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INMUNOFLUORESCENCIA

INMUNOFLUORESCENCIA. Dr. Juan Carlos Aldave Médico Especialista en Inmunología Clínica y Alergología Comité de Inmunodeficiencias Primarias Asociación Latinoamericana de Inmunología. Objetivos de la práctica: Conocer el fundamento de la técnica de inmunofluorescencia. Inmunofluorescencia.

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INMUNOFLUORESCENCIA

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Presentation Transcript

  1. INMUNOFLUORESCENCIA Dr. Juan Carlos Aldave Médico Especialista en Inmunología Clínica y Alergología Comité de Inmunodeficiencias Primarias Asociación Latinoamericana de Inmunología

  2. Objetivos de la práctica: • Conocer el fundamento de la técnica de inmunofluorescencia

  3. Inmunofluorescencia • Es una prueba de diagnóstico serológico que tiene dos variedades principales: • IF directa: para detección de antígenos en una muestra clínica • IF indirecta: para detección de anticuerpos específicos en el suero del paciente

  4. Inmunofluorescencia directa (IFD) • Prueba de una sola etapa • Sobre una lámina depositamos una muestra en la que buscamos la presencia de un determinado antígeno (antígeno problema)

  5. Inmunofluorescencia directa (IFD) • Añadimos anticuerpos específicos del antígeno problema, marcados con isotiocianato de fluoresceína (conjugado) • Si el antígeno problema se encuentra presente en la muestra, el conjugado se une. En caso contrario el conjugado se elimina con un lavado de la lámina

  6. Inmunofluorescencia indirecta (IFI) • Prueba de 2 etapas • Sobre una lámina que lleva pegado un antígeno conocido, añadimos el suero del paciente • Si el suero contiene anticuerpos específicos, éstos se unen al antígeno

  7. Inmunofluorescencia indirecta (IFI) • Posteriormente se añaden anticuerpos anti-inmunoglobulina humana marcada con isotiocianato de fluoresceína (conjugado) • El conjugado se unirá a los anticuerpos del paciente

  8. Lectura de inmunofluorescencia • La lectura se hace con un microscopio de fluorescencia, cuya luz estimula al isotiocianato de fluoresceína, haciendo que emita luz fluorescente de color verde • La observación de luz verde fluorescente en la lámina indica la presencia del antígeno en la muestra (IFD) o de anticuerpos específicos en el suero (IFI)

  9. IFI: primera etapa IFI: segunda etapa

  10. Utilidad de la IF en la detección de anticuerpos antinucleares (ANA)

  11. ¿QUÉ SON? ANTÍGENO ANTICUERPO

  12. Importancia • Asociación con enfermedades del tejido conectivo • Participación en la patogenia de la enfermedad • Anti DNA – nefritis lúpica • Anti Ro – bloqueo cardiaco congénito

  13. “Que Dios los cuide mucho y bendiga su familia y trabajo” GRACIAS

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