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实验 血液一般检查. 上海交通大学医学院 丁磊. 【 目的 】 掌握血涂片的制备和瑞氏染色的方法。 掌握外周血各类细胞的形态特点。. 【 器材 】 一次性消毒采血针、 75% 乙醇棉球、载玻片、推片、吸耳球、显微镜。. 【 试剂 】 瑞氏染液 I 液 : 包含瑞氏染料 1.0g 、纯甲醇( AR 级以上) 600.0ml 、甘油 15ml 。 II 液: 磷酸盐缓冲液( pH6.4~6.8 ) 【 标本 】 EDTA 抗凝静脉血或外周血。. 【 操作 】
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实验血液一般检查 上海交通大学医学院 丁磊
【目的】 掌握血涂片的制备和瑞氏染色的方法。 掌握外周血各类细胞的形态特点。
【器材】 一次性消毒采血针、75%乙醇棉球、载玻片、推片、吸耳球、显微镜。
【试剂】 瑞氏染液 I液:包含瑞氏染料1.0g、纯甲醇(AR级以上)600.0ml、甘油15ml。 II液:磷酸盐缓冲液(pH6.4~6.8) 【标本】 EDTA 抗凝静脉血或外周血。
【操作】 (1)采血:静脉采血后,使用玻璃棒、毛细管、注射针头等在距载玻片一端1cm处加1滴抗凝血,如果使用手指采血则直接用洁净玻片蘸1 滴血。 (2)推片:左手平执载玻片,或放在类似桌子等平坦地方,右手持推片从后方或前方接近血滴,使血液沿推片边缘展开成适当的宽度,立即将推片与载玻片呈30~45。角,轻压推片边缘将血液推制成厚薄适宜的血涂片,血涂片应呈舌状,头、体、尾清晰可见。
SMEAR Drop of blood Slide 1
Slide 2 On contact, slide 2 extends the drop along its 1” side
Slide 2 Pushingangled slide 2 along #1 smears the line of blood across slide 1
Slide 2 Smear Lift away slide 2; dry #1; stain; coverslip A few cells are damaged; smear is not evenly thick; & staining is uneven. Same apply to SPREADS
(3)干燥:将推好的血涂片在空气中晃动,使其迅速干燥。天气寒冷或潮湿时,应于 37 ℃温箱中保温促干,以免细胞变形缩小。 (4)标记:在载玻片的一端用记号笔编号。 (5)染色:待血涂片干透后,用蜡笔在两端划线,以防染色时染液外溢。然后将玻片平置于染色架上,滴加染液(I液) 3~5 滴,使其迅速盖满血涂片,约0.5~ 1min后,滴加等量或稍多的缓冲液(II 液),轻轻摇动玻片或用吸球对准血片吹气,使染液充分混合。
(6)冲洗:5~10 min后用流水冲去染液,待干。 (7)结果观察:将干燥后的血片置显微镜下观察。用低倍镜观察血涂片体、尾交界处血细胞平铺的部分。
细胞 大小 中性粒细胞 10~15um 嗜酸性粒细胞 13~15um 嗜碱性粒细胞 10~12um 单核细胞 15~25um 淋巴细胞 6~15um
【结果报告】 细胞 计数 百分比% 中性粒细胞 正正 嗜酸性粒细胞 嗜碱性粒细胞 单核细胞 淋巴细胞 描绘镜下所见外周血细胞形态
采血 干燥 染色 推片 结果观察 冲洗 标记 实验(血涂片制备和染色)流程图