1 / 16

Экспрессия гетерологичных генов

Экспрессия гетерологичных генов. !. 3 ’. ДНК. РНК-полимераза. Рибосома. РНК. 5 ’. Экспрессионные вектора. Белок. N. Для экспрессии чужеродного гена необходимо организовать 2 процесса - транскрипции и трансляции. Ap r. Ori. Промотор – элемент, обеспечивающий инициацию транскрипции.

perdy
Download Presentation

Экспрессия гетерологичных генов

An Image/Link below is provided (as is) to download presentation Download Policy: Content on the Website is provided to you AS IS for your information and personal use and may not be sold / licensed / shared on other websites without getting consent from its author. Content is provided to you AS IS for your information and personal use only. Download presentation by click this link. While downloading, if for some reason you are not able to download a presentation, the publisher may have deleted the file from their server. During download, if you can't get a presentation, the file might be deleted by the publisher.

E N D

Presentation Transcript

  1. Экспрессия гетерологичных генов !

  2. 3’ ДНК РНК-полимераза Рибосома РНК 5’ Экспрессионные вектора Белок N Для экспрессии чужеродного гена необходимо организовать 2 процесса - транскрипции и трансляции

  3. Apr Ori Промотор – элемент, обеспечивающий инициацию транскрипции Ген Р pl

  4. α α  ’  TTGACA TATAAT Инициация транскрипции 7 шт.,  70 основная  32 шок  24 шок  38 голодание  28 жгутики  54 мет. азота  19 тр. железа 5’ - 35 - 10 Pribnow box 1975

  5. Сила промоторов Важнейшее свойство промоторов – возможность регуляции их активности.

  6. Регуляция работы промоторов Лактозный оперон Жакоб и Мано 1961 г. Оперон – группа генов, находящихся под единой системой регуляции. Включает в себя гены и регуляторные элементы. t lac I lacZ lacY lacA lacO пермеаза 30 кДа Репрессор 38 кДа -галактозидаза 125 кДа трансацетилаза 30 кДа Оператор 21 н.п. Лактоза - индуктор IPTG Индуцибельный оперон Индукция х1000

  7. trpE trpD trpB trpA trpC Триптофановый оперон Репрессибельный оперон. Репрессия х700 Ptrp trpR trpO att Ингибирование конечным продуктом Подавление х70 Триптофан - ингибитор 4х12000 Куда пропал еще один порядок ингибирования ? Аттенуация – регуляция транскрипции на уровне трансляции (Ослабление)

  8. Аттенуация – регуляция транскрипции на уровне трансляции Лидерный пептид 13 ак Stop-кодон ww ДНК 1 3 4 2 РНК полимераза мРНК 5’ 2 3 3 4 Где регуляция ?

  9. ww ww Аттенуация – регуляция транскрипции на уровне трансляции ww рибосома Если триптофана мало, то 2 3 Если триптофана много, то 3 4 Подавление х10

  10. Гибридные промоторы

  11. Рr Apr c1ts Ori Другие варианты регуляции экспрессии на уровне транскрипции Pr и Pl промоторы фага  Репрессор

  12. Р Apr pol lacI lacO Ori Другие варианты регуляции экспрессии на уровне транскрипции Промотор фага Т7 E.coli BL21 P lac

  13. Плазмида рЕТ23 T7 promoter

  14. T7 promoter lacO

  15. Apr Ori Все равно ни чего не получится ! Ген Рr c1ts pl Что дальше ?

  16. 3’ ДНК РНК-полимераза Рибосома РНК 5’ Белок N Необходимо обеспечить инициацию трансляции

More Related