140 likes | 376 Views
钙磷的测定. 1、钙的测定. 方法: 原子吸收光谱法 络合滴定法 分光光度法( 甲基百里香酚兰法 ). 原子吸收光谱法 原理:使用空气-乙炔焰,钙焰的光吸收特 征是422.7 nm。 评价:灵敏度高; 准确(测定血浆总钙含量的参考方 法); 费用昂贵。. 络合滴定法 EDTA 络合滴定法
E N D
1、钙的测定 方法: 原子吸收光谱法 络合滴定法 分光光度法(甲基百里香酚兰法)
原子吸收光谱法 原理:使用空气-乙炔焰,钙焰的光吸收特 征是422.7nm。 评价:灵敏度高; 准确(测定血浆总钙含量的参考方 法); 费用昂贵。
络合滴定法 EDTA络合滴定法 原理:血清中钙离子在碱性溶液中与钙红指示剂结合成为可溶性复合物,使溶液成淡红色。EDTA Na2对钙离子的亲和力很大,与该复合物中的钙离子络合,使指示剂重新游离,溶液呈现蓝色。以EDTA Na2滴定量计算血清钙的含量。 评价:快速、简便、用血量少; 特异性较差; 终点不易掌握。
甲基百里香酚兰法的原理: 在碱性条件下,血清钙与甲基百里香酚蓝(Methyl Thymol Blue,MTB)结合生成蓝色络合物,在一定浓度范围内其色泽的深浅与钙的浓度成正比。
注意事项: • 显色剂应新鲜配制; • 所用玻璃器材必须严格清洗; • 避免标本溶血。 评价:方法简便; 显色稳定。
2、磷的测定(测定血中的无机磷) 方法: 染料法(孔雀绿直接显色测定法) 酶学法(联酶反应) 还原钼兰法
还原钼蓝法: 卫生部临检中心推荐使用硫酸亚铁或对甲基氨基苯酚硫酸盐(米吐尔)作还原剂。
还原钼兰法的原理: 利用磷在酸性溶液中与钼酸铵反应生成磷钼酸复合物,用对甲基氨基苯酚硫酸盐还原生成钼蓝,在680nm波长有吸收峰,在一定范围内其含量与吸收强度成正比。
注意事项: • 血标本宜采用血清或肝素抗凝血浆; • 标本应避免溶血; • 米吐尔试剂宜新鲜少量配制。
方法评价 • 无需除蛋白,快速简便; • 显色稳定,特异性较高; • 溶血、脂血和黄疸标本可产生干扰。