3. 临床标本直接涂片检查的价值

5. 痰涂片革兰染色，报告？

7. 痰涂片染色镜检 注意细胞 内的细菌 和痰培养 结果

9. 肺组织活检 A:氟康唑 B:伏立康唑 C:伊曲康唑 D:卡泊分净 E:两性霉素B

10. 抗酸染色

11. 弱抗酸燃色——奴卡菌、放线菌

12. 肺毛霉菌

13. 曲霉

14. 35.38h血培养(+)涂片 A:氟康唑 B:伊曲康唑 C:伏立康唑 D:两性霉素 E:卡泊芬净

15. A:阿米卡星 B:头孢他啶 C:头孢曲松 D:亚胺培南 E:头孢呋辛

16. 血培养中检出座疮丙酸杆菌 瑞氏染色 革兰染色

17. 各种临床标本的正确采集

18. 标本的正确采集是检出病原菌的前提 • 标本采样至关重要

19. 各种临床标本的正确采集 痰培养标本 采集与运送

20. 咳痰途经口咽部 唾液中口咽部定植菌的浓度可达108-109/ml。 研究显示，国内常规痰标本中约半数存在唾液严重污染现象。 不可避免地受到污染

21. 咳痰标本的采集 标本采集方法 医师或护士直视下采集标本。 病人先漱口，去除表面的菌群。 教育病人深咳，收集从下呼吸道咳出的痰液。

23. 痰培养的送检次数 对于普通细菌性肺炎，痰标本送检每天1次，连续2～3天。不建议24h内多次采集，除非痰液外观性状出现改变； 怀疑分枝杆菌感染者，应连续收集3天清晨痰液送检；

24. 痰培养 • 方法的局限性：多数引起肺炎的病原菌不能培养，如病毒，军团菌，衣原体等 • 影响因素很多：如黏液包裹、定植菌污染 • 建议：细菌培养同时做血培养和痰涂片镜检 痰和支气管吸取物: 对优势的菌进行细菌鉴定和药敏 无论量大下，都要鉴定霉菌、分枝杆菌和奴卡菌、隐球菌等

25. 手术切口与软组织感染标本 采集与运送

26. 皮肤组织标本 对大多数开放脓肿、伤口，采集前应先去除表面菌群。 干燥、结痂伤口一般不做培养。 闭合脓肿应取渗出物和脓肿壁标本。 代表性的标本应采自病灶活动区域或基底部,而不仅仅是脓液。

27. 明明送检的是一包脓液，可培养的结果却是“无细菌生长” ？ • 在标本采集前已经使用了抗生素 • 只做了需氧非苛养菌培养。 而对于厌氧菌以及一些对氧有特殊要求的细菌都不能培养出来。 • 标本采集后不及时送检或细菌室接种不及时，造成细菌的死亡。 脓液组成物是坏死的白细胞和溶解的细菌、组织碎片，自然没有活细菌生长。 建议除抽吸脓液送检外，再送检坏死和新鲜交界处的组织，取基底部或边缘部采样送检. 这里有血供，细菌营养好，有活力，培养阳性率高。

28. 各种临床标本的正确采集 血培养标本

29. 推荐从外周静脉采集血液标本。 不推荐动脉血，因其诊断价值没有比静脉血更大。 不推荐静脉留置导管，因其常伴有高污染率。如果必须从留置导管内采血，也应同时从外周静脉采集另外一个血培养标本以帮助阳性结果的判读提供解释。 各种临床标本的正确采集 血标本采集的注意事项——采集部位

30. 各种临床标本的正确采集 血标本采集的注意事项——采集方法 在采血之前，血培养瓶用70%酒精消毒并干燥。然后再进行穿刺部位的皮肤消毒。 严格按照“酒精、含碘消毒剂、酒精”的消毒步骤瓶的橡皮塞需使用操作，并等待足够的消毒时间。 严格无菌操作，不允许在皮肤消毒后用手接触静脉，除非带有无菌手套。

31. 各种临床标本的正确采集 血培养的采集次数 成年患者：推荐同时采集２－３套（不同部位）血培养标本（即双瓶双臂同时采集血培养标本）。 婴幼儿患者：推荐同时采集２次（不同部位）血培养标本。

32. 各种临床标本的正确采集 • 血培养做1套的检出率为65%。 • 做2套和3套检出率的检出率分别为80%和90%。 • 单瓶的血培养检出率不高，而且结果很难临床解释。 2-5天内不必重复取血 • 只有可疑为持续性菌血症：如心内膜炎，才要有间隔地(1h至24h)几次取血监测、捕捉、指导治疗；特别是金葡菌时。

33. 为什么必须同时做厌氧细菌 16 %链球菌 17 %肠杆菌科细菌 仅厌氧瓶报告阳性

34. 各种临床标本的正确采集 • 血标本采集的量是影响检出率的最重要的因素。检出率与采血量成比例增长，每增加1ml的血液，病原菌的检出率就会相应增加。儿童患者因为血液中病原菌浓度较高，血培养量无需等同于成人。采用一对（需氧瓶+厌氧瓶）组合，比采用二个需氧瓶的组合可检出更多的葡萄球菌、肠杆菌科细菌和厌氧菌。 采血量不能满足推荐的采血量时，应首先满足需氧瓶的需要。绿脓杆菌、窄食单胞菌只长在需氧瓶内。

35. 表皮葡萄球菌临床意义

36. 尿培养标本 采集与运送

37. 尿培养 诊断症状明显的病人（如尿急、尿频、尿痛），一份标本就已足够，治疗48-72小时后再采集第二份标本。对于症状不明显的病人，需采集2-3份标本。怀疑肾结核时，应连续3天采集晨尿。 多次收集或24小时尿不能用作培养。 申请单上必须注明病人症状是否明显，这对于定量培养分析非常重要。 室温都有利于病原菌和污染菌会生长繁殖，因此若30min内不能及时培养尿液则必须冷藏，但也不能超过24小时。

38. 脑脊液标本 采集与运送

39. 脑脊液标本的运送 常温立即送检，实验室收到标本后应立即接种。 脑脊液标本送检的理想时间为15分钟内，半小时送检是可接受的，如果送检时间超过1小时，则会影响结果，在结果报告时，在备注处注明此情况。 如不能及时送检，可使用血培养瓶（怀疑脑膜炎奈瑟菌和淋病奈瑟菌感染时，请勿使用血培养瓶）。

40. 1.微生物室报告的敏感药物，为什么临床治疗无效?1.微生物室报告的敏感药物，为什么临床治疗无效?

42. 药敏试验敏感的药物，为什么临床治疗无效？ （1）药敏试验中某些药物敏感，只表示与其他药物联合用药，但单独使用无效。 • （2）药敏试验中某些药物敏感，由于感染部位不同不能常规报告。

43. 不同部位分离出的同一种细菌MIC值一样代表的意义是否一样?不同部位分离出的同一种细菌MIC值一样代表的意义是否一样? 肺炎链球菌对青霉素的折点 CLSI

44. 病原菌耐药检测及监测

45. MRSA/MRCoNS检测

46. ESBL AmpC KPC IMP NDM-1 肠杆菌科的耐药问题及检测

47. 多重耐药菌的检测 多重耐药鲍曼不动杆菌是指对下列三种及以上类别抗菌药物耐药的菌株，包括：抗假单胞菌头孢菌素、抗假单胞菌碳青霉烯类抗生素、含有β内酰胺酶抑制剂的复合制剂（包括哌拉西林/他唑巴坦、头孢哌酮/舒巴坦等）、氟喹诺酮类、氨基糖苷类。 广泛耐药鲍曼不动杆菌是指仅对1～2种有效抗菌药物敏感的菌株。

48. 多重耐药菌报告制度 1、微生物室在细菌培养结果确定后对多重耐药菌和特殊耐药表型的细菌立即电话报告医院感染管理科和临床科室，并应进行登记和必要的解释。 2、如院内在一段时间内发现某种细菌菌株数或者多重耐药菌增加明显，应进行流行病学调查，以便及时采取预防和控制措施，阻断传播途径。 3、临床科室发现多重耐药菌医院感染病例，应及时网络上报并电话报告感染管理科。

49. 药敏试验预测表 MRSA/MRCoNS对所有β-内酰胺类抗生素耐药 ESBL菌株对所有青霉素和头孢菌素耐药 非β-内酰胺酶介导的耐氨苄西林的肠球菌对所有青霉素类耐药 非产β-内酰胺酶的肠球菌，氨苄西林的敏感性可用于预报阿莫西林/棒酸、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林和哌拉西林/他唑巴坦的敏感性。

50. 耐药性的特殊分布 耐万古霉素的葡萄球菌 耐亚胺培南的肠杆菌科细菌 耐青霉素的A/B群链球菌 耐青霉素的肺炎链球菌（脑脊液分离出的标本） 耐万古霉素的肠球菌 … … … …