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实验实训. 实习一、动物染色体标本的制备与观察 实习二、小鼠减数分裂标本的制备与观察 实习三、多基本性状的遗传分析 实习四、遗传力的计算 实习五、遗传相关系数的计算 实习六、种畜外貌的识别与鉴定 实习七、种畜系谱的编制与系谱鉴定 实习八、个体育种值的估计 实习九、综合选择指数的制订与应用 实习十、近交系数和亲缘系数的计算 实习、杂种优势率的计算. 实习一、动物染色体标本的制备与观察. 一、实习目的: 1. 初步掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理。 2. 了解常用实验动物染色体的数目及特点。 二、实验用品
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实验实训 实习一、动物染色体标本的制备与观察 实习二、小鼠减数分裂标本的制备与观察 实习三、多基本性状的遗传分析 实习四、遗传力的计算 实习五、遗传相关系数的计算 实习六、种畜外貌的识别与鉴定 实习七、种畜系谱的编制与系谱鉴定 实习八、个体育种值的估计 实习九、综合选择指数的制订与应用 实习十、近交系数和亲缘系数的计算 实习、杂种优势率的计算
实习一、动物染色体标本的制备与观察 • 一、实习目的: • 1.初步掌握动物骨髓染色体标本制备基本过程,了解操作步骤的原理。 • 2.了解常用实验动物染色体的数目及特点。 • 二、实验用品 • 1.材料 小白鼠、无尾两栖类蛙属或蟾蜍属动物。 • 2.器材 水平离心机、显微镜、刻度离心管(10m1)、注射器(1ml)、载玻片、烧杯(400m1)、量筒(100m1)、试管架、镊子、剪刀、解剖刀、吸管等。 • 3.试剂 2%柠檬酸钠溶液、1%柠檬酸钠溶液、秋水仙素(cochicine)溶液、Giemsa(姬姆萨)原液(pH6.8)等。
四、实习内容 • 1.小白鼠骨髓细胞染色体的制备方法 • (1)动物按4 ug/g体重的剂量经腹腔注射秋水仙素,3~4 h后杀死动物。 • (2)取出动物后肢的胫骨和股骨。剪去两端。 • (3)将0.6~1 ml 2%柠檬酸钠用1ml注射器按上5#针头注入骨髓腔,将骨髓细胞先冲入小碟内,取下注射针头,反复吸打骨髓细胞,使细胞团块分散,转入10 ml离心管。 • (4)视骨髓量之多寡加入0.4% KCl溶液8~10 ml,随即将离心管置37±0.5 ℃水浴中低渗10 min。 • (5)以1000 r/min离心8 min。
(6)弃上清液,沿离心管壁缓慢加入新配置的甲醇:冰醋酸(3:1)固定液5 ml,加固定液时注意不要冲动细胞团块。 • (7)加完固定液后,立即用吸管将细胞轻轻打均匀,静置固定20 min。如此反复固定2~3次,每次20 min。 • (8)固定的细胞经离心后,吸去上层固定液,视管底的细胞多寡加入少量新配制的固定液,将细胞团块轻轻吸打成悬液。 • (9)在干净、湿、冷的载玻片上滴2~3滴上层细胞悬液,在酒精灯上文火烘干(在空气干燥的地方可不用)。 • (10)将玻片标本平放于支架上,细胞面朝上,每片滴加1:10 Giemsa磷酸盐缓冲液3~4 ml,染色10 min。 • (11)在自来水管下细流冲洗数秒,去掉Giemsa磷酸缓冲液,用小块纱布擦干玻片底面及四周,显微镜观察和分析。
2.黑斑蛙或蟾蜍骨髓细胞染色体标本的制备 • (1)动物按30 ug/g体重的剂量经腹腔注射秋水仙素,7~8 h后杀死动物,取出肢股骨和胫骨,用纱布剥掉全部肌肉,剪去胫骨和股骨两部。 • (2)将1 ml 1%柠檬酸钠溶液用1 ml注射器通过5#针头注入骨髓腔,细胞冲入小碟内。 • (3)摘掉针头,用注射器筒轻轻反复吸打,使分散成单个细胞。 • (4)将骨髓细胞转入离心管,视骨髓细胞量之多寡加入事先预热至26±0.5 ℃的0.4% KCl溶液8 ml,置26±0.5 ℃水浴低渗30min。 • (5)以后的固定、滴片、染色、观察、分析同“小白鼠骨髓细胞染色体的制备”。
五、观察 • 1.在低倍镜下观察Giemsa染色之后的中期分裂相的形态。在显微镜下可观察到染色体被染为紫红色。 • 2.在高倍镜下选择分散适度,不重叠的染色体的分裂相,在油镜下(90×或100×)进行观察
六、作业 • 1.记录所观察小白鼠、黑斑蛙或蟾蜍骨髓细胞染色体的数目和形态。 • 2.绘制染色体图。 • 3.为什么制备小白鼠染色体标本时秋水仙素只注射4ug/g体重,而蛙类需注射30ug/g体重? • 4.收集小白鼠骨髓细胞用2%柠檬酸钠溶液,而收集蛙类骨髓细胞用1%柠檬酸钠溶液,为什么?
实习二、小鼠减数分裂标本的制备与观察 一、实习目的 • 本实习是掌握精巢染色体标本制作方法,观察细胞减数分裂过程中不同时期的染色体,了解性细胞形成过程中的染色体状态。 二、器材和试剂 • 1.器材 显微镜、离心机、解剖器材、注射器、10ml刻度离心管、试管架、吸管、培养皿、载玻片。 • 2.试剂 2%柠檬酸钠溶液、0.4%KCl溶液、冰醋酸、甲醇、秋水仙素(100ug/ml)。 • 3.实习材料 性成熟的雄性小白鼠
四、实习步骤 • 1.秋水仙素处理:取睾丸前3~4 h先给小鼠经腹腔注入秋水仙素(按4 ug/g体重)。 • 2.取细精小管:用损伤脊髓法处死小鼠,放在解剖板上,固定四肢,剖开腹腔取睾丸放入盛有2%柠檬酸钠溶液的小培养皿中。用小剪刀剪开包在睾丸最外层的腹膜和白膜,用尖头小镊子从睾丸中挑出细线状的细精小管。更换的柠檬酸钠溶液将细精小管冲洗一次,再加5~6 ml的柠檬酸钠溶液,一起吸入离心管中。 • 3.制细胞悬液:待细精小管沉入离心管后,用吸管头将细精小管研碎(所选用的吸管要管头平齐)。经反复研磨和吹打,可使处于减数分裂过程中的各期细胞脱落在溶液中。然后吸掉肉眼所见的膜状物,制成细胞悬液(同时有部分精子存在)。 • 4.收获细胞 经1000 r/min离心10 min,去上清液。所得沉淀物,除少部分精子外,即是处于减数分裂过程中的各期细胞。 • 5.低渗处理、固定、制片染色均与骨髓染色体制片实习相同(见实习一)。
五、观察 • 1.寻找和观察处于第一分裂时期的分裂相,表现出20对同源染色体相互配对的现象。20对同源染色体中有19对染色体呈环状连接,只有XY染色体表现出特殊的一个末端和二个末端相接。而且Y染色体又出现一定程度的深染现象。 • 2.寻找和观察第二次减数分裂过程中的中期染色体,观察处在染色单体尚未分离前的20个姊妹染色单体形态。
六、作业 • 绘制你在显微镜下看到的染色体在减数分裂过程中各个不同时期的图像,并用文字说明其主要特征。
实习三 多基因性状的遗传分析 一、实习目的 • 通过多基因性状的遗传分析,学会运用遗传的基本定律分析某些简单的遗传现象。 二、实习原理 • 一对基因在杂合状态时,保持相对独立性。子一代在形成配子时,等位基因彼此分离到不同的配子中去。子二代基因型分离比是1:2:1,表型分离比是3:1。 • 不同对的基因在形成配子时自由组合,但同一染色体上的基因常连锁在一起。
三、实习方法 • 通过对所给习题的分析,确定杂交后代的基因型和表型,以及杂交后代的比例。 • 例1:大约在70个表型正常的人中有一个白化基因杂合子。一个表型正常其双亲也正常但有一白化弟弟的女人,与一无亲缘关系的正常男人婚配。问他们如果有一孩子,而且为白化的概率是多少?如果这个女人与其表型正常的表兄结婚,其子女患白化症的概率是多少?
解:据题意知控制白化的基因为隐性基因,设为a, 即可推知双亲的基因型为A_和A_,而此双亲有一白化儿,即可知双亲基因型应为Aa和Aa。图示如下: • Aa × Aa • AA Aa aa • 1/4 2/4 1/4 • 因此,该女人携带白化基因的概率为2/3,为正常男人携带白化基因的概率为1/70,故此两人婚配生白化儿的概率为: 由于表兄妹亲缘系数为1/8,因此表兄携带白化基因的概率为1/8×2/3=1/12,故表兄妹结婚生白化儿的概率为:
例2:真实遗传的黑羽无头冠家鸡与真实遗传的红羽有头冠家鸡杂交。测交该交配之黑羽有头冠F2,产生的子裔总的比例是:4黑羽有头冠:2黑羽无头冠:2红羽有头冠:1红羽无头冠。问:例2:真实遗传的黑羽无头冠家鸡与真实遗传的红羽有头冠家鸡杂交。测交该交配之黑羽有头冠F2,产生的子裔总的比例是:4黑羽有头冠:2黑羽无头冠:2红羽有头冠:1红羽无头冠。问: • 哪一性状是由显性基因决定的? • 亲本的基因型是什么? • F1×F1交配,预期子裔的类型和比例如何?
解:据题意: • (1) 黑羽∶红羽=(4+2)∶(2+1)=2 ∶1,即黑羽为显性,设为B基因控制;红羽为隐性,定为b基因。 • 有头冠∶无头冠=(4+2)∶(2+1)=2 ∶1,即有头冠为显性,设为R基因控制;无头冠为隐性,定为r基因。 • (2)亲本的基因型为BBrr和bbRR。 • (3) F1×F1交配: BBrr × bbRR BbRr F2表型及比例如下: 黑羽有头冠∶黑羽无头冠∶红羽有头冠∶红羽无头冠=9∶3 ∶ 3 ∶ 1
四、作业 • 1.在家狗中,基因型A_B_为黑色,aaB_赤褐色,A_bb红色,aabb柠檬色。一只黑狗与柠檬色狗支配生一柠檬色小狗。如果这个黑狗与另一只基因型相同的狗交配,预期子代的比例如何? • 2.在兔子中,c座位有三个复等位基因C、cch和c,各类基因型及其表型是: • CC、Ccch、Cc 深色 • cchcch、cchc 灰色 • cc 白色 • 一只深色兔子与一只白色兔子杂交,产生3只灰色和4只深色的兔子。问亲本的基因型如何?若Cc与cchc交配,预期其子代如何?
实习四 遗传力的计算 • 一、实习目的 • 熟悉遗传力的原理和计算方法,并能应用于育种实践。 • 二、实习原理 • 性状的遗传力是某性状的育种值方差占表型总方差的比值,可以用百分数或小数表示。遗传力是畜群的遗传特性,不是个体特性,因此要用群体资料来计算。不同年份、不同畜群的同一性状遗传力,由于受不同环境条件的影响,计算结果会有差异;同一畜群中不同性状的遗传力也是不同的。在实际应用时,最好应用本场畜群资料来估测遗传力参数,而且应尽可能扩大样本含量,以减少取样误差,增加计算的正确性。
三、方法步骤 • 公畜内女母回归和遗传力的计算步骤: • ①整理资料。以女儿的个体表型值为O,以其母亲的个体表型值为P; • ②分别计算各公畜组的平方和SSp、SS0、乘积和SPop; • ③将各组的上述数据总加起来,得到公畜内平方和、公畜内乘积和;
计算公畜内女母回归和遗传力: h2=2bw(op)
①整理资料。 ②分别计算出各组的∑X,∑X2和 然后将各种的上述数据总加起来,得到∑∑∑X、∑∑X2、∑CX和∑n; ③计算平方和、自由度和均方: 半同胞相关和遗传力的计算步骤如下: SSw=∑∑X2-∑C dfS=S-1 dfW=∑n-S ④计算各组的平均同胞数n0。⑤计算半同胞相关和遗传力: h2=4rHS
四、作业 • 1.某羊群育成母羊剪毛量资料经初步统计得二级数据如下,请用公羊内女母回归法估计剪毛量的遗传力。 O代表女儿的剪毛量,P代表母亲的剪毛量,为了计算方便,每个实测值都减去5后进行统计,第二位小数四舍五入。 2.利用上表中的女儿剪毛量资料采用半同胞相关法估计遗传力。
实习五 遗传相关系数的计算 • 一、实习目的 • 熟悉遗传相关系数的计算方法,并能应用于育种实践。 • 二、实习原理 • 遗传相关是两个性状育种值之间的相关。遗传相关系数的计算较复杂,要求资料的样本大,否则会出现很大的误差。因此,在实际育种中计算时,要尽量抽取大样本,才能保证估计值的可靠性。 • 估计遗传相关系数的常用方法有两种:一是亲子相关法,二是半同胞资料遗传相关估计法。本实习用后一种方法来估测性状的遗传相关系数。
三、方法步骤 • 对于大家畜而言,大量的全同胞资料较难得到,为扩大样本含量一般采用半同胞资料估计遗传相关。由于同父半同胞个体很多,与遗传力估计时一样,需要计算公畜内组内两性状方差组分和协方差组分来估计性状的遗传方差及它们间的遗传协方差。 • 其计算公式为: • 式中: • MPs(xy)是x和y性状的公畜间均积,等于x和y性状的公畜间乘积和(SPs(xy))除以公畜间自由度(dfs); • MPw(xy)是x和y性状的公畜内均积,等于x和y性状的公畜内乘积和(SPw(xy))除以公畜内自由度(dfw); • MSs(x)是x性状的公畜间均方, • MSw(x)是x性状的公畜内均方; • MSs(y)是y性状的公畜间均方,MSw(y)是y性状的公畜内均方。
计算步骤如下: • 按家系整理x、y两性状的度量值; • 分别计算Σx、Σy、Σx2、Σy2、Σxy和Cx、Cy、Cxy。
四、作业 根据下列3头公牛女儿头胎产奶量和12月龄体重的资料,计算该两性状的遗传相关系数。 3头公牛女儿头胎产奶量和12月龄体重(单位:kg)
实训六、种畜外貌的识别与鉴定 • 一、实训目的: • 掌握各种类型种畜的外部形态,掌握性能测定的项目和方法 • 二、实训材料 • 1. 种用畜禽图谱 • 2.体尺测量工具,牛、羊、猪等活畜。
三、实训内容 • (一)种畜外貌的观察与识别 • 1.肉用型: 丰满平滑,四肢短,中躯紧凑,呈长方形或圆筒形。低身广躯,头小、颈粗短,肩宽广,胸宽且深,背腰平直,后躯宽广丰满,四肢短小,皮肤松软,毛细软。 • 2.乳用型: 全身清瘦,菱角突出,体大肉少,中躯较长,后肢较发达。体型一般呈三角形。 • 3.毛用型: 皮薄、头宽,胸宽肋圆拱,背腰平直,四肢长而结实,全身被毛密度大、有弹性。 • 4.役用型: 骨骼健壮,体格魁梧,肌肉发达,四肢粗短。 • 5.蛋用型: 体型小而紧凑,毛紧,腿细,头颈宽长适中,胸宽深而圆,腹部发达。
喙豆 鸭的外貌特征 1、一般特征 镜羽 • 喙长扁平形,喙缘两侧呈锯齿形 • 上喙有一豆状突出称喙豆 • 喙的颜色是品种特征之一 • 前肢主翼羽尖狭而短小 • 有色羽的副翼羽上有翠绿色羽斑,称镜羽 • 后肢胫部较短 • 除第一趾外,趾间有蹼 蹼
金属光泽 2、性别差异 性指羽 ♂?
鹅的外貌特征 1、性别差异 肉垂 (咽袋) ♂? 肉瘤 (额包)
区别 1、中国鹅与欧洲鹅
役用型: 髻甲高,前肢发达,皮厚毛粗,前高后低. 役用型----湘西黄牛