第十四章唾液（斑）检验

第十四章唾液（斑）检验

一、唾液（斑）的特点 唾液来源：唾液腺的分泌物--- 腮腺、颌下腺、舌下腺、小唾液腺浆液粘液唾液成分：水分占99.4%，有机物---粘/球蛋白质、氨基酸、尿素、尿酸、唾液淀粉酶、麦芽糖酶、血型物质无机物---钠、钾、氯、钙、铵、磷酸盐、碳酸盐、硫氰酸盐其余为固形物（口腔脱落上皮细胞、大量细菌、食物残渣）唾液性状：无色、无味、接近中性（ph6.6-7.1），低渗粘蛋白多的时候呈粘液状，粘蛋白少的时候较稀薄唾液分泌：正常成年人每天分泌唾液1.0-1.5L。

一、唾液（斑）的证明 淀粉酶+口腔黏膜上皮细胞理由：唾液中含有大量的淀粉酶，是进行唾液斑斑痕种类鉴定的依据之一，但淀粉酶分布极广（人类粪便、几乎所有的植物、真菌等都含有淀粉酶、人体的其他分泌液液含少量的淀粉酶），单纯检出淀粉酶不能确定唾液斑。方法：淀粉酶检测：淀粉 + 碘 ----- 蓝色（-）不含淀粉酶淀粉酶（检材）糖 + 碘 ----- 无色（+）可能是唾液 + 碱性铜 ------ 棕红色沉淀证明糖的存在上皮细胞：检材—离心----涂片----HE染色如果检出食物残渣，更支持是唾液斑的检测结论

三、唾液斑的遗传标记检测 ABO血型----漱口，自然流出唾液置于干净容器，水浴中煮沸10min。灭火血型分解酶分泌型人的唾液斑-----中和试验测定ABO血型非分泌型人的唾液斑----酶标抗体免疫测定的方法蛋白/酶型----可以用特殊的双环杯提取腮腺液多态性蛋白Pa腮腺酸性蛋白 Pb 腮腺碱性蛋白 Pn腮腺中性蛋白 Pm 腮腺中带蛋白 Ph腮腺重蛋白 Pr 唾液富含脯氨酸蛋白 Db唾液双带蛋白 GL 唾液糖蛋白、多态性酶唾液淀粉酶、唾液酯酶、唾液酸性磷酸酶、唾液过氧化物酶等 DNA分析----唾液中含有口腔粘膜脱落上皮细胞---提取DNA---基因组DNA/线粒体DNA 唾液：漱口水或口腔式子，提取DNA 唾液斑：烟蒂（注意：取有唾液的部分进行DNA提取）

四、唾液（斑）的性别鉴定 分子杂交---男性特有的Y染色体DNA片断作为探针检测性别特异性高、但费时耗力、对DNA的含量及其完整性要求较高 PCR技术---性染色体特异性片断---片断的有无性染色体同源性片断---片断的数目 ZFP----锌指状蛋白基因：5’ZFYX+3’ZFY/ZFX，男340，女488 AMG--牙釉质蛋白基因：根据碱基缺失部位两侧的同源序列设计引物

第十四章 唾液（斑）检验