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实验三 稻棉种子活力的快速测定. 一、目的要求. 学习和掌握稻、麦、棉等种子活力的快速测定方法。 二、仪器用品及实验材料 1 .材料:水稻、小麦、棉花经贮藏后部分丧失生活力的种子,或经过处理的种子,新鲜的种子。 2 .仪器设备:培养皿、刀片、 镊子、 培养箱等 3 .试剂: 0.1 % TTC 溶液( TTC 应避光保存,且不宜久存,若溶液变红色不可再用)、 5% 红墨水溶液。. 种子活力. 种子活力是指种子的健壮度,包括迅速、整齐萌发的发芽潜力、生长潜力。
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一、目的要求 • 学习和掌握稻、麦、棉等种子活力的快速测定方法。 • 二、仪器用品及实验材料 • 1.材料:水稻、小麦、棉花经贮藏后部分丧失生活力的种子,或经过处理的种子,新鲜的种子。 • 2.仪器设备:培养皿、刀片、 镊子、 培养箱等 • 3.试剂:0.1%TTC溶液(TTC应避光保存,且不宜久存,若溶液变红色不可再用)、5%红墨水溶液。
种子活力 • 种子活力是指种子的健壮度,包括迅速、整齐萌发的发芽潜力、生长潜力。 • 种子活力的大小取决于遗传基础和发育状态,当种子成熟时,活力水平达到高峰,随后在采收、加工、贮藏过程中,种子会发生不同程度的劣变,引起活力的衰退,进而在播种时,直接影响农作物的产量。 • 快速测定种子活力可以及时的鉴定种子的健壮度,对是否还具有发芽的潜力及其使用价值作出尽可能切合实际的判断。
三、实验内容 学习和掌握几种快速测定稻棉种子活力的原理和方法。 (一)T.T.C法快速鉴定种子生活力 (二)红墨水法快速测定种子生活力
(一)T.T.C法快速鉴定种子生活力 1、实验原理 凡是有生命活力的种子胚,在呼吸作用过程中都有氧化还原反应,而无生命活力的种子胚则没有此反应。当TTC(氯化三苯基四氮唑)深入种子胚的活细胞内时,被种胚中的脱氢辅酶还原成不溶性的红色稳定不扩散的TTF(三苯甲基赞)。
2、材料和用具 (1)实验材料:水稻、棉花久经贮藏后部分丧失生活力的种子(陈种)和新鲜的种子(新种)。 (2)实验用具:培养皿、烧杯、镊子、滤纸、刀片、温箱、天平、蒸馏水、小木板等。 (3)实验试剂: 0.1%T.T.C溶液:称取T.T.C 0.1克,加入95%酒精少量溶于小烧杯中,然后加蒸馏水至100ml。避光保存,若溶液变红色不可再用。
3、实验步骤: ①浸种:取待测水稻或棉花种子50粒预浸,小麦种子浸2-3小时,籼稻种子浸6-8小时,粳稻种子浸24小时。水稻种子应剥除谷壳,并保持浸种温度在30-35℃,以增强种胚的呼吸强度,加速种子吸水,是的染色更加迅速。 ②染色:将浸种的水稻、棉花种子,剥去种皮,用刀片沿腹沟纵切两半,水稻种子沿胚的中心线纵切为两半(测定的一半一定要带胚),取其中的一半置于培养皿中,培养皿要编号。在培养皿中加入适量的0.1%T.T.C溶液,以覆盖种子为度,然后置于40 ℃恒温箱中约0.5-1小时,然后观察结果,根据种子胚部是否产生红色反应以鉴定其生活力。 ③计算:种子活力(%)=有活力的种子数/种子总数×100%
(二)红墨水法快速测定种子生活力 1、实验原理 凡是有活力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性,选择性吸收物质的能力,一般染料不能进入细胞内,胚部不染色。而丧失活力的种子,其胚部细胞原生质膜会丧失选择吸收能力,于是染料便能自由进入死细胞内而染色,所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的活力。
2、实验材料和用具 (1)实验材料:水稻、棉花久经贮藏后部分丧失生活力的种子,新鲜的种子。 (2)实验用具:恒温箱、烧杯、培养皿、漏斗、镊子 (3)实验试剂:5%的红墨水溶液:红墨水5ml加水95ml即可。
3、实验步骤 ①浸种:同上述TTC法。 ②染色:取经过浸泡的种子,沿胚的中心线纵切为两半,将一半置于培养皿中,加入少量5%的红墨水(以淹没种子为度),染色10-15分钟(如果温度高可短些)。染色后取出洗净,至冲洗液无色为止。检查种子的死活,凡种胚不着色或着色很浅者为活种子;凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。 (不论是活种子或死种子的胚乳均染成红色) ③计算:种胚不着色或是着色浅的种子数,算出活种子的百分率。 种子活力(%)=有活力的种子数/种子总数×100%
4、注意事项 以上介绍的两种方法都是以细胞对该物质的渗透为前提的,因此只能快速的了解种子具有的发芽潜力,为急需之用。
三、作业 1、比较TTC法与红墨水法两种测定方法的优缺点。 2、列表格比较两种方法测定的水稻与棉花的新种与陈种的测定结果。