320 likes | 498 Views
بسم الله الرحمن الرحيم. آزمایشات غربالگری و تاییدی تعیین بتالاکتامازهای با طیف گسترش یافته( ESBLs ) در باسیل های گرم منفی. دکتر هنگامه زندی عضو هیئت علمی گروه میکروب شناسی دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد 92/12/8. مکانیسم اثر آنتی بیوتیک ها. DNA synthesis Fluoroquinolones.
E N D
آزمایشات غربالگری و تاییدی تعیین بتالاکتامازهای با طیف گسترش یافته( ESBLs ) در باسیل های گرم منفی دکتر هنگامه زندی عضو هیئت علمی گروه میکروب شناسی دانشگاه علوم پزشکی شهید صدوقی یزد 92/12/8
مکانیسم اثر آنتی بیوتیک ها DNA synthesis Fluoroquinolones Inhibition of Cell wall synthesis Penicillins Cephalosporins Carbapenems Glycopeptides β-lactams RNA synthesis Rifampicin Protein synthesis Macrolides Chloramphenicol Tetracycline Aminoglycosides Folic acid synthesis Sulfonamides Trimethoprim
Natural penicillins:benzylpenicillin (penicillinG), phenoxymethyl penicillin (penicillin V) Penicillinase – resistant penicillinsmethicillin, naficillin, oxacillin, cloxacillin Active against all ß-hemolytic streptococci, meningococci and most G(+) anaerobes, poor activity against G(-) rods. Similar to natural penicillins ,except enhanced activity against Staphylococci Penicillins
Broad-spectrum penicillins :aminopenicillins (ampicillin , amoxicillin , carbenicillin, ticarcillin), ureidopenicillins (piperacillin) ß-Lactam with ß-lactamase inhibitor:ampicillin/sulbactam , amoxicillin/clavulanate , ticarcillin/clavulanate , piperacillin/tazobactam Activity against G(+) cocci , active against some G(-) rods with piperacillin the most active Activity similar to natural ß-lactams, plus improved activity against ß-lactamase producing Staphylococci and selected G(-) rods, not all ß-lactamases are inhibited , piperacillin/tazobactam is most active penicillins
Narrow spectrum : (Cephalosporin I) cephalexin, cephalothin, cefazolin, cephapirin, cephradine Expanded-spectrum cephalosporins : (Cephalospoin II) cefaclor, cefuroxime Activity equivalent to oxacillin against G(+) bacteria , some G(-) activity (E.coli, klebsiella, p.mirabilis,…) Activity equivalent to oxacillin against G(+) bacteria, improved G(-) activity (Enterobacter, Citrobacter, Proteus) Cephalosporins and cephamycins
Expanded- spectrum cephamycins : cefotetan,cefoxitin Broad spectrum : ( cephalospoin III) cefexime, cefotaxime, ceftriaxone, ceftazidime Extended spectrum: (cephalosporin IV) cefepime, cefpirome Activity similar to expanded-spectrum cephalosporins but less susceptible to ßlactamase Activity equivalent to oxacillin against G(+) bacteria, improved G(-) activity to include Pseudomonas Activity equivalent to oxacillin against G(+) bacteria, marginally improved G(-) activity Cephalosporins and cephamycins
Action of a b-lactamase S H2O N Inactive penicilloate O COOH S Active penicillin HN O OH COOH
ESBLs • ازسال 1980 گروههاي جديد آنتي بيوتيكي بنام اكسي ايمينوسفالوسپورين كه نسبت به فعاليت هيدروليتيك بتالاكتاماز مقاوم بوده جهت درمان عفونتهاي جدي باكتري هاي گرم منفي مورد استفاده قرار گرفته است. • رواج استفاده از سفالوسپورين هاي طيف وسيع و آزترئونام ها در درمان بيمار ي هاي عفوني باكتريال، منجر به بروز دسته جديدي از اين آنزيمها به نام بتالاکتاماز های وسیع الطیف شده است. • آنزیم TEM، اولین بار در سال 1965 از کشت خون فردی بنامTemoneria گزارش شد.
انتشار ESBLs • 1963Ampicillin; 1st broad spectru penicillin • 1965 TEM -lactamases in E. coli • 1969 TEM -lactamase in P. aeruginosa • 1974 TEM in H. influenzae& N. gonorrhoeae • Now TEM in 30-60% E. coli & enterobacteria & in 5-20% of H. influenzae& gonococci
ESBLs • بتالاکتاماز های وسیع الطیف، انزیم هایی هستند که بروش های زیر بوجود می آیند: • موتاسیون در ژن های وابسته به پلاسمید های مولد بتالاکتاماز های شایع مانند TEM-1، SHV-1 و OXA-10 • موتاسیون در آنزیم های طبیعی مانند بتالاکتاماز های CTX-M • ESBLs ، توسط اسید کلاولانیک مهار می شوند.
Extended Espectrum Beta-Lactamases • باسیل های گرم منفی تولید کننده ESBLs • K. oxytoca • K.pneumoniae • E.coli • P.mirabilis • Enterobacter cloacae • E. aerogenes • Serratiamarcesens • Citrobacterdiversus • Providenciastuartii • Proteus mirabilis • Salmonella typhimurium • Pseudomonas aeruginosa • Burkholderiacepacia • Acinetobacter
ESBLs • باکتری های تولید کنندهESBLs به تمام پنی سیلین ها، سفالوسپورینها و آزترونام مقاوم هستند. • بوسیله مهار کننده های بتالاکتاماز ( اسید کلاولانیک، سالباکتام و تازوباکتام) مهار می شوند. TEM (IRT) ESBLsمقاوم بهمهار کننده بتالاکتامازگزارش شده است. • ESBLs در مقابل سفامایسین و کارباپنم ها فعال نیستند. • پلاسمید های کد کننده ESBLs ممکن است ژن های مقاومت به سولفامتوکسازول-تریمتوپریم و آمینوگلیکوزید ها را حمل کنند. • ممکن است در سویه های تولید کننده ESBLs، مقاومت کروموزومی به فلوروکینولون ها یافت شود.
ESBLs • بتالاکتامازهای وسیع الطیف اغلب توسط پاتوژن های عفونت های بیمارستانی در بخشهای مختلف بیمارستان ها دیده می شود • ICU • سوختگی • انکولوژی • اطفال - در کشور های مختلف همه گیری ایجاد نموده اند
ESBLs • جهت شناسایی ESBL ها چندین روش مختلف پيشنهاد شده است: • يك غربالگري اوليه براي حساسيت كاهش يافته نسبت به آنتي بيوتيك هاي پيشنهادي (CLSI)Clinical and Laboratory Standards Institute است. • سپس انجام آزمون هاي تأييدي، براي اثبات اثر سينرژيسم بين يك نشانگرسفالوسپورين و يك مهار كننده بتالاكتامازي مي باشد.
شناسایی باکتری های مولد ESBLs • غربالگری اولیه: مقاومت نسبت به سفالوسپورین های نسل سوم ( مانند سفتازیدیم، سفوتاکسیم و سفتریاکسون) • Disk diffusion • Broth microdilution • آزمایشات تاییدی: ایزوله های مقاوم به سفتازیدیم و سفوتاکسیم مورد بررسی قرار میگیرند • Double Disk synergy test • Combination disk • Etest • با استفاده از آنتی بیوتیک ها : • Ceftazidime • Ceftazidime /clavulanic acid و • Cefotaxime • Cefotaxime/clavulanic acid
Combination Disk method • اگر هاله عدم رشداطراف د يسك هاي حاوي كلاوو نيك اسيد بزرگتر يا مساو ي 5mmنسبت به بدون كلاوو نيك اسيد باشد سو يه مورد نظر را می توان تولید کننده ESBLs در نظر گرفت.
- دیسک حاوی اسید کلاولانیک در مرکز گذاشته شده و در اطراف ان دیسک های سفتازیدیم و سفوتاکسیم گذاشته می شود. بصورتیکه فاصله مرکز از مرکز دو دیسک دقیقا 2 میلیمتر باشد. • افزایش هاله عدم رشد در بین دو دیسک سفالوسپوین و • کلاولانیک اسید مثبت تلقی می شود.
Etest for ESBLs Cefotaxime Cefotaxime + clavulanate
Etest for ESBLs Cefotaxime Cefotaxime + clavulanate
آنزیم های شبه AmpC که توسط پلاسمید کد می شوند، الگویی مشابه ESBL ها داشته که منجر به کاهش حساسیت نسبت به پنی سیلین ها، سفالوسپورین ها و آزترونام و همچنین سفامایسین ها می شود. • بین باکتری ها قابل انتقالند • این انزیم ها با واسطه پلاسمید از آنزیم های کروموزومی طبیعی در سایر باکتری ها منشا گرفته اند، اساسا در K.pneumoniae و E.coli یافت می شوند. • برخلاف ESBLs ، توسط اسید کلاولانیک مهار نمی شوند.