250 likes | 385 Views
Kinetica. Opgaven ter voorbereiding van het practicum en bespreking van het practicum. Opgaven ter voorbereiding van het practicum. Bepalen van de initiële snelheid. met p als stoechiometrisch coëfficiënt. De Michaelis Menton vergelijking omzetten tot de wiskundige vorm y=ax+b.
E N D
Kinetica Opgaven ter voorbereiding van het practicum en bespreking van het practicum
Bepalen van de initiëlesnelheid. met p als stoechiometrisch coëfficiënt
De Michaelis Menton vergelijking omzetten tot de wiskundige vorm y=ax+b Door substitutie waarbij en
Het doel en de beschrijving • Doel • Kinetica van een enzymatische reactie volgen • De kinetica bepalen van een reactie • Kennismaking met spectrometer
Informatie over de spectrometer • De werking van de spectrometer
USB2000 Eerste spiegel Tweede spiegel Optische detector Digitale detector Lichtbron Rooster
Computer • Opstelling van de proef Cuvette Spectrometer Pipet
Opstelling van de proef Pipet
Computer • Opstelling van de proef Cuvette Spectrometer Pipet
Werkwijze • Cuvette: 2.0mL buffer (pH=6.9)+0.5mL enzymoplossing • In spectrometer referentie • + 0.5mL catechol met bepaalde concentratie • Ocean Optics meting starten en opslaan • 4 keer overdoen
5 grafieken van de 5 experimenten : absorbantie in functie van de tijd
Berekeningen van en op basis van de grafieken: absorbantie in functie van de tijd • is eenvoudig af te leiden uit de grafiek is het snijpunt van de y-as • kunnen we dan ook makkelijk bepalen
Het verband tussen absorbantie en concentratie • met • Uit exp. 1: reactie die het snelst opgaat A= 1.458 OD c = 0.002 M (beginconcentratie in cuvette) d= 1 cm (dikte van cuvette) • Dan
Het verband tussen absorbantie en concentratie • met • Uit exp. 1: reactie die het snelst opgaat A= 1.458 OD c = 0.002 M (beginconcentratie in cuvette) d= 1 cm (dikte van cuvette) • Dan
Berekeningen van en op basis van concentratie in functie van de tijd • van concentratie berekenen via de van absorbantie
Samenvatting berekeningen • is de die gedefinieerd is in de chemie • blijft hetzelfde
Conclusie Via de spectrometer kunnen we de kinetica van de enzymatische reactie volgen • en zijn berekende constanten • en zijn veranderlijken vergelijking van functie opstellen via Michaelis Menton vergelijking