100 likes | 318 Views
ГБОУ ДПО РМАПО Минздравсоцразвития России Кафедра клинической лабораторной диагностики Д.Г. Кисиличина, Е.В. Наумова, М.Е. Почтарь, С.А. Луговская, Е.А. Никитин* * ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России.
E N D
ГБОУ ДПО РМАПО Минздравсоцразвития России Кафедра клинической лабораторной диагностики Д.Г. Кисиличина, Е.В. Наумова, М.Е. Почтарь, С.А. Луговская, Е.А. Никитин* *ФГБУ ГНЦ Минздравсоцразвития России Сравнительное исследование минимальной остаточной болезни в периферической крови и костном мозге больных с В-клеточным хроническим лимфолейкозом Москва 2011
Значение МОБ в прогнозе выживаемости Минимальная остаточная болезнь (МОБ) – состояние, обусловливающее развитие рецидива, связанное с сохранением опухолевыхклеток в крайне низких концентрациях,ниже предела чувствительности морфологических методов. Полная ремиссия МОБ - Полная ремиссия МОБ + Общая выживаемость Частичная ремиссия Нет ответа Время, мес. Moreton et al. 2005
Оценка МОБ методом проточной цитофлюориметрии • Многоцветная проточная цитофлюориметрия: • Согласующиеся с АС-ПЦР данные • Выполнимость в течение 1 рабочего дня • Меньшая по сравнению с АС-ПЦР себестоимость исследования • Не требуется материал до лечения Стандартизованная панель МКА (Rawstron et al., 2007) + CD45 в каждую пробирку! 5-цветная панель Проточный цитофлюориметр FC500 (Beckman Coulter, США) 6-цветная панель Проточный цитофлюориметр FACSCantoII (Becton Dickinson, США)
Стратегия последовательного гейтирования 6-цветный анализ = U = U VS • Условия: • Анализ не менее 500 000 событий для каждой пробирки (чувствительность 10-4). • Абсолютный порог = 50 событий в регионе соответствующих характеристик; • Уровень контаминации < абсолютного порога;
Оценка МОБ в крови и КМ после 6 циклов FCR 57 больных с В-ХЛЛ Материал исследования – кровь и костный мозг с К3EDTA. Согласующиеся по МОБ-статусу данные в 42 (74%) случаев Корреляция по Спирмену R = 0,96
Сравнение уровня МОБ в крови и КМ 15 15 МОБ + Костный мозг 27 0 МОБ - МОБ + МОБ - Кровь Случай № % МОБ в КМ > % МОБ в крови (Me = 10):
Алгоритм финальной оценки МОБ Определение МОБ в крови Клетки ХЛЛ ≥ 0,01% Клетки ХЛЛ < 0,01% Ответ ≥ частичной ремиссии Исследование костного мозга Клетки ХЛЛ > 0,01% Клетки ХЛЛ < 0,01% Полная иммунофенотипическая ремиссия Клинически полная ремиссия
Исследование МОБ в динамике Промежуточная оценка - после 2-3 циклов FCR Финальная оценка - после 6 циклов FCR 6 FCR МОБ- 6 FCR МОБ+
Выводы • Количественную оценку остаточных клеток В-ХЛЛ по окончанию терапии возможно проводить по периферической крови. Анализ МОБ в КМ необходим в случаях, когда остаточный клон не выявляется в крови. • Мониторирование МОБ во время терапии выявляет динамику элиминации опухолевых клеток и позволяет прогнозировать достижение МОБ-негативной ремиссии. • Цель лечения В-ХЛЛ - достижение полной клинико-гематологической ремиссии с эрадикацией МОБ. • При финальной оценке МОБ после лечения с использованием препаратов МКА рекомендуется исследовать КМ.