第十二章 细胞分化与基因表达调控

1. 第十二章 细胞分化与基因表达调控 • 细胞分化 • 癌细胞 • 真核基因表达调控 • 专题：基因的表观遗传调控

2. 细胞分化失常的三腿女婴

3. 三腿女婴的X光透视图

4. 细胞生长 基因表达调控 细胞代谢 细胞增殖 细胞分化 细胞类型形成 组织器官形成 个体发育 细胞通讯 细胞衰老 细胞死亡 …… 细胞的重大生命活动： 细胞分化（cell differentiation）： 经分裂形成在形态、结构和功能上不同的稳定的细胞类群的过程；是个体发育的基础和核心。

5. 细胞类型1 细胞类型2细胞类型3 …… 去分化 细胞衰老细胞凋亡 永生细胞 （癌症） 细胞分化 增殖 细胞分化与机体的正常功能： • 细胞分化是个体行使正常功能的保证。 • 本质：细胞的基因组相同，但表达谱不同；使细胞 • 能行使不同的功能（分工）； • 核心：基因是如何有序表达的？（调控）。

6. 第一节 细 胞 分 化 一、基本概念 （一）基因的选择性表达（主线） 实验证据（分子杂交）： 不同的细胞类型（cell types)中，DNA相同，mRNA种类不同，蛋白质种类不同。 结论：相同的基因组在不同细胞中的选择性表达； 细胞分化是基因选择性表达的结果。

7. （二）管家基因和奢侈基因 • 管家基因（housekeeping genes)：维持细胞基本功能所必需的基因，在所有细胞类型中均表达。e.g., 肌动蛋白、微管蛋白、组蛋白、核糖体蛋白、TAC 循环的关键酶，etc. • 组织特异性基因（tissue-specific genes): 在不同的细胞类型中特异性地表达，使细胞形成特定的形态结构，行使特定的功能。e.g., 卵清蛋白、胰岛素、血红蛋白，etc. • 调节基因（regulatory genes): 调节基因的表达。(?)

8. （三）组织特异性基因调控的基本模式 细胞分化过程是由一系列基因产物（regulatory proteins）调控的。 i.e., 每个基因的表达都必须： 在正确的细胞中； 在正确的时间； 对正确的信号产生正确的反应； 产生正确的表达水平。 问题：细胞是如何协调（coordinate）这一过程的？ 答案：一个关键的调控蛋白，可以调控一系列下游基因，完成细胞分化。

9. 肾上腺（糖）皮质激素／受体的调控模式

10. MyoD在骨骼肌细胞分化中的关键作用 比喻：关键调控蛋白－打开组合密码锁的最后一个数字。

11. 比喻：调控蛋白，如同单词和文章。Limited words unlimited meaning 组合调控：少数调控蛋白完成众多细胞类型的分化

12. ey基因 早期细胞（发育成腿） 腿中眼细胞分化 眼形成 例子：眼形成的关键调控蛋白Ey（果蝇）

13. （四）单细胞生物中的细胞分化 （进化的中间类型）

14. （五）转分化和再生 转分化（trans-differentiation）：由一种分化的细胞类型转化为另一种细胞类型。 转分化： 去分化 再分化 （dedifferentiation） （redifferentiation） 再生：转分化 重新启动细胞周期（G0－M) 多能干细胞 例子：植物细胞 愈伤组织 根芽形成 植株再生 动物：伤口愈合；肝再生；Wolftion晶体再生；低等 生物的肢体再生；etc. （神经细胞分裂再生？） 增殖 去分化 再分化

15. 二、影响细胞分化的因素 （一）细胞的全能性（totipotency）：单个细胞形成完整个体的能力。e.g.，受精卵、早期胚胎细胞；现已证实高度分化的细胞也具有全能性。（基础、内因） 实验证据： 植物体细胞胚胎发生（plant somatic embryogenesis）; 动物克隆（1997，多莉羊；……） 高度分化的动植物体细胞，在遗传背景（基因组DNA)和功能上均是全能的。

16. 多莉羊的克隆

17. 胚胎干细胞（embryonic stem cells, ESC） 成体干细胞：造血（骨髓）干细胞 神经干细胞 肝脏干细胞 … … 来源 干细胞 多潜能干细胞（pluripotent stem cells） 定向干细胞 （directional stem cells） 功能 干细胞（stem cells）具有部分的全能性（多潜能性，pluripotency）

18. 由胚胎干细胞（ESC）制造嵌合鼠

19. 干细胞技术在治疗性组织工程中的应用

20. 造血干细胞的分化（hemopoiesis）

21. （二）影响细胞分化的因素（外因） 众多的内外因素，形成“网络”。 1，胞外信号 近端因子：细胞接触；旁分泌；自分泌；缝隙连接 环境 胞外信号 远端因子：内分泌（激素）

22. A gap junction 细胞信号的传递方式

23. 2，细胞记忆和决定 定义：细胞将信号分子的作用储藏起来，以决定分化的能力。（memory fate） 本质：特定的基因表达谱式（profile）在细胞增殖过程中的传递。 方式：a. 正反馈途径（positive feedback loop） b. 染色质构型（e.g., 常染色质和异染色质） 染色质重塑（chromatin remodeling）的作用 这些方式均是可传递的。

24. 正反馈途径

25. 染色质的不均一性

26. 3，细胞质的影响 • 受精卵的细胞质不均一性和不均等卵裂 • 细胞增殖过程中产生不均等细胞的方式

27. 细胞质不均一性的分子基础 • “决定子”(determinant) (?) • 细胞质成分：mRNA；隐藏mRNA；生殖质(germ plasm)

28. 4，细胞间的相互作用和位置效应 细胞相互作用：信号分子的作用（见前） 细胞位置效应（position effect）： “位置信息”（?） morphogen （形成素）；“sonic hedgehog”基因产物

29. 鸡胚肢体形成中sonic hedgehog 产物作为一种morphogen 的作用

30. 5，环境因素 环境 基因表达 细胞分化 性状（e.g., 性别决定，癌） 6，染色质和基因重排 例子：a. 马蛔虫：染色体消减现象 b. 纤毛虫（生殖核和营养核）： 营养核 DNA丢失 DNA重排和多倍化（专化） c. B淋巴细胞：DNA断裂和重排 抗体的多样化

31. 三、细胞分化与胚胎发育 细胞分化是发育的基础；发育（个体形成）是细胞分化的结果。 现代发育生物学（developmental biology）的核心问题： 发育过程中基因组表达的时空性及其调控机制；…… 受精卵 细胞分化 组织形成 器官形成 个体 如何调控？？

32. 目前的主要成果： • 同源异形基因群（homeotic selector genes, Hox genes）的发现（果蝇）； • Hox：高度保守，180 bp 同源框（homeobox）; 60 a.a. 同源异形结构域（homeodomain）; “helix-turn-helix” • 珠蛋白（globin）基因簇在人胚胎中红系细胞发育过程中的基因表达起重要调控作用。

33. 同源异形结构域与特异DNA序列的结合参与了基因调控同源异形结构域与特异DNA序列的结合参与了基因调控

34. Hox 基因在果蝇体节中的顺序表达

35. Hox基因的表达特征： • 顺序表达（sequential expression）（时间） • 沿躯干纵轴在体节中高表达的次序与这些基因在染色体上的排列顺序相符合（空间） • Hox基因的 homologues 在低等和高等脊椎动物中均有发现，其 homeobox 的保守性非常强，可能在这些生物的发育中起着相似的作用。

36. 第二节 癌 细 胞 比喻：动物体（人）— 一个特殊的“社会”（society）; 细胞 — “社会”中的个体（individuals）; 原则 — “个体”的自我牺牲（self-sacrifice）; 癌细胞 — “社会”中的“不轨分子”（违反上述原则， “疯狂增殖”）。 相关事件：基因突变； DNA复制；DNA修复；细胞周期； 细胞凋亡；细胞分化；基因调控；……

37. 致癌因子（carcinogens）：环境的，遗传的，内源的，…… 相关基因（cancer-critical genes）的突变 基因突变的积累 基因表达谱式的改变 细胞活动的异常（周期，粘附性，凋亡，移动性，……） 癌细胞的产生 过程：

38. 本质：体细胞基因组的改变（突变的积累）； 癌症是由众多因素引发的“基因病”（gene disorder） （体细胞）； 有别于通过性细胞传递的“遗传病”（genetic disorder） 复杂性：美国“攻克癌症”的十年计划的失败，……

39. 一、癌细胞的特征 肿瘤（tumor） 良性肿瘤（benign）：不转移 （分裂失控） 恶性肿瘤（malignant）: 转移、侵润 上皮组织：癌（carcinoma） 癌（cancer） 结缔组织和肌肉：肉瘤（sarcoma） 其他（血液）：白血病等（leukemia)

40. 特征： 1，生长和分裂失控 “永生”细胞（immortal）；细胞核增大； 分裂快；低分化，…… 宫颈癌细胞特征 A: normal; B: precancerous; C: invasive carcinoma

41. 正常和癌细胞的分裂增殖 肿瘤的生长

42. 2，侵润性和扩散性 侵润性(invasive)；扩散性（diffusible）；转移性（metastasis） 良性肿瘤（benign） 和恶性肿瘤（malignant）

43. 恶性肿瘤的转移（metastasis）

44. 3，细胞表面特性的改变 细胞表面膜蛋白（e.g., 受体蛋白）改变，引起细胞间相互作用的改变（如：粘附性改变，易于附着生长，逃避免疫系统的监视和杀伤，etc.）。

45. 4，蛋白质表达谱系和蛋白活性改变 主要特征： • 出现胚胎细胞中的蛋白（与低分化程度有关）； • 端粒酶活性增高（与无限分裂增殖有关）； • 异常表达与癌的发生发展相关的蛋白（e.g., 细胞周期 调控、凋亡、粘附、细胞扩散和移动性等）； • 癌蛋白和抑癌蛋白的表达及活性的变化（见下）。

46. 5，mRNA 表达谱系的改变 目的：比较分析癌细胞和正常细胞中 mRNA 表达谱系的不同（种类、丰度等），体现其基因表达的差异。 采用的手段：SAGE（serial analysis of gene expression）；microarray, subtractive hybridization, differential display, etc.

47. 6，遗传的不稳定性（genetic instability） DNA损伤修复能力降低 DNA复制中纠错能力降低 异常高的突变率 染色体畸变发生机率增加

48. 癌细胞的遗传不稳定性和肿瘤发生发展

49. 乳腺癌细胞中染色体数目和结构的异常

50. 染色体-9和染色体-22之间的易位与骨髓性白血病有关染色体-9和染色体-22之间的易位与骨髓性白血病有关