Tau, Phospho-Tau et A  42 dans le LCR

1. Tau, Phospho-Tau et A42 dans le LCR Les marqueurs biologiques de la maladie d Alzheimer

2. Les marqueurs tissulaires du SNC Diagnostic de certitude Analyse neuropathologique donc post-mortem + Depôts amyloïdes néocorticaux A42 Degenerescence neurofibrillaire néocorticale Tau MALADIE D’ALZHEIMER certaine Critères NIA / Reagan institute 1997

3. Marqueurs biologiques de la maladie d Alzheimer • Les marqueurs biologiques précoces • Les marqueurs • Tau • Phospho-Tau • A42 • Le liquide biologique utilisé: Le LCR (liquide cephalo rachidien)

4. TAU : une proteine associée aux microtubules Neurone neurofilaments microtubules Transport Axonal tubuline Neurone microtubules tau GTP tubuline P tau synapse tubuline AXONE GDP tubuline

5. La dérégulation de la phosphorylation de Tau au cœur de la DNF Phosphorylation Anormale + Tau Phosphorylation Normale P Tau N-ter P P P P P P Thr 181 Domaines de liaison P P P AT270 C-ter P = DNF Hyper phosphorylation

6. Neuroprotection against tauopathy sAPPalpha: neurotrophic role sAPP beta Abeta oligomers Beta secretase (BACE1) No Abeta formation Alpha secretase Gamma secretase Gamma secretase AICD (Nuclear role?) Beta stub Alpha stub AICD (Nuclear role?) N-ter APP: therapeutic target APP Abeta C-ter Amyloidogenic pathway: the evil Non amyloidogenic pathway: The good

7. Conditions de prélèvementdes échantillons • Ponction lombaire • Prélèvement sur un tubeen polypropylène • Acheminement en quelques heures au laboratoire • Au laboratoire : centrifugation, conservation à -80°C

8. Principe test ELISA ±

9. INNOTESTR hTau Ag( tau totale) Anticorps utilises pour le dosage des Tau totales HT7 BT2 AT120 Blennow et al, Mol Chem Neuropathol 1995;26:231 Répond à la question Y a t il mort neuronale? Si oui, hTau  car libère dans l’espace extracellulaire • ･User-friendly enzyme immunoassay
･ • Minimum number of handling steps
･ • Small sample volume: 25 µL CSF. • Duplicate testing is strongly recommended and requires
2 x 25 µL CSF
･ • Reproducible results within the standards range
･ • Lowest detection limit: 60 pg/mL 
 • Standards range: 75 to 1200 pg/mL

10. INNOTEST  Amyloide (1-42) Anticorps utilisés pour le dosage de A 1-42 3D6 1 42 21F12 Vanderstichele et al, 1998 Repond à la question Y a-t-il formation de depots amyloides? Si oui, Ab42  car piege dans les agregats

11. INNOTEST phospho Tau (181P) ELISA for CSF phospho tau (P-Thr181) AT270 P HT7 Vanmechelen et al, Neurosci Lett 2000;285:49 Repond à la question Y a t il formation de DNF? Si oui, phosphoTau  car tau est hyperphosphoryle

12. Tau, Ab42 et Phospho-Tau : valeurs de référence dans le LCR INNOTEST INNOTESTINNOTEST Age Tau Aß42 Phospho-Tau* (pg/ml) (pg/ml) 61±18 263 ± 164 794 ± 218 35 (18-87) 21-50 ans 136 ± 89 792 ± 182 51-70ans 243 ± 127 790 ± 228 MMSE = 29.2 ± 0.92 Sjögren et al : Tau and Aß42 in CSF during Aging (2001) ClinicalChemistry 47:10 *Schoonenboom et al : Ab42 and phosphorylated Tau in CSF as markers for early-onset Alzheimer disease (2004) Neurology 62 : 1580

13. Variations des concentrations de Tau et A42dans le LCR de patients Alzheimer • La protéine Tau totale augmente • La protéine Tau phosphorylée augmente • Le peptide -amyloid(1-42)diminue • JAMA . 2003; 289: 2094-2103. Meta-analysis involving 17 studies of CSF ß-amyloid and 34 studies of CSF tau. • THE LANCET Neurology Vol2. October 2003 • CSF markers for incipient AD.

14. Diagnostic differentiel Dr Blennow, Clinical Laboratory International, Oct.2001: 8-10 Pathologie hTau total Tau -181P Beta-amyloid(1-42) Senescence normal Normal (< 450 Normal(< 60 Normal (> 500 pg/ml) pg/ml) pg/ml) ØØ Ú Ú Mal. Alzheimer moderé moderé Depression N N N Mal. Parkinson N N N Demence alcoolique N N N Dem. fronto-temporale N ou faible N ou faible N ou faible Ú Ø Ø Ø N ou faible N Dem. Corps Lewy Ú faible à moderé ÚÚÚ Ú Ø Mal. Creutzfeldt-Jakob N ou ÚÚ Acc.Vascul.Cerebral transitoire N N Dem. vasculaire Data divergentes N N ou faible Ø

15. Amélioration de la sensibilité du test AD (n=150) CON (n=100) ND (n=84) = seuil A variable Diagnosis discriminant analysis A42=240 + 1.18 Tau 2500 2000 1500 A42 (pg/ml) 1000 Correctly classified by line : 86% 500 0 0 500 1000 1500 Tau (pg/ml) * Composite Figure from Hulstaert et al. Neurology 1999;52:1555-1562

16. IATI Index MA vs Contrôles Innotest Amyloid Tau Index Tau mesurée : xxx pg/ml  référence relativeA42 : = 240 +1.18[Tau] A42 mesurée :yyy pg/ml IATI =A42 mesurée / référence relative d apres F.Hulstaert et coll. IATI Index > 1 Normal (Neurology 1999;52:1555-1562)

17. Triage MCI patients • IATI > 1.2 pronostic favorable • IATI < 0.8 dégénérescence neuronale anormale • IATI < 0.8 & [pTau] > 60 Profil pathologique • Alzheimer possible Données non publiées - résultats d’études multicentriques

18. Conclusion 1 • C est l’utilisation conjointe des trois dosageshTau, pHospho-Tau et Ab42 qui permet de distinguer des patients atteints de la maladie d Alzheimer des patients atteints d’autres démences ou autres pathologies neurologiques

19. Conclusion II: Diagnostic Différentiel DFT, DCB N = Normal B = Border P = Pathologie MCJ Niveau B N P P++ Tau phosphorylation N B P DCL A 42 Niveau P N B Alzheimer, du MCI à la démence DCB: dégénérescence corticobasale DFT: Dégénérescence fronto-temporale DCL: Démence à corps de Lewy MCI: troubles cognitifs débutants MCJ: maladie de Creutzfeld-Jacob