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中心大型设备简介. 实验中心 zxsys@bjmu.edu.cn. 医学研究的“挣分 (SCI)” 机器. 分选流式细胞仪 (Flow Cytometer) 激光共聚焦显微镜 (Confocal Laser Scanning Microscope) 激光俘获微切割系 (Microdissector) 膜片钳 Patch Clamp 蛋白质研究设备. 2D—— 双向电泳仪 FPLC—— 快速液相色谱 ( 快速纯化系统 ) 液闪仪 + 微孔板荧光化学发光分析仪. 流式细胞仪(带分选)功能. 主要应用于细胞生物学研究 细胞和分子免疫研究 特异标记(抗体)标记细胞
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中心大型设备简介 实验中心 zxsys@bjmu.edu.cn
医学研究的“挣分(SCI)” 机器 • 分选流式细胞仪(Flow Cytometer) • 激光共聚焦显微镜(Confocal Laser Scanning Microscope) • 激光俘获微切割系(Microdissector) • 膜片钳Patch Clamp • 蛋白质研究设备 2D——双向电泳仪 FPLC——快速液相色谱(快速纯化系统) 液闪仪+微孔板荧光化学发光分析仪
流式细胞仪(带分选)功能 • 主要应用于细胞生物学研究 • 细胞和分子免疫研究 • 特异标记(抗体)标记细胞 • 血液细胞、干细胞和X/Y精子分选 • 全数字化高速分析设备 • Cell Sorter——继续培养 • ……
BD FACS Aria——Cell Sorter 三激光:激光波长为488nm、633nm和407nm 获取速度达70,000细胞/秒,分选50,000细胞/秒 多色分析,分析参数可达11色之多
激光共聚焦显微镜—“细胞的CT” • 细胞生物学和分子生物学结合研究的首选 • 细胞立体呈像、三维重建 • 亚细胞结构生理改变 • 特异标记多色呈现 • 分子病生理研究 • ……
激光共聚焦显微镜 Confocal Olympus FV1000 • 最大物镜数值孔径(分辨率)=1.42 • 成像速度=4张/秒 • Z轴360度转换 • 配备包括405在内的3个激光器 • 通过染料名称自动选择波长 • 35MW低输出 • 荧光淬灭速度较慢 • 100W汞灯无级调节
对象-足细胞;染料名称(从左至右)Hochest/FITC/Pholloidin-F-actin;作者-范青峰/刘淑芳;07-12-26对象-足细胞;染料名称(从左至右)Hochest/FITC/Pholloidin-F-actin;作者-范青峰/刘淑芳;07-12-26 对象-肾小球;染料名称(从左至右)Hochest/FITC/Podocalyxin;作者-蒋镭;时间-2008-1-16
激光俘获微切割系统(Microdissector)Leica LMD6000 • 倒置玻片,切割物自动收集在遥控杆控制的8个PCR管的管盖中; • 大面积组织、细胞群、单个细胞、细胞核、染色体以及活细胞切割; • 石蜡/冰冻/热力恢复抗原组织/荧光染色/单层细胞/血涂片;冰冻切片无需脱水直接切割; • 分子病理学、分子生物学与细胞生物学的桥梁
切割后续工作——DNA; RNA; 蛋白质组研究——注意: 专用玻片 • PCR: Direct sequencing; X-chromosome inactivation; CGH; LOH; Dideoxy Finger printing (例3:隐球菌鉴定by皮科赵作涛) • Gene Specific RT-PCR; cDNA library; Targeted DD • Protemics:2D-Page; IC/IH; LC-MS; Surface Enhanced
膜片钳Patch Clamp——功能研究 放大器: Axon200B(USA); 配套设备:正/倒置显微镜; NIR-DIC成像系统; 水镜头; 微操纵器; 微电极拉制仪; 抛光仪; 振动切片机等。 已经开展的实验: 单细胞膜片钳:神经元、心肌细胞等(急性分离/培养细胞均可) 脑片膜片钳:爪蟾、海马、脑干等。
蛋白质研究流程和设备 组织或细胞 粉碎 FPLC纯化 2D电泳分离 抗原 质谱 氨基酸序列 免疫动物 marker 抗体 含量-液闪 FPLC纯化
科研病理设备——专有一讲 吴海荣:实验病理学常用方法和仪器使用 组织 H.E.染色 酶组织化学 免疫组化 原位杂交 : : 冷冻 蜡块 脱蜡
脱水机、切片机、包埋机全套德国原产名牌LEICA——要珍惜呦脱水机、切片机、包埋机全套德国原产名牌LEICA——要珍惜呦
欢迎大家前来使用! 垂询电话: 流式细胞 ——裴 珮 2656 显微切割 ——许玉凤 2656 共 聚 焦 ——张 英 2656 2D等蛋白 ——肖 洋 2752 膜片钳 ——李 琳 2752 科研病理 ——吴海荣 2752
欢迎 刘武江 博士、泌尿研究所研究员 介绍 高速的BD-Influx 和 神奇的小动物活体成像