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EL ADN

EL ADN. Sus aplicaciones en Medicina Forense Esperanza López Hidalgo. Médico Forense. IML de Málaga. APLICACIONES. Investigación de la paternidad Identificación criminal Identificación no criminal Alec Jeffreys 1985. CARACTERISTICAS DEL ADN. Unico Mismo en todas las células Estable

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Presentation Transcript

  1. EL ADN Sus aplicaciones en Medicina Forense Esperanza López Hidalgo. Médico Forense. IML de Málaga.

  2. APLICACIONES • Investigación de la paternidad • Identificación criminal • Identificación no criminal Alec Jeffreys 1985

  3. CARACTERISTICAS DEL ADN • Unico • Mismo en todas las células • Estable • Hereditario

  4. ESTRUCTURA • Dos largas cadenas de nucleótidos unidas formando una doble hélice • En el núcleo de la célula, en los cromosomas • Cariotipo humano 46 cromosomas

  5. FUNDAMENTO de la aplicación del ADN en MF Polimorfismo Fragmento de ADN presentes en todos los individuos pero que son altamente variables Mediante el análisis de varias regiones polimórficas, la probabilidad de que dos individuos sean iguales es prácticamente nula. Excepción gemelos univitelinos

  6. Tipos de Polimorfismos • Modificación de un solo nucleótido (SNPs) • P. de Longitud (VNTR). Secuencia de nucleótidos repetidos en tandem • Minisatélites (MVR), secuencias 30 pb • Microsatélites (STR), 2 a 6 pb, normalmente 4, ATTCATTC... Homo o heterocigótico

  7. TIPOS DE ADN • ADN nuclear • ADN mitocondrial • Polimorfismo del cromosoma Y

  8. ADN mitocondrial • Se encuentra en las mitocondrias • Herencia por vía materna • Utilidades • ADN deteriorado • Células carentes de núcleo • Linajes maternos

  9. P. Cromosoma Y • Filiación en ausencia de progenitor • Linajes por línea paterna • Delitos sexuales • Identificación de sexo en catástrofes Inconveniente, todos los individuos de la línea paterna comparten la misma información.

  10. METODO DE ANALISIS • Hibridación con sondas • Reacción en cadena de la polimerasa PCR

  11. HIBRIDACION CON SONDAS Sonda, fragmento monocatenario de ADN con una secuencia conocida que se une a un fragmento complementario de ADN. Sondas marcadas radiactivamente o con un producto quimioluminescente. Se pone en contacto con la muestra y se separan los fragmentos según su longitud. Wyman y White, 1980.

  12. TIPOS DE SONDAS Mono-locus (SLP): Específicas para una región de un cromosoma. 1 o 2 bandas, homo o heterocigótico. Multi-locus (MLP): Hibridan secuencias minisatélite, 33 pb, en varios locus de diferentes cromosomas. Patrón de múltiples bandas, huella genética.

  13. Ventajas de las SLP • Mas específicas • Exclusivas del ADN humano • Menor cantidad de muestra, 20 a 100 ng de ADN, no necesariamente en buenas condiciones

  14. TECNICA DE LA PCR Es la de mayor aplicación. Enzima Taq polimerasa se van uniendo de forma complementaria fragmentos de ADN delimitados con sondas, primers. Repetición cíclica del proceso permite obtener múltiples copias del fragmento de ADN. UTILIDAD, escasa cantidad de ADN o degradado.

  15. MUESTRAS Cualquier célula o tejido vivo o posmortem. • Sangre, manchas. • Células, frotis. • Tejidos, piel, huesos. • Pelos.

  16. Instrucciones básicas Sangre con anticoagulante Secado al aire Muestras testigo Muestras indubitadas Máxima higiene

  17. Envasar los indicios por separado Etiquetado e identificación Filiación de quienes intervienen en la investigación

  18. INTERPRETACION DE RESULTADOS Se expresa mediante un valor de probabilidad basado en el teorema de Bayes. Cálculo de la probabilidad en función de la frecuencia en la población de los perfiles analizados.

  19. PROBABILIDAD DE PATERNIDAD Si no se produce la exclusión directa. PP = ( X/X+Y).100 X = probabilidad de transmitir el rasgo al hijo Y = frecuencia del marcador en la población

  20. INVESTIGACION CRIMINAL Si los perfiles analizados coinciden se analiza la frecuencia de los polimorfismos analizados en la población general. Las combinaciones de los polimorfismos que se analizan en la actualidad permiten determinar una probabilidad de repetición al azar de hasta 1/ 1015

  21. Si la frecuencia fuera de 1% FALACIA DEL FISCAL: SI solo 1 de cada 100 personas tendrían ese perfil, el acusado tiene el 99% de posibilidades FALACIA DE LA DEFENSA: En una población de 100.000 personas 1000 tendrían ese perfil, el acusado y 999 personas mas podrían ser culpables

  22. Los dos son razonamientos falsos, aplicando el análisis Bayesiano, obtenemos la probabilidad, con lo que se denomina RAZON DE VEROSIMILITUD, que sería el razonamiento correcto

  23. Frecuencia 1% Probabilidad de ser culpable = 1 Probabilidad de no ser culpable = 1/100 = 0.01 RV = 1/0.01 = 100 El sospechoso es 100 veces mas probable de ser culpable que otra persona escogida al azar

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