1 / 27

Färgningsteori

Färgningsteori. Morfologisk cellbiologi, 6 hp , vt 2014 Biomedicinska analytikerprogrammet inriktning laboratoriemedicin Cecilia Ottosson Kapitel 6 i Cellular Pathology Kapitel 7-9, 14 i Cellular pathology. Färger. Bensenderivater (aromatiska ringar)

nadine-brown
Download Presentation

Färgningsteori

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Färgningsteori Morfologisk cellbiologi, 6 hp, vt 2014 Biomedicinska analytikerprogrammet inriktning laboratoriemedicin Cecilia Ottosson Kapitel 6 i CellularPathology Kapitel 7-9, 14 i Cellularpathology

  2. Färger • Bensenderivater (aromatiska ringar) • Kromofora (färgbärande) grupper ex kinonringen ( ), azo (N=N), nitro (NO2) • Kromogener (färgbildare) • Auxokroma (hjälpande) grupper ex amino (-NH3+), hydroxyl (-O-), carboxyl (-COO-)

  3. Färger • Färgindex - CI nummer • Struktur och kromofor - nitro-färger (10300-10999), azo-färger (11000-19999) • Histologiskaegenskaper - basiskafärger - surafärger - neutralafärger - amfotärafärger - leukofärger

  4. Färger • Basiska (katjon) färger – kloridsalter • Sura (anjon) färger – natriumsalter • pH 3-9 • Primärfärg • Sekundärfärg - kontrastfärgning

  5. Färgningsmekanismer • Jonbindning • Vätebindning • van der Waal’s-krafter • Kovalentabindningar • Hydrofobabindningar

  6. Faktorer som påverkar färgbindningen • pH • Temperatur • Koncentration • Salter • Tid

  7. Färgmetoder • Direkt färgning • Indirekt färgning • Impregneringsfärgning • Succedanfärgning • Simultanfärgning

  8. Färgmetoder • Progressiv färgning • Regressiv färgning • Differentiering • Ortokromatisk färgning • Metakromatisk färgning • Polykromatisk färgning

  9. Kärnfärgning • Färgning gjord med basiska färger - ex metylenblått • Färgninggjord med färgerkombineradeellerföljdaavbetmedel - ex hematoxylin

  10. Färgning av cytoplasman • Färgning med sura färgämnen - ex eosin, fast green • Amfotäraproteiner

  11. Metallimpregneringar • Ag+ Ag0 • Argyrofilreaktion • Argentaffin reaktion • Guldtoning • Sköljning i natriumtiosulfat

  12. Avparaffinering, rehydrering och dehydrering • Avparaffinering: Tissueclear, xylen • Rehydrering: Alkohol – abs  95 %  70 % • Färgning • Dehydrering: Alkohol - 95 %  abs

  13. Montering • Förbättra optiken • Hållbarhet • Monteringsmedel – xylenbaserade, vattenbaserade

  14. Färgmetoder • Rutinfärgning - ex Hematoxylinoch eosin (H&E) • Specialfärgning - färgningavbindväv - färgningavkolhydrater - färgningavmuciner - färgningavfettceller - färgningavnukleinsyror - färgningavproteiner - färgningavenzymer - färgningavpigmenter - färgningavmikroorganismer - …

  15. Hematoxylin och eosin • Översiktsfärg • Rutinfärgning

  16. Hematoxylin • oxidation till hematein • oxidation via naturlig mognad (Ehrlichs) eller via tillsats av ox.medel (Mayers) • betmedel  positiv laddad molekyl

  17. Hematoxylin • kärnan blålila/blåsvart • Betmedel - Aluminiumsalter (hemalum) - blåning - regressiv färgning - känsliga för starkt sura färglösningar • Betmedel – Järnsalter (järnhematoxylin) - överoxidering - ejblåning - användsvidsurafärglösningar

  18. Eosin • eosin Y, eosin B • pH 4-6 • cytoplasma – olikanyanseravrosa

  19. Färgning av bindväv • Trikromfärgning - differentieringav: kollagen – metylblått muskelceller - syrefuchsin rödablodkroppar - pikrinsyra • Kollagenochmuskel: Van Gieson • Retikel: Gordon and Sweet

  20. Färgning av kolhydrater • PAS (PeriodicAcidSchiff) - polysackarider

  21. Färgning av muciner • Alcianblue - sura muciner

  22. Färgning av fettceller • Fixering • Ej dehydrering fryssnittning • Färgning efter snittning • Oil Red - fettceller

  23. Färgning av nukleinsyror • Feulgens teknik - DNA

  24. Färgning av proteiner • Kongo rött - amyloid

  25. Färgning av enzymer • ATPase färgning - differentiering av muskelfibrer

  26. Färgning av pigmenter • Artefaktspigmenter • Exogena pigmenter • Endogena pigmenter • Perls reaktion (Prussian Blue) - hemosiderrin(järn)

  27. Färgning av mikroorganismer • Ziehl-Neelsen - syra-fastaorganismer (tuberkulosbakterien)

More Related